公开(公告)号：CN116083421A

公开(公告)日：2023-05-09

申请号：CN202310214856.8

申请日：2023-03-08

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 孙喆 ,  周昱伽 ,  邵宏秋 ,  盛潇潇 ,  贺承光 ,  马红霞 ,  孔令聪 ,  王一鸣 ,  张海鹏 ,  武子淳 ,  李昊轩 ,  刘悦华 ,  王雨婷 ,  崔琪 ,  王秀然 ,  卢天成 ,  官丽莉 ,  周海蒙 ,  梁月东

IPC: C12N15/10 ,  C12Q1/6806

Abstract: 本发明公开了一种点击化学反应捕获细菌新生RNA方法，首先利用利福平对培养中的细菌的转录起始进行抑制，继续培养细菌时转录进行终结后去除利福平；在恢复生长前加入5‑乙炔尿密啶标记新生RNA，再利用点击化学反应将新生RNA与生物素‑PEG2‑C6‑叠氮长臂配体结合；再通过链霉亲和素与生物素的免疫亲和反应将磁珠与新生RNA结合，通过磁珠筛选纯化得到新生RNA。与现有技术相比，本发明利用转录抑制剂利福平将细菌转录同步后，利用点击化学反应将新形成的转录产物通过铜催化叠氮乙炔环化反应(CuAAC)进行提取分离的方法，通过一些基本的分子生物学实验操作即可将新生RNA捕获；为后续实验提供了可靠的测试对象。

公开(公告)号：CN114150043A

公开(公告)日：2022-03-08

申请号：CN202111407577.0

申请日：2021-11-24

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 贺承光 ,  周海蒙 ,  陈伟东 ,  王鑫 ,  闫雨欣 ,  孔令聪 ,  马红霞 ,  刘悦华 ,  李昊轩 ,  孙喆

IPC: C12Q1/6818 ,  C12Q1/686 ,  C12Q1/689

Abstract: 本发明公开了一种细菌转录抑制剂抑制大肠杆菌体外转录活性的检测方法，包括：制备大肠杆菌体外转录pKK450‑DNA模板；以pKK3535质粒为模板，制备荧光分子信标M.B.；制备大肠杆菌体外转录体系，检测大肠杆菌转录抑制剂对体外转录抑制活性。与现有技术相比，本发明可以精确的检测细菌转录抑制剂的活性；另外，由于本发明中采用荧光酶标仪以及96孔板此类高效、快速的检测仪器，因此，可以高通量的检测大量待测样品，对转录抑制类药物的筛选有着重要的应用价值。在此方法基础上可以对抑菌物质的作用机制进行分析，以确定其对细菌转录的影响。