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公开(公告)号：CN119506354A
公开(公告)日：2025-02-25
申请号：CN202411658963.0
申请日：2024-11-20
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种嵌合PEDV感染性克隆质粒、PEDV嵌合病毒及其构建方法和应用。本发明首次以PEDV基因组为骨架，成功拯救表达TGEV S蛋白胞外区的嵌合病毒，并发现与表达TGEV S蛋白的嵌合PEDV相比，表达TGEV S蛋白胞外区的嵌合病毒的TCID50可提升6.2倍。以此重组病毒作为灭活疫苗免疫小鼠，可大大提升TGEV S蛋白的免疫原性，刺激机体产生更高水平针对TGEV的中和抗体，使得针对TGEV的中和抗体效价提升了16.8倍。因此，本发明为病毒基因组的改造提供了更多可能性，也发明了一种提高TGEV灭活疫苗免疫原性的新方法，为TGEV疫苗的研发提供依据。
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公开(公告)号：CN117286162A
公开(公告)日：2023-12-26
申请号：CN202310416162.2
申请日：2023-04-14
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/63 , C12N15/50 , C12N7/01 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了重组猪δ冠状病毒感染性克隆及其构建方法和应用，包括以下步骤：第一轮基因重组扩增打靶片段；电转化打靶片段得到阳性克隆；将得到的阳性克隆通过第二轮重组去掉酶切位点和抗性基因得到表达目的基因的PDCoV感染性克隆。本发明建立了基于细菌人工染色体的PDCoV反向遗传学系统，通过Red同源重组技术，在体外快速高效地编辑PDCoV基因组，为研究病毒的分子生物学特性、致病机理以及开发基因工程疫苗提供有力的技术平台，该方法高效便捷、特异性强，为体外编辑PDCoV基因组及其它病毒基因组提供了新的方法。
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公开(公告)号：CN114214338A
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN202110986944.0
申请日：2021-08-26
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/45 , C12N15/11 , C12N15/65 , C12N15/50 , C12N7/01 , C12N15/86 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及猪源副流感病毒5型(PIV5)全长感染性克隆及其制备方法和应用，本发明利用一株分离自中国湖北腹泻猪的PIV5毒株，构建出以细菌质粒为骨架的病毒感染性克隆pPIV5‑HuB/YC，并能成功拯救出病毒，这是国内首次构建猪源PIV5全长感染性克隆。同时，将EGFP基因插入PIV5感染性克隆病毒基因组中，成功拯救出能表达该绿色荧光蛋白的重组PIV5病毒。在此基础之上，将猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)的S基因替换EGFP基因，并成功拯救出能表达PDCoV S的重组PIV5病毒。本发明为深入开展PIV5的基础和应用研究提供了有效的平台，具有重要的科学应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119751601A
公开(公告)日：2025-04-04
申请号：CN202411658970.0
申请日：2024-11-20
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/165 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12N15/50 , C07K16/10 , C12N15/85 , C12N7/01 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了PEDV S蛋白N‑糖基化位点突变病毒及其应用。本发明将突变病毒免疫小鼠检测S蛋白的N‑糖基化对病毒免疫原性的影响，结果发现S蛋白的N216、N324、N1261位糖基化位点单点突变的重组PEDV病毒株能够激活小鼠产生更高水平的中和抗体，可提升3.2倍（N216A）、6.7倍（N324A）、3.2倍（N1261A），这三个位点突变的重组PEDV病毒株可以作为有潜力的PEDV灭活疫苗候选株。
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公开(公告)号：CN117286162B
公开(公告)日：2024-08-23
申请号：CN202310416162.2
申请日：2023-04-14
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/63 , C12N15/50 , C12N7/01 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了重组猪δ冠状病毒感染性克隆及其构建方法和应用，包括以下步骤：第一轮基因重组扩增打靶片段；电转化打靶片段得到阳性克隆；将得到的阳性克隆通过第二轮重组去掉酶切位点和抗性基因得到表达目的基因的PDCoV感染性克隆。本发明建立了基于细菌人工染色体的PDCoV反向遗传学系统，通过Red同源重组技术，在体外快速高效地编辑PDCoV基因组，为研究病毒的分子生物学特性、致病机理以及开发基因工程疫苗提供有力的技术平台，该方法高效便捷、特异性强，为体外编辑PDCoV基因组及其它病毒基因组提供了新的方法。
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公开(公告)号：CN116445528B
公开(公告)日：2024-08-09
申请号：CN202310401917.1
申请日：2023-04-14
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/63 , C12N15/50 , C12N7/01 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了重组猪流行性腹泻病毒感染性克隆的构建方法及其感染性克隆和应用，包括以下步骤：第一轮基因重组扩增打靶片段；电转化打靶片段得到阳性克隆；将得到的阳性克隆通过第二轮重组去掉酶切位点和抗性基因得到表达目的基因的PEDV感染性克隆。本发明建立了基于细菌人工染色体的PEDV反向遗传学系统，通过Red同源重组技术，在体外快速高效地编辑PEDV基因组，为研究病毒的分子生物学特性、致病机理以及开发基因工程疫苗提供有力的技术平台，该方法高效便捷、特异性强，为体外编辑PEDV基因组及其它病毒基因组提供了新的方法。
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公开(公告)号：CN116445528A
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202310401917.1
申请日：2023-04-14
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/63 , C12N15/50 , C12N7/01 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了重组猪流行性腹泻病毒感染性克隆的构建方法及其感染性克隆和应用，包括以下步骤：第一轮基因重组扩增打靶片段；电转化打靶片段得到阳性克隆；将得到的阳性克隆通过第二轮重组去掉酶切位点和抗性基因得到表达目的基因的PEDV感染性克隆。本发明建立了基于细菌人工染色体的PEDV反向遗传学系统，通过Red同源重组技术，在体外快速高效地编辑PEDV基因组，为研究病毒的分子生物学特性、致病机理以及开发基因工程疫苗提供有力的技术平台，该方法高效便捷、特异性强，为体外编辑PEDV基因组及其它病毒基因组提供了新的方法。
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公开(公告)号：CN114214338B
公开(公告)日：2023-02-03
申请号：CN202110986944.0
申请日：2021-08-26
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/45 , C12N15/11 , C12N15/65 , C12N15/50 , C12N7/01 , C12N15/86 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及猪源副流感病毒5型(PIV5)全长感染性克隆及其制备方法和应用，本发明利用一株分离自中国湖北腹泻猪的PIV5毒株，构建出以细菌质粒为骨架的病毒感染性克隆pPIV5‑HuB/YC，并能成功拯救出病毒，这是国内首次构建猪源PIV5全长感染性克隆。同时，将EGFP基因插入PIV5感染性克隆病毒基因组中，成功拯救出能表达该绿色荧光蛋白的重组PIV5病毒。在此基础之上，将猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)的S基因替换EGFP基因，并成功拯救出能表达PDCoV S的重组PIV5病毒。本发明为深入开展PIV5的基础和应用研究提供了有效的平台，具有重要的科学应用价值。
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