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公开(公告)号：CN115094060B
公开(公告)日：2024-08-06
申请号：CN202210727672.7
申请日：2022-06-23
Applicant: 湖南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 一种基于LAMP‑CRISPR/Cas12a可视化检测PCV2核酸的试剂盒，包括CRPSPR‑Cas12检测体系和LAMP扩增引物，是将LAMP检测方法和CRPSPR‑Cas12检测方法相结合，建立的可实现猪圆环病毒2型核酸可视化检测方法。本检测方法具有优良的特异性、灵敏性和可重复性，且操作简便，无需昂贵的仪器设备，并具有可视化优势，将该检测方法向猪场及检测单位推广应用，有利于实现猪圆环病毒2型相关病的快速诊断。
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公开(公告)号：CN108410907A
公开(公告)日：2018-08-17
申请号：CN201810192797.8
申请日：2018-03-08
Applicant: 湖南农业大学
Abstract: 一种基于CRISPR/Cas9技术实现HMGCR基因敲除的方法，是设计两个针对HMGCR基因的CRISPR/Cas9靶标序列，体外合成gRNA单链，经过退火处理获得两个gRNA双链DNA目的插入片段，并分别插入PX459(pSpCas9(BB)-2A-Puro)V2.0载体中，获得靶向HMGCR基因两个不同位点的质粒；分别转染该两质粒至PK15细胞中，以嘌呤霉素处理细胞，提取处理后的细胞基因组DNA进行PCR扩增，PCR产物变性、退火后再利用T7E1进行HMGCR基因敲除鉴定。本方法能用于分析HMGCR基因敲除后的序列和mRNA表达情况，能利用PCR结合T7E1酶处理方法验证有无脱靶现象，从而确定基于靶标序列HMGCR-gRNA的特异性。本方法不仅可应用于细胞、动物模型中实现HMGCR基因的定点敲除，而且对于实现其它基因的敲除具有参考价值，并具有效果好、简便、经济、时间短等优点。
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公开(公告)号：CN106591481A
公开(公告)日：2017-04-26
申请号：CN201710061756.0
申请日：2017-01-26
Applicant: 湖南农业大学
CPC classification number: C12Q1/6888
Abstract: 本发明提供一种可用于检测猪萨姆氏后圆线虫的特异性引物，特异性引物包括上游引物MsJB3F和下游引物MsJB4.5R，Ms JB3F的核苷酸序列为5'‑GAAAGAATTCATGAATTCAAAATT‑3'，Ms JB4.5R的核苷酸序列为5'‑GAAATTYATATTGTATTTAATTTTTG‑3'。本发明还提供一种可用于检测猪萨姆氏后圆线虫的检测试剂盒，检测试剂盒包括用于对样品DNA进行裂解的DNA裂解液、对样品DNA进行扩增的PCR反应液、以及引物混合液，引物混合液包括前述的特异性引物。本发明还提供一种前述的特异性引物在检测猪萨姆氏后圆线虫的应用。本发明提供的特异性引物和检测试剂盒具有特异性高、检测效率高、保存时间长的特点。
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公开(公告)号：CN116832039A
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202310605257.9
申请日：2023-05-26
Applicant: 云南省畜牧兽医科学院 , 湖南农业大学 , 云南农业大学
IPC: A61K31/5025 , A61P31/22
Abstract: 本发明公开了CHR‑6494在制备防治猪伪狂犬病的药物中的应用，CHR‑6494的结构式如下：#imgabs0#本发明中确定了抑制剂CHR‑6494对PRV增殖具有明显抑制作用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115094060A
公开(公告)日：2022-09-23
申请号：CN202210727672.7
申请日：2022-06-23
Applicant: 湖南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 一种基于LAMP‑CRISPR/Cas12a可视化检测PCV2核酸的试剂盒，包括CRPSPR‑Cas12检测体系和LAMP扩增引物，是将LAMP检测方法和CRPSPR‑Cas12检测方法相结合，建立的可实现猪圆环病毒2型核酸可视化检测方法。本检测方法具有优良的特异性、灵敏性和可重复性，且操作简便，无需昂贵的仪器设备，并具有可视化优势，将该检测方法向猪场及检测单位推广应用，有利于实现猪圆环病毒2型相关病的快速诊断。
