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公开(公告)号：CN116790539A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202310677702.2
申请日：2023-06-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种β‑(2,6)果聚糖蔗糖酶突变体的构建及应用，属于酶的基因工程技术领域。本发明将微生物Pseudomonas orientalis来源的β‑(2,6)果聚糖蔗糖酶作为亲本，构建了单点突变体酶R91T。突变体R91T催化蔗糖的聚合能力明显提高，在1h内将20％的蔗糖和20％的乳糖转化为低聚乳果糖的转化率可达40％，同时该突变体将30％蔗糖转化为高分子量果聚糖的转化率达49％。这一发现对于工业化制备低聚乳果糖，以及β‑(2,6)果聚糖蔗糖酶的工业化应用有重要的研究价值。
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公开(公告)号：CN113201512B
公开(公告)日：2022-03-15
申请号：CN202110613892.2
申请日：2021-06-02
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产蔗果三糖的菊糖蔗糖酶突变体，属于酶的基因工程技术领域。本发明将来源于微生物Lactobacillus reuteri 121的部分序列截断的菊糖蔗糖酶作为亲本，构建了单点突变体酶R425W。R425W显著改变了产物链长，使菊糖蔗糖酶失去合成多糖的能力，大量积累低聚果糖，尤其是蔗果三糖。经反应条件优化，R425W生产蔗果三糖的产量最高可达206g/L。生产条件为pH 6.5的磷酸盐缓冲液，45℃，700g/L的蔗糖，15μg/mL的加酶量，反应时间为36h。这一发现对于工业化制备蔗果三糖，以及菊糖蔗糖酶的工业化应用有重要的研究价值。
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公开(公告)号：CN113308456B
公开(公告)日：2022-03-04
申请号：CN202110496246.2
申请日：2021-05-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性增强的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体，属于酶的基因工程技术领域。本发明公开了以来源于微生物Thermoclostridium caenicola的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶作为亲本，将107位的甘氨酸Gly突变为脯氨酸Pro，155位的苯丙氨酸Phe突变为酪氨酸Tyr，162位的天冬氨酸Asp突变为苏氨酸Thr，70位的丙氨酸Ala突变为脯氨酸Pro，获得单点突变体酶G107P、F155Y、D162T、A70P和四点突变体酶G107P/F155Y/D162T/A70P，热力学和动力学稳定性得到了提高，在工业化制备D‑阿洛酮糖具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN113215125A
公开(公告)日：2021-08-06
申请号：CN202110615300.0
申请日：2021-06-02
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性和酶活提高的菊糖蔗糖酶突变体，属于酶的基因工程技术领域。本发明将来源于微生物Lactobacillus gasseri DSM 20604的菊糖蔗糖酶的截断酶作为亲本，构建了四点突变体酶A310E/S346A/I478M/A491S(简称M4)，并进一步截断N‑端33个氨基酸的突变体M4N‑33。M4N‑33在55℃的半衰期由原来的不足5min提高到大约10h，熔融温度由原来的55.00℃提高到61.27℃，最适反应温度由原来的55℃提高到60℃，在最适催化条件下的酶活提高了52％。这一发现对于工业化制备微生物菊糖及转糖苷酶的工业化应用有重要的研究价值。
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公开(公告)号：CN112680426A
公开(公告)日：2021-04-20
申请号：CN202011580654.8
申请日：2020-12-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种热稳定性提高的淀粉蔗糖酶突变体，属于酶工程领域。本发明将来源于微生物Calidithermus timidus DSM 17022的淀粉蔗糖酶(简称CT‑ASase)作为亲本，构建了四点突变体酶L382P/S414N/P618I/H631K(简称M45)。M45在65℃的半衰期由原来的23.58h提高到43.72h，在70℃的半衰期由原来的71min提高到110min，熔融温度由原来的74.29℃提高到76.44℃，最适反应温度由原来的55℃提高到60℃。这一发现对于工业化制备纯直链淀粉及转糖苷酶的工业化应用有重要的研究价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115960879B
