公开(公告)号：CN118109501A

公开(公告)日：2024-05-31

申请号：CN202311775305.5

申请日：2023-12-22

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 王路路 ,  柴改凤 ,  秦源 ,  黄东平 ,  王小媚 ,  程焱 ,  郑平 ,  高婧嫒

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/29 ,  A01H5/00 ,  A01H6/22

Abstract: 本发明公开了菠萝转录因子AcWRKY38基因的克隆方法、表达载体构建及其在调控植物冷胁迫中的应用，首先提取菠萝叶片的RNA，反转录获得cDNA；再以菠萝cDNA为模版，根据目的基因的序列设计特异性引物，通过特异性引物AcWRKY38F，AcWRKY38R进行PCR扩增获得目的片段。AcWRKY38基因的目的片段连接到pENTR载体上并进行热激转化，连接成功进行PCR鉴定，测序无误后，提取质粒。然后将已连接上GATEWAY入门载体pENTR的目的载体与中间载体pGWB505进行LR重组反应。构建成功后，利用农杆菌介导的遗传转化技术将目的基因转入菠萝愈伤组织，通过潮霉素筛选，获得菠萝过表达阳性植株。将转基因菠萝植株通过冷胁迫处理，通过表型观察发现，过表达AcWRKY38转基因菠萝植株增强了菠萝耐冷和抗逆性，有利于培育高产、优质、高抗性的优良菠萝品种。