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公开(公告)号：CN105671016B
公开(公告)日：2019-07-26
申请号：CN201610115975.8
申请日：2016-03-02
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 提高S‑腺苷‑L‑半胱氨酸水解酶免疫原性的方法及六糖修饰ahcy蛋白，涉及蛋白免疫原性领域，其目的是为了给布鲁氏菌提供更好的疫苗候选抗原。该方法为：4℃将六糖与高碘酸钠按摩尔比1:1混合在pH 6.0的PBS中反应1h；室温将EDC与NHS按摩尔比1:1加入上述体系中反应6h；室温将ahcy蛋白按ahcy蛋白与六糖摩尔比1:1000加入上述体系中过夜反应；4℃在50mmol/L、pH8.0～9.6的碳酸盐溶液中透析5h，再在50mmol/L、pH7.0～8.0的PBS中透析一天。获得的六糖修饰ahcy蛋白的刺激增殖指数、抗体效价、刺激小鼠脾淋巴细胞后产生的IFN‑γ和IL‑2的量都大大提高。
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公开(公告)号：CN105002195B
公开(公告)日：2018-08-10
申请号：CN201510462709.8
申请日：2015-08-01
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪蓝耳病重组疫苗，将猪蓝耳病病毒ORF3基因和ORF5基因串联，构建了融合基因ORF3‑ORF5，插入真菌特异性双T‑DNA安全表达载体pCB130NG中，获得一种表达载体pCB130NG‑ORF3‑ORF5，利用PEG法、农杆菌介导法或电击法转化食药用真菌原生质体，经鉴定为阳性的菌丝体，培养获得T1代子实体，利用PCR筛选出只含目的基因而不含选择标记基因的子实体个体，培养至T2代，获得稳定表达猪蓝耳病病毒基因的转基因食药用真菌。通过转基因真菌菌丝的发酵培养，离心收集菌丝，烘干或冻干后，粉碎制备猪蓝耳病重组疫苗。利用本发明生产的猪蓝耳病疫苗各批次间质量差异小、产量大、成本低，且可以直接通过口服饲喂动物，具有广泛的社会效益和经济效益。
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公开(公告)号：CN104988174B
公开(公告)日：2018-10-16
申请号：CN201510462708.3
申请日：2015-08-01
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 本发明公开了高表达植酸酶的食药用真菌菌丝饲料添加剂，通过构建真菌特异性表达植酸酶phyA基因的安全表达载体pCB130NG‑phyA，并转入蛹虫草原生质体，再生获得转基因蛹虫草子实体后，以子实体为母种，培养制得转基因蛹虫草菌丝，PDA液体培养基培养，离心收集菌体，烘干粉碎制得高表达植酸酶的食药用真菌菌丝饲料添加剂，可直接添加于饲料中饲喂动物，不仅能增加动物对磷的利用率，能大大提高养殖动物各期平均日增重和料肉比，促进动物生长，增强动物免疫能力，而且具有无耐药性、改善动物产品品质等优点，而且使磷的排泄量降低了32.14‑56.14％，从而有利于增加养殖效益，降低对环境的污染，应用前景十分诱人。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105002196A
公开(公告)日：2015-10-28
申请号：CN201510462722.3
申请日：2015-08-01
Applicant: 吉林农业大学
IPC: C12N15/62 , C12N15/80 , C12N1/15 , A61K39/187 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种猪瘟重组疫苗，通过构建猪瘟病毒E2基因和Erns基因串联的真菌特异性双T-DNA安全表达载体；利用PEG法、农杆菌介导法或电击法转化食药用真菌原生质体，所述的食药用真菌为金针菇、平菇和蛹虫草、灵芝；经鉴定为阳性的菌丝体，培养获得T1代子实体，利用PCR筛选出只含目的基因而不含选择标记基因的子实体个体，培养至T2代，获得稳定表达猪瘟病毒基因的转基因食药用真菌。通过转基因真菌菌丝的发酵培养，制备猪瘟重组疫苗。利用本发明生产的猪瘟疫苗各批次间质量差异小、产量大、成本低，具有广泛的社会效益和经济效益。
