公开(公告)号：CN102816711A

公开(公告)日：2012-12-12

申请号：CN201210045286.6

申请日：2012-02-27

Applicant: 南昌大学

Inventor： 万翠香 ,  魏华 ,  夏慧玲 ,  章昭琳 ,  熊勇华 ,  许恒毅 ,  徐锋 ,  赖卫华 ,  王报贵

IPC: C12N1/20 ,  C12N15/74 ,  C12N1/21

Abstract: 本发明属于微生物领域，提供了一种双歧杆菌原生质体的制备与转化方法，将长双杆菌接种到MRS琼脂培养基厌氧培养，转种于MRS液体培养基中培养后以2.5-3.5%的接种量转接于新鲜MRS液体培养基中，36-38℃，厌氧培养18-20h；收集菌体，重悬；加变溶菌素至终浓度为4.5-5.5mg/L，36-38℃酶解25-35分钟；重悬于SMM溶液中，得到双歧杆菌原生质体。该方法制备的原生质体生成率达到81％，其再生率达到48％，可以应用于双歧杆菌的转化，引入外源基因，构建双歧杆菌的工程菌株。

公开(公告)号：CN102816711B

公开(公告)日：2014-07-16

申请号：CN201210045286.6

申请日：2012-02-27

Applicant: 南昌大学

Inventor： 万翠香 ,  魏华 ,  夏慧玲 ,  章昭琳 ,  熊勇华 ,  许恒毅 ,  徐锋 ,  赖卫华 ,  王报贵

IPC: C12N1/20 ,  C12N15/74 ,  C12N1/21

Abstract: 本发明属于微生物领域，提供了一种双歧杆菌原生质体的制备与转化方法，将长双杆菌接种到MRS琼脂培养基厌氧培养，转种于MRS液体培养基中培养后以2.5-3.5%的接种量转接于新鲜MRS液体培养基中，36-38℃，厌氧培养18-20h；收集菌体，重悬；加变溶菌素至终浓度为4.5-5.5mg/L，36-38℃酶解25-35分钟；重悬于SMM溶液中，得到双歧杆菌原生质体。该方法制备的原生质体生成率达到81％，其再生率达到48％，可以应用于双歧杆菌的转化，引入外源基因，构建双歧杆菌的工程菌株。