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公开(公告)号：CN108342490A
公开(公告)日：2018-07-31
申请号：CN201810345262.X
申请日：2018-04-17
Applicant: 湖南农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种检测曼氏迭宫绦虫的引物组、试剂盒及其使用方法，其中，引物组包括：外引物cox1-F3：TTTACTGTGGGGTTGGAC；外引物cox1-B3：CAAGCAGAAAGAATTATACCAGT；内引物cox1-FIP：ACCTTTATACCCGTGGGAACCGAATTCAGACTGCTGTTTTCTTTAGTTCT；内引物cox1-BIP：AATAGTCGTGTTTCGTTGCGTGAATTCCACCCATAGTAAACAACACAAT；上述引物对应的目的基因为曼氏迭宫绦虫DNA中的cox1基因片段。该引物组、试剂盒及其使用方法灵敏度高、特异性高、操作简单便捷。
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公开(公告)号：CN106868115A
公开(公告)日：2017-06-20
申请号：CN201710061745.2
申请日：2017-01-26
Applicant: 湖南农业大学
CPC classification number: C12Q1/6888 , C12Q2600/158
Abstract: 本发明提供一种可用于检测猪长刺后圆线虫的特异性引物，特异性引物包括上游引物MeJB3 F和下游引物MeJB4.5 R，MeJB3 F的核苷酸序列为：5'‑TGAAAGAATTCATGAATTGAAAACG‑3'，MeJB4.5 R的核苷酸序列为：5'‑AGATTTCATATTGTATTTAATTTTTG‑3'。本发明还提供一种可用于检测猪长刺后圆线虫的检测试剂盒，检测试剂盒包括用于对样品DNA进行裂解的DNA裂解液、对样品DNA进行扩增的PCR反应液、以及引物混合液，引物混合液包括前述的特异性引物。本发明还提供一种前述的特异性引物在检测猪长刺后圆线虫的应用。本发明提供的特异性引物和检测试剂盒具有特异性高、检测效率高、保存时间长的特点。
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公开(公告)号：CN108410907B
公开(公告)日：2021-08-27
申请号：CN201810192797.8
申请日：2018-03-08
Applicant: 湖南农业大学
Abstract: 一种基于CRISPR/Cas9技术实现HMGCR基因敲除的方法，是设计两个针对HMGCR基因的CRISPR/Cas9靶标序列，体外合成gRNA单链，经过退火处理获得两个gRNA双链DNA目的插入片段，并分别插入PX459(pSpCas9(BB)‑2A‑Puro)V2.0载体中，获得靶向HMGCR基因两个不同位点的质粒；分别转染该两质粒至PK15细胞中，以嘌呤霉素处理细胞，提取处理后的细胞基因组DNA进行PCR扩增，PCR产物变性、退火后再利用T7E1进行HMGCR基因敲除鉴定。本方法能用于分析HMGCR基因敲除后的序列和mRNA表达情况，能利用PCR结合T7E1酶处理方法验证有无脱靶现象，从而确定基于靶标序列HMGCR‑gRNA的特异性。本方法不仅可应用于细胞、动物模型中实现HMGCR基因的定点敲除，而且对于实现其它基因的敲除具有参考价值，并具有效果好、简便、经济、时间短等优点。
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公开(公告)号：CN106591482A
公开(公告)日：2017-04-26
申请号：CN201710061757.5
申请日：2017-01-26
Applicant: 湖南农业大学
CPC classification number: C12Q1/6888
Abstract: 本发明提供一种可用于检测猪复阴后圆线虫的特异性引物，特异性引物包括上游引物MpJB3 F和下游引物MpJB4.5 R，MpJB3 F的核苷酸序列为5'‑ACTCGCATATATTTGTATAATATATG‑3'，MpJB4.5 R的核苷酸序列为5'‑TTTCATTCATCGACGCAAAATTCAT‑3'。本发明还提供一种可用于检测猪复阴后圆线虫的检测试剂盒，检测试剂盒包括用于对样品DNA进行裂解的DNA裂解液、对样品DNA进行扩增的PCR反应液、以及引物混合液，引物混合液包括前述的特异性引物。本发明还提供一种前述的特异性引物在检测猪复阴后圆线虫的应用。本发明提供的特异性引物和检测试剂盒具有特异性高、检测效率高、保存时间长的特点。
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