一种克雷伯菌毒素Tilimycin的化学合成方法

    公开(公告)号:CN117800972A

    公开(公告)日:2024-04-02

    申请号:CN202311525022.5

    申请日:2023-11-16

    Abstract: 一种克雷伯菌毒素Tilimycin的化学合成方法,涉及生物医药化学分析合成技术领域。包括以下步骤:(1)将溶于极性非质子溶剂的双(三氯甲基)碳酸酯与3‑羟基邻氨基苯甲酸按比例混合发生取代反应,加热搅拌,得到中间产物1;(2)将得到的中间产物1,与溶于极性非质子溶剂的(S)‑2‑吡咯烷醇按比例混合发生氨解和水解反应,加热搅拌,过滤后用prep‑HPLC纯化得到中间产物2;(3)将得到的中间产物2,在碱性条件下,与溶于极性非质子溶剂和DCM的吡啶三氧化硫按比例混合发生氧化反应和胺烃化反应,低温搅拌,真空干燥后用prep‑HPLC纯化得到目标化合物Tilimycin。本发明能够高效合成纯度高、稳定性好的克雷伯菌毒素Tilimycin,从而为该毒素相关的科学研究提供物质基础和技术方法。

    一种靶向甲型流感病毒核蛋白纳米抗体的制备方法和应用

    公开(公告)号:CN117924470A

    公开(公告)日:2024-04-26

    申请号:CN202311715701.9

    申请日:2023-12-14

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种靶向甲型流感病毒核蛋白纳米抗体的制备方法和应用,属于生物技术领域。本发明通过纳米抗体噬菌体文库构建、噬菌体筛选技术,获取1种抗甲型流感病毒核蛋白纳米抗体。所述抗甲型流感病毒核蛋白纳米抗体为VHH抗体,具有SEQ ID NO:1‑SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。本发明公开的纳米抗体与甲型流感病毒核蛋白特异性结合,可应用于甲型流感病毒检测分析,对甲型流感病毒的流行或爆发的预警以及环境或人体中甲型流感病毒的检测等领域具有广阔的应用前景。

    一种粪便中细菌毒素检测的样品前处理方法

    公开(公告)号:CN116879468A

    公开(公告)日:2023-10-13

    申请号:CN202310891092.6

    申请日:2023-07-20

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明提供了一种粪便中细菌毒素检测的样品前处理方法,涉及医药分析检测技术领域。包括以下步骤:(1)用提取溶剂对待测粪便样品中进行多次超声混合提取,得到混合溶液1;(2)将得到的混合溶液1,低温离心,得到提取液2;(3)将所述提取液2经过旋转蒸发浓缩后,得到浓缩液3;(4)将浓缩液3加入到硅胶柱纯化,得到待测样品;(5)将待测样品氮吹近干后重新加入有机溶剂溶解过滤,用于后续进行毒素定性定量检测。通过本申请的前处理方法处理样品,随后进行毒素检测,能够高效去除杂质、提升提取效率减少基质效应的影响,从而提高检测精度。

    一种基于纳米抗体-单抗夹心检测新型冠状病毒受体结合区蛋白的均相方法

    公开(公告)号:CN116125069A

    公开(公告)日:2023-05-16

    申请号:CN202211029395.9

    申请日:2022-08-25

    Abstract: 本发明公开了一种基于纳米抗体‑单抗夹心检测新型冠状病毒受体结合区蛋白的均相方法,涉及抗原检测领域。构建了新型冠状病毒RBD蛋白、纳米抗体的表达载体进行蛋白表达,ELISA法鉴定纳米抗体与单克隆抗体的配对性能,将纳米抗体与单克隆抗体分别偶联至荧光微球和磁性纳米微球的表面,使用PBS缓冲液将新型冠状病毒RBD蛋白稀释为不同浓度,投入靶向RBD蛋白的荧光及磁性纳米探针,磁力架分离并测定其荧光值,建立检测新型冠状病毒RBD蛋白的标准曲线,最低检测线为0.09ng/mL。本发明构建的免疫荧光均相法操作简单、检测速度快、步骤少、成本低廉、适用于多种场景检测,为新型冠状病毒快速检测试剂盒的开发奠定了基础。