公开(公告)日：2025-01-21
申请号：CN202310086878.0
申请日：2023-01-30
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/90 , C12N15/61 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P19/24 , C12P19/02 , C12Q1/533 , G01N21/35 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体文库的高通量筛选方法及获得的突变体，属于酶工程技术领域。本发明所提供的高通量筛选方法是基于在酸性Si(IV)–Mo(Ⅵ)显色液中，D‑果糖可将黄色钼酸盐Mo(Ⅵ)还原，生成蓝色钼酸盐Mo(V/Ⅵ)，其颜色深浅在一定范围内与D‑果糖的含量成正比，且在相同浓度水平下，D‑阿洛酮糖不会干扰D‑果糖的测定。同时，本发明还提供了D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶四点突变体，与该酶野生型相比，其在60℃下孵育1h后的残余酶活提升69.8％，最适温度提高5℃，在60℃下的半衰期值由0.64h增加到7.30h，因此其工业应用潜力得到明显提升。
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公开(公告)号：CN118834922A
公开(公告)日：2024-10-25
申请号：CN202410898690.0
申请日：2024-07-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种特异性合成低分子量菊糖的菊糖蔗糖酶及其应用，其将氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的蛋白质作为菊糖蔗糖酶应用在合成菊粉中，其通过潜在的“非延续性”糖链延伸机制，特异性地合成了聚合度为3～40、平均分子量为2.1×103g/mol的菊糖，而不积累高分子量的菊糖。本发明实现了低分子量菊糖的高效生物合成，产率达50.6％，且生产成本低，所用设备少，具备工业规模化生产的潜力。
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公开(公告)号：CN118773169A
公开(公告)日：2024-10-15
申请号：CN202410935114.9
申请日：2024-07-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种菊糖蔗糖酶突变体及其应用，本发明将来源于微生物Neobacillus bataviensis的菊糖蔗糖酶作为亲本，利用基因突变技术，将其149位的苏氨酸Thr替换成丝氨酸Ser，获得菊糖蔗糖酶的突变体酶，其氨基酸序列如SEQ ID No:1所示；本发明获得的菊糖蔗糖酶的突变体酶在最适催化条件下催化底物蔗糖合成菊糖过程中，相对总酶活相较于未突变前提升了57％，极大的加快了菊糖酶法合成的工业化进程。
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公开(公告)号：CN118703469A
公开(公告)日：2024-09-27
申请号：CN202410696388.7
申请日：2024-05-31
Applicant: 中牧实业股份有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种玉米赤霉烯酮水解酶突变体及其应用，其以来源于Monosporascus sp.GIB2中的内酯水解酶基因为模板，对其第157位和第163位的氨基酸进行定点突变，获得M157Y、G163S、M157Y/G136S 3种突变体。其中的双点突变体M157Y/G136S，在pH 9.0、60℃条件下，能够在3min内高效降解玉米赤霉烯酮及其衍生物，相较原始酶而言，其对玉米赤霉烯酮及其衍生物的降解酶活和底物亲和力均有显著提升，降解酶活分别提升1.4(α‑ZOL)和1.3(α‑ZAL)倍，具有重要的饲料工业应用和经济价值。
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公开(公告)号：CN115417507A
公开(公告)日：2022-12-02
申请号：CN202210737434.4
申请日：2022-06-21
Applicant: 江南大学
IPC: C02F3/34 , B09C1/10 , C09K17/14 , C12N9/02 , C02F101/38
Abstract: 本发明公开了一种高效降解兽药抗生素残留的漆酶及其应用，属于环境生物技术领域。本发明筛选到一种来源于Lysinibacillus fusiformis的漆酶，相比现有的技术，本发明筛选到的漆酶能够耐受80℃的高温，具有在更高温度下长时间稳定降解抗生素，良好的耐热性和优异的降解效率等能力。能够在短时间内降解大量抗生素，并且生产成本低，所用设备少，有助于工业上对兽药抗生素残留的控制。
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