重组猪δ冠状病毒感染性克隆及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN117286162B

    公开(公告)日:2024-08-23

    申请号:CN202310416162.2

    申请日:2023-04-14

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了重组猪δ冠状病毒感染性克隆及其构建方法和应用,包括以下步骤:第一轮基因重组扩增打靶片段;电转化打靶片段得到阳性克隆;将得到的阳性克隆通过第二轮重组去掉酶切位点和抗性基因得到表达目的基因的PDCoV感染性克隆。本发明建立了基于细菌人工染色体的PDCoV反向遗传学系统,通过Red同源重组技术,在体外快速高效地编辑PDCoV基因组,为研究病毒的分子生物学特性、致病机理以及开发基因工程疫苗提供有力的技术平台,该方法高效便捷、特异性强,为体外编辑PDCoV基因组及其它病毒基因组提供了新的方法。

    重组猪流行性腹泻病毒感染性克隆的构建方法及其感染性克隆和应用

    公开(公告)号:CN116445528B

    公开(公告)日:2024-08-09

    申请号:CN202310401917.1

    申请日:2023-04-14

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了重组猪流行性腹泻病毒感染性克隆的构建方法及其感染性克隆和应用,包括以下步骤:第一轮基因重组扩增打靶片段;电转化打靶片段得到阳性克隆;将得到的阳性克隆通过第二轮重组去掉酶切位点和抗性基因得到表达目的基因的PEDV感染性克隆。本发明建立了基于细菌人工染色体的PEDV反向遗传学系统,通过Red同源重组技术,在体外快速高效地编辑PEDV基因组,为研究病毒的分子生物学特性、致病机理以及开发基因工程疫苗提供有力的技术平台,该方法高效便捷、特异性强,为体外编辑PEDV基因组及其它病毒基因组提供了新的方法。

    一株杂交瘤细胞株、抗PDCoV NS6蛋白的单克隆抗体及其应用

    公开(公告)号:CN116218789B

    公开(公告)日:2023-09-22

    申请号:CN202310016649.1

    申请日:2023-01-06

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一株杂交瘤细胞株和由所述杂交瘤细胞株分泌产生的抗PDCoVNS6蛋白的单克隆抗体,所述抗PDCoVNS6蛋白的单克隆抗体一种具有高特异性、能够特异识别PDCoV的NS6蛋白,可用来检测猪δ冠状病毒。本发明还公开了所述杂交瘤细胞株在制备含抗PDCoVNS6蛋白的单克隆抗体的试剂、试剂盒或试纸条中的应用。本发明还公开了一种试剂、试剂盒或试纸条,含有所述杂交瘤细胞株和/或所述单克隆抗体。本发明还公开了所述杂交瘤细胞株和/或所述单克隆抗体和/或所述试剂、试剂盒或试纸条在猪δ冠状病毒的免疫检测中的应用。

    一种嵌合PEDV感染性克隆质粒、PEDV嵌合病毒及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN119506354A

    公开(公告)日:2025-02-25

    申请号:CN202411658963.0

    申请日:2024-11-20

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一种嵌合PEDV感染性克隆质粒、PEDV嵌合病毒及其构建方法和应用。本发明首次以PEDV基因组为骨架,成功拯救表达TGEV S蛋白胞外区的嵌合病毒,并发现与表达TGEV S蛋白的嵌合PEDV相比,表达TGEV S蛋白胞外区的嵌合病毒的TCID50可提升6.2倍。以此重组病毒作为灭活疫苗免疫小鼠,可大大提升TGEV S蛋白的免疫原性,刺激机体产生更高水平针对TGEV的中和抗体,使得针对TGEV的中和抗体效价提升了16.8倍。因此,本发明为病毒基因组的改造提供了更多可能性,也发明了一种提高TGEV灭活疫苗免疫原性的新方法,为TGEV疫苗的研发提供依据。

    一株杂交瘤细胞株、抗PDCoV NS6蛋白的单克隆抗体及其应用

    公开(公告)号:CN116218789A

    公开(公告)日:2023-06-06

    申请号:CN202310016649.1

    申请日:2023-01-06

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开了一株杂交瘤细胞株和由所述杂交瘤细胞株分泌产生的抗PDCoVNS6蛋白的单克隆抗体,所述抗PDCoVNS6蛋白的单克隆抗体一种具有高特异性、能够特异识别PDCoV的NS6蛋白,可用来检测猪δ冠状病毒。本发明还公开了所述杂交瘤细胞株在制备含抗PDCoVNS6蛋白的单克隆抗体的试剂、试剂盒或试纸条中的应用。本发明还公开了一种试剂、试剂盒或试纸条,含有所述杂交瘤细胞株和/或所述单克隆抗体。本发明还公开了所述杂交瘤细胞株和/或所述单克隆抗体和/或所述试剂、试剂盒或试纸条在猪δ冠状病毒的免疫检测中的应用。

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