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公开(公告)号:CN116790447B
公开(公告)日:2024-01-05
申请号:CN202311047364.0
申请日:2023-08-21
Applicant: 吉林农业大学 , 吉林省佳园再生科技有限公司
IPC: C12N1/20
Abstract: 本发明公开了以肉骨粉为原料制备的培养基及其方法和应用,涉及畜牧业有害物质处理再生技术领域,开发出配方简单的新的细菌培养基产品,拓展了关于病死动物无害化处理产物肉骨粉为原料的新的应用领域,该培养基应用在大肠杆菌、铜绿假单胞菌等革兰氏阴性细菌的培养上,菌落数显著提升,明显优于现有的LB培养基,取得了显著的进步,在革兰氏阳性菌枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的培养上与现有的LB培养基,相比菌落数目无显著性差异,且培养基配方相较于LB培养基更简单。
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公开(公告)号:CN110512010B
公开(公告)日:2023-04-07
申请号:CN201910768363.2
申请日:2019-08-20
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测大肠杆菌rRNA转录速率的试剂盒及方法,属于分子生物学检测领域。本发明提供的试剂盒包括第一分子信标、第二分子信标和第三分子信标;另外,本发明通过利用上述试剂盒可以通过大肠杆菌体内转录检测方法或大肠杆菌体外转录检测方法对大肠杆菌rRNA的转录速度以及转录产物的量进行精确的检测,其检测灵敏度可以达到0.5mg;相比于其他RNA转录速率检测方法来说,本发明实施例利用分子信标的检测方法造价低廉,操作简单,可以被广泛的应用。另外,本发明实施例提供的各个分子信标无毒无害,对环境无污染。
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公开(公告)号:CN105671016B
公开(公告)日:2019-07-26
申请号:CN201610115975.8
申请日:2016-03-02
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 提高S‑腺苷‑L‑半胱氨酸水解酶免疫原性的方法及六糖修饰ahcy蛋白,涉及蛋白免疫原性领域,其目的是为了给布鲁氏菌提供更好的疫苗候选抗原。该方法为:4℃将六糖与高碘酸钠按摩尔比1:1混合在pH 6.0的PBS中反应1h;室温将EDC与NHS按摩尔比1:1加入上述体系中反应6h;室温将ahcy蛋白按ahcy蛋白与六糖摩尔比1:1000加入上述体系中过夜反应;4℃在50mmol/L、pH8.0~9.6的碳酸盐溶液中透析5h,再在50mmol/L、pH7.0~8.0的PBS中透析一天。获得的六糖修饰ahcy蛋白的刺激增殖指数、抗体效价、刺激小鼠脾淋巴细胞后产生的IFN‑γ和IL‑2的量都大大提高。
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公开(公告)号:CN105002195B
公开(公告)日:2018-08-10
申请号:CN201510462709.8
申请日:2015-08-01
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪蓝耳病重组疫苗,将猪蓝耳病病毒ORF3基因和ORF5基因串联,构建了融合基因ORF3‑ORF5,插入真菌特异性双T‑DNA安全表达载体pCB130NG中,获得一种表达载体pCB130NG‑ORF3‑ORF5,利用PEG法、农杆菌介导法或电击法转化食药用真菌原生质体,经鉴定为阳性的菌丝体,培养获得T1代子实体,利用PCR筛选出只含目的基因而不含选择标记基因的子实体个体,培养至T2代,获得稳定表达猪蓝耳病病毒基因的转基因食药用真菌。通过转基因真菌菌丝的发酵培养,离心收集菌丝,烘干或冻干后,粉碎制备猪蓝耳病重组疫苗。利用本发明生产的猪蓝耳病疫苗各批次间质量差异小、产量大、成本低,且可以直接通过口服饲喂动物,具有广泛的社会效益和经济效益。
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公开(公告)号:CN116083421A
公开(公告)日:2023-05-09
申请号:CN202310214856.8
申请日:2023-03-08
Applicant: 吉林农业大学
Inventor: 孙喆 , 周昱伽 , 邵宏秋 , 盛潇潇 , 贺承光 , 马红霞 , 孔令聪 , 王一鸣 , 张海鹏 , 武子淳 , 李昊轩 , 刘悦华 , 王雨婷 , 崔琪 , 王秀然 , 卢天成 , 官丽莉 , 周海蒙 , 梁月东
IPC: C12N15/10 , C12Q1/6806
Abstract: 本发明公开了一种点击化学反应捕获细菌新生RNA方法,首先利用利福平对培养中的细菌的转录起始进行抑制,继续培养细菌时转录进行终结后去除利福平;在恢复生长前加入5‑乙炔尿密啶标记新生RNA,再利用点击化学反应将新生RNA与生物素‑PEG2‑C6‑叠氮长臂配体结合;再通过链霉亲和素与生物素的免疫亲和反应将磁珠与新生RNA结合,通过磁珠筛选纯化得到新生RNA。与现有技术相比,本发明利用转录抑制剂利福平将细菌转录同步后,利用点击化学反应将新形成的转录产物通过铜催化叠氮乙炔环化反应(CuAAC)进行提取分离的方法,通过一些基本的分子生物学实验操作即可将新生RNA捕获;为后续实验提供了可靠的测试对象。
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公开(公告)号:CN108101965A