    一种多抗夹心模式的免疫层析试纸条及其用途

    公开(公告)号:CN115792214A

    公开(公告)日:2023-03-14

    申请号:CN202211354749.7

    申请日:2022-11-01

    Abstract: 一种多抗夹心模式的免疫层析试纸条及其用途,属于免疫层析检测领域。该试纸条包含样品垫、结合垫、吸水垫、硝酸纤维素(NC)膜、PVC底板、检测线(T线)、质控线(C线);原核表达制备多价单域重链抗体3×A、3×B、3×C,并分别偶联至荧光染料(能量供体)、荧光微球表面(能量受体)的表面;将单域重链抗体3×A标记荧光染料划线于检测线(T)线,抗His标签单克隆抗体划线于NC膜作为质控线(C)线,单域重链抗体3×B、单链重域抗体3×C标记偶联荧光微球分别滴加于结合垫。该免疫层析试纸条可快速检测唾液、鼻涕的新型冠状病毒核衣壳蛋白,与现有技术相比,有着更高的灵敏度、更好的检测精确性及稳定性、更低的检测成本。

    一种靶向金黄色葡萄球菌的纳米抗体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN119798426B

    公开(公告)日:2025-05-23

    申请号:CN202510287680.8

    申请日:2025-03-12

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种靶向金黄色葡萄球菌纳米抗体及其制备方法和应用。本发明通过纳米抗体噬菌体文库构建、噬菌体筛选技术获取了一对配对效果较好的金黄色葡萄球菌纳米抗体对,构建了一种基于夹心法ELISA能用于食品中实际活体细菌检测的检测试剂盒。本发明公开的纳米抗体在与金黄色葡萄球菌结合时表现出高亲和力和高特异性,且较于单克隆抗体具有良好的稳定性和成本低廉等优势,可大规模生产,在金黄色葡萄球菌检测分析领域具有广阔的应用前景。本发明公开的检测试剂盒能实现4.27^104cfu/ml的检测限。

    一种特异性识别金黄色葡萄球菌的纳米抗体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN119798427A

    公开(公告)日:2025-04-11

    申请号:CN202510287682.7

    申请日:2025-03-12

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种特异性识别金黄色葡萄球菌的纳米抗体及其制备方法和应用。本发明采用核糖体展示技术,通过构建纳米抗体展示库、三轮高通量筛选、ELISA验证筛选出一对配对效果良好的纳米抗体对并结合免疫层析技术用于实际病原菌的活体检测。本发明公开的纳米抗体在与金黄色葡萄球菌结合时表现出高亲和力和高特异性,能实现的检测限,且较于单克隆抗体具有良好的稳定性和成本低廉等优势,可大规模生产,在金黄色葡萄球菌检测分析领域具有广阔的应用前景。

    一种新型纳米抗体电化学免疫传感器及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN118937446A

    公开(公告)日:2024-11-12

    申请号:CN202411096763.0

    申请日:2024-08-12

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种新型纳米抗体电化学免疫传感器及其制备方法与应用,所述传感器包括用于识别目标蛋白的生物识别元件、以及用于负载所述生物识别元件并将所述生物识别元件与所述目标蛋白之间的相互作用转换成电信号的基底电极;生物识别元件为纳米抗体;基底电极为经羧基碳纳米管修饰的玻碳电极;所述纳米抗体通过将含有所述目标蛋白的病毒的基因与原核表达载体进行重组,得到重组载体、再将所述重组载体进行原核表达得到。本发明的传感器具有亲和力好、特异性强、稳定性好且具有较低的检测限、定量限和较高的灵敏度。

    一种基于纳米抗体-单抗夹心检测新型冠状病毒核衣壳蛋白的均相方法

    公开(公告)号:CN116577