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公开(公告)号：CN104988170A
公开(公告)日：2015-10-21
申请号：CN201510462737.X
申请日：2015-08-01
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 本发明公开了一种融合抗菌肽及其制备方法和应用，是将天蚕素抗菌肽B（cecropin B,CB）和鲎素抗菌肽tachyplesin I（TP I）串联构建了一种融合抗菌肽CB-TP I，通过优化天蚕素抗菌肽CB基因与鲎素抗菌肽TP I基因，插入真菌特异性双T-DNA安全表达载体中；转染真菌，生产融合抗菌肽的转基因菌丝，提取的融合抗菌肽抗菌能力有显著提高，用量少，不存在耐药性问题。生产的融合抗菌肽菌丝经过低温烘干，可直接制备成饲料添加剂，省略了蛋白质分离纯化过程，各批次间质量差异小、产量大、成本低。可以增加畜禽的抵抗力，减少抗生素的使用，具有广泛的社会效益和经济效益。
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公开(公告)号：CN105671016A
公开(公告)日：2016-06-15
申请号：CN201610115975.8
申请日：2016-03-02
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 提高S-腺苷-L-半胱氨酸水解酶免疫原性的方法及六糖修饰ahcy蛋白，涉及蛋白免疫原性领域，其目的是为了给布鲁氏菌提供更好的疫苗候选抗原。该方法为：4℃将六糖与高碘酸钠按摩尔比1:1混合在pH 6.0的PBS中反应1h；室温将EDC与NHS按摩尔比1:1加入上述体系中反应6h；室温将ahcy蛋白按ahcy蛋白与六糖摩尔比1:1000加入上述体系中过夜反应；4℃在50mmol/L、pH8.0～9.6的碳酸盐溶液中透析5h，再在50mmol/L、pH7.0～8.0的PBS中透析一天。获得的六糖修饰ahcy蛋白的刺激增殖指数、抗体效价、刺激小鼠脾淋巴细胞后产生的IFN-γ和IL-2的量都大大提高。
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公开(公告)号：CN105002195A
公开(公告)日：2015-10-28
申请号：CN201510462709.8
申请日：2015-08-01
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪蓝耳病重组疫苗，将猪蓝耳病病毒ORF3基因和ORF5基因串联，构建了融合基因ORF3-ORF5，插入真菌特异性双T-DNA安全表达载体pCB130NG中，获得一种表达载体pCB130NG-ORF3-ORF5，利用PEG法、农杆菌介导法或电击法转化食药用真菌原生质体，经鉴定为阳性的菌丝体，培养获得T1代子实体，利用PCR筛选出只含目的基因而不含选择标记基因的子实体个体，培养至T2代，获得稳定表达猪蓝耳病病毒基因的转基因食药用真菌。通过转基因真菌菌丝的发酵培养，离心收集菌丝，烘干或冻干后，粉碎制备猪蓝耳病重组疫苗。利用本发明生产的猪蓝耳病疫苗各批次间质量差异小、产量大、成本低，且可以直接通过口服饲喂动物，具有广泛的社会效益和经济效益。
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公开(公告)号：CN104988174A
公开(公告)日：2015-10-21
申请号：CN201510462708.3
申请日：2015-08-01
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 本发明公开了高表达植酸酶的食药用真菌菌丝饲料添加剂，通过构建真菌特异性表达植酸酶phyA基因的安全表达载体pCB130NG-phyA，并转入蛹虫草原生质体，再生获得转基因蛹虫草子实体后，以子实体为母种，培养制得转基因蛹虫草菌丝，PDA液体培养基培养，离心收集菌体，烘干粉碎制得高表达植酸酶的食药用真菌菌丝饲料添加剂，可直接添加于饲料中饲喂动物，不仅能增加动物对磷的利用率，能大大提高养殖动物各期平均日增重和料肉比，促进动物生长，增强动物免疫能力，而且具有无耐药性、改善动物产品品质等优点，而且使磷的排泄量降低了32.14-56.14％，从而有利于增加养殖效益，降低对环境的污染，应用前景十分诱人。
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