公开(公告)日:2018-06-01
申请号:CN201711369745.5
申请日:2017-12-19
Applicant: 吉林农业大学
IPC: C07K14/00 , C07K1/107 , A61K39/385
Abstract: 一种降低免疫原性的组合物及其制备方法和应用,涉及蛋白质的免疫原性领域,本发明包括:将50mmol/L高碘酸钠与几丁寡糖以摩尔比为1:1的比例进行氧化反应;按EDC和NHS的摩尔比为1:1的比例向上述反应体系中加入EDC和NHS;按候选抗原蛋白与几丁寡糖的摩尔比为1:1000的投料比向上述反应体系中加入候选抗原蛋白,室温过夜反应,将最终反应体系补足至5ml,蛋白质的侧链氨基基团会替代酰胺键形成糖蛋白;加入透析袋,将透析袋置于50mmol/L、PH 9.0的碳酸盐缓冲液中;用PBS,4℃透析过夜,透析结束后收集袋内样品,获得几丁寡糖修饰的候选抗原蛋白。本发明可显著降低蛋候选抗原蛋白的免疫原性。
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公开(公告)号:CN105671016A
公开(公告)日:2016-06-15
申请号:CN201610115975.8
申请日:2016-03-02
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 提高S-腺苷-L-半胱氨酸水解酶免疫原性的方法及六糖修饰ahcy蛋白,涉及蛋白免疫原性领域,其目的是为了给布鲁氏菌提供更好的疫苗候选抗原。该方法为:4℃将六糖与高碘酸钠按摩尔比1:1混合在pH 6.0的PBS中反应1h;室温将EDC与NHS按摩尔比1:1加入上述体系中反应6h;室温将ahcy蛋白按ahcy蛋白与六糖摩尔比1:1000加入上述体系中过夜反应;4℃在50mmol/L、pH8.0~9.6的碳酸盐溶液中透析5h,再在50mmol/L、pH7.0~8.0的PBS中透析一天。获得的六糖修饰ahcy蛋白的刺激增殖指数、抗体效价、刺激小鼠脾淋巴细胞后产生的IFN-γ和IL-2的量都大大提高。
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公开(公告)号:CN105002195A
公开(公告)日:2015-10-28
申请号:CN201510462709.8
申请日:2015-08-01
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪蓝耳病重组疫苗,将猪蓝耳病病毒ORF3基因和ORF5基因串联,构建了融合基因ORF3-ORF5,插入真菌特异性双T-DNA安全表达载体pCB130NG中,获得一种表达载体pCB130NG-ORF3-ORF5,利用PEG法、农杆菌介导法或电击法转化食药用真菌原生质体,经鉴定为阳性的菌丝体,培养获得T1代子实体,利用PCR筛选出只含目的基因而不含选择标记基因的子实体个体,培养至T2代,获得稳定表达猪蓝耳病病毒基因的转基因食药用真菌。通过转基因真菌菌丝的发酵培养,离心收集菌丝,烘干或冻干后,粉碎制备猪蓝耳病重组疫苗。利用本发明生产的猪蓝耳病疫苗各批次间质量差异小、产量大、成本低,且可以直接通过口服饲喂动物,具有广泛的社会效益和经济效益。
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公开(公告)号:CN104988174A
公开(公告)日:2015-10-21
申请号:CN201510462708.3
申请日:2015-08-01
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 本发明公开了高表达植酸酶的食药用真菌菌丝饲料添加剂,通过构建真菌特异性表达植酸酶phyA基因的安全表达载体pCB130NG-phyA,并转入蛹虫草原生质体,再生获得转基因蛹虫草子实体后,以子实体为母种,培养制得转基因蛹虫草菌丝,PDA液体培养基培养,离心收集菌体,烘干粉碎制得高表达植酸酶的食药用真菌菌丝饲料添加剂,可直接添加于饲料中饲喂动物,不仅能增加动物对磷的利用率,能大大提高养殖动物各期平均日增重和料肉比,促进动物生长,增强动物免疫能力,而且具有无耐药性、改善动物产品品质等优点,而且使磷的排泄量降低了32.14-56.14%,从而有利于增加养殖效益,降低对环境的污染,应用前景十分诱人。
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公开(公告)号:CN117443455A
公开(公告)日:2024-01-26
申请号:CN202311799513.9
申请日:2023-12-26
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 本发明提供一种邻苯二酚‑甲醛树脂微球光催化杂化材料及其制备方法和应用,属于光催化抗菌材料技术领域。该材料首先利用水热法制备邻苯二酚甲醛树脂(CFR)微球,再在CFR球表面原位生长金属有机框架(UiO‑66(NH2))得到核壳结构的CFR微球@UiO‑66(NH2)复合材料,然后通过化学共沉淀法将Ag2S纳米粒子原位生长在MOF上,制备出邻苯二酚‑甲醛树脂微球光催化杂化材料。本发明反应条件温和、操作容易、材料结构可控。所述制备的纳米杂化材料在白光照射下产生的ROS对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌等灭菌活性高,其在水体系中的革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的光催化灭活中具有较好的应用前景。
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