公开(公告)号：CN117286162B

公开(公告)日：2024-08-23

申请号：CN202310416162.2

申请日：2023-04-14

Applicant: 扬州大学

Inventor： 牟春晓 ,  潘朔楠 ,  陈振海 ,  陈密 ,  包文斌

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/50 ,  C12N7/01 ,  A61K39/215 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明公开了重组猪δ冠状病毒感染性克隆及其构建方法和应用，包括以下步骤：第一轮基因重组扩增打靶片段；电转化打靶片段得到阳性克隆；将得到的阳性克隆通过第二轮重组去掉酶切位点和抗性基因得到表达目的基因的PDCoV感染性克隆。本发明建立了基于细菌人工染色体的PDCoV反向遗传学系统，通过Red同源重组技术，在体外快速高效地编辑PDCoV基因组，为研究病毒的分子生物学特性、致病机理以及开发基因工程疫苗提供有力的技术平台，该方法高效便捷、特异性强，为体外编辑PDCoV基因组及其它病毒基因组提供了新的方法。

公开(公告)号：CN116445528B

公开(公告)日：2024-08-09

申请号：CN202310401917.1

申请日：2023-04-14

Applicant: 扬州大学

Inventor： 陈振海 ,  潘朔楠 ,  牟春晓 ,  陈密 ,  包文斌

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/50 ,  C12N7/01 ,  A61K39/215 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明公开了重组猪流行性腹泻病毒感染性克隆的构建方法及其感染性克隆和应用，包括以下步骤：第一轮基因重组扩增打靶片段；电转化打靶片段得到阳性克隆；将得到的阳性克隆通过第二轮重组去掉酶切位点和抗性基因得到表达目的基因的PEDV感染性克隆。本发明建立了基于细菌人工染色体的PEDV反向遗传学系统，通过Red同源重组技术，在体外快速高效地编辑PEDV基因组，为研究病毒的分子生物学特性、致病机理以及开发基因工程疫苗提供有力的技术平台，该方法高效便捷、特异性强，为体外编辑PEDV基因组及其它病毒基因组提供了新的方法。

公开(公告)号：CN117286162A

公开(公告)日：2023-12-26

申请号：CN202310416162.2

申请日：2023-04-14

Applicant: 扬州大学

Inventor： 牟春晓 ,  潘朔楠 ,  陈振海 ,  陈密 ,  包文斌

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/50 ,  C12N7/01 ,  A61K39/215 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明公开了重组猪δ冠状病毒感染性克隆及其构建方法和应用，包括以下步骤：第一轮基因重组扩增打靶片段；电转化打靶片段得到阳性克隆；将得到的阳性克隆通过第二轮重组去掉酶切位点和抗性基因得到表达目的基因的PDCoV感染性克隆。本发明建立了基于细菌人工染色体的PDCoV反向遗传学系统，通过Red同源重组技术，在体外快速高效地编辑PDCoV基因组，为研究病毒的分子生物学特性、致病机理以及开发基因工程疫苗提供有力的技术平台，该方法高效便捷、特异性强，为体外编辑PDCoV基因组及其它病毒基因组提供了新的方法。

公开(公告)号：CN116445528A

公开(公告)日：2023-07-18

申请号：CN202310401917.1

申请日：2023-04-14

Applicant: 扬州大学

Inventor： 陈振海 ,  潘朔楠 ,  牟春晓 ,  陈密 ,  包文斌

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/50 ,  C12N7/01 ,  A61K39/215 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明公开了重组猪流行性腹泻病毒感染性克隆的构建方法及其感染性克隆和应用，包括以下步骤：第一轮基因重组扩增打靶片段；电转化打靶片段得到阳性克隆；将得到的阳性克隆通过第二轮重组去掉酶切位点和抗性基因得到表达目的基因的PEDV感染性克隆。本发明建立了基于细菌人工染色体的PEDV反向遗传学系统，通过Red同源重组技术，在体外快速高效地编辑PEDV基因组，为研究病毒的分子生物学特性、致病机理以及开发基因工程疫苗提供有力的技术平台，该方法高效便捷、特异性强，为体外编辑PEDV基因组及其它病毒基因组提供了新的方法。