一种改良种子脂肪酸组分和提高含油量的方法

    公开(公告)号:CN116515891A

    公开(公告)日:2023-08-01

    申请号:CN202310609338.6

    申请日:2023-05-29

    Abstract: 本发明公开了以开花后15‑20天油菜种子cDNA为模板,克隆BnKAS2基因和BnLACS9基因的cDNA序列,以油菜叶片DNA为模板克隆napin启动子序列,以PBI121质粒为模板克隆nos终止子序列,以PMDC83载体为骨架使用酶切连接的方法构建BnKAS2基因和BnLACS9共表达载体,本发明的优点:弥补了BnKAS2单独过表达对脂肪酸合成带来的负面影响,促进了脂肪酸的合成,同时在单独过表达BnKAS2的基础上进一步降低了C16:0饱和脂肪酸的比例,提升了品质;可以改良拟南芥、油菜或其他油料作物脂肪酸组分和提高含油量;可以提高拟南芥、油菜或其他油料作物的产量和品质。

    一种随机多肽AD酵母文库的构建方法及应用

    公开(公告)号:CN119162675A

    公开(公告)日:2024-12-20

    申请号:CN202411121973.0

    申请日:2024-08-15

    Abstract: 本发明公开了一种随机多肽AD酵母文库的构建方法,通过合成随机片段并进行PCR扩增,使用片段扩增引物,得到了双链序列;利用Gateway BP反应将PCR产物构建到入门载体中,形成了初级文库;通过Gateway LR反应将步骤二的质粒文库构建到目的载体中,生成了酵母双杂交AD质粒文库;将二次质粒文库转化到酵母菌株Y187中,形成了Y187AD标记的随机肽文库。本发明的优点:具有高度可操作性,具有易于操作和文库构建的特点;具有多样性和复杂性;具有高度可靠性和灵敏度:能够有效地筛选出具有高亲和力和特异性的多肽配体;具有快速筛选功能,提高筛选效率;可应用于多种研究领域。

    菠萝转录因子AcWRKY31基因的克隆、表达载体构建及其在调控植物干旱中的应用

    公开(公告)号:CN117737117A

    公开(公告)日:2024-03-22

    申请号:CN202311785358.5

    申请日:2023-12-22

    Abstract: 本发明公开了菠萝转录因子AcWRKY31基因的克隆方法、表达载体及其在调控植物干旱中的应用,先提取金菠萝(下称MD2)叶片的RNA,反转录获得cDNA;再以cDNA为模板,通过特异性引物AcWRKY31‑F,AcWRKY31‑R进行PCR扩增获得AcWRKY31的全长基因序列。将AcWRKY31基因连接到pENTR载体上并进行转化,连接成功并测序无误后,将已连接到GATEWAY入门载体pENTR上的目的载体与中间载体pGWB605进行LR重组反应。构建成功后,将目的载体转入农杆菌GV3101中,利用农杆菌介导的遗传转化方法将目的基因导入菠萝愈伤组织,通过潮霉素筛选,CTAB法提取DNA进行PCR鉴定,获得菠萝转基因AcWRKY31的阳性菠萝植株。转基因菠萝植株在干旱胁迫下,过表达AcWRKY31增强了转基因菠萝对干旱胁迫的敏感性。说明AcWRKY31基因具有增强菠萝对干旱敏感性的作用。

    一种基于直接器官发生的灰绿碱蓬再生方法

    公开(公告)号:CN117502238A

    公开(公告)日:2024-02-06

    申请号:CN202311670400.9

    申请日:2023-12-07

    Abstract: 本发明公开了一种基于直接器官发生的灰绿碱蓬再生方法,其包括种子萌发、外植体灭菌和原位芽诱导,所述原位芽诱导包括以下步骤:步骤一、将灭菌好的碱蓬茎切成节段,作为外植体进行实验;步骤二、MS培养基灭菌后,加入6‑BAP和IBA,倒入培养皿内,待其凝固;步骤三、将外植体放置于培养皿上,放置在黑暗或光照环境中;步骤四、两周后,将外植体转移到新的培养皿上进行继代培养,两次继代培养后即可获得碱蓬再生苗;步骤五、从外植体上分离幼苗枝条,扦插到培养基上,进行生根,生根之后的幼苗用于土壤种植。本发明的优点:无需诱导愈伤组织,直接从灰绿碱蓬茎段中诱发芽发生;避免体细胞突变导致后代遗传物质的变异,减少产业化过程中个体的变异性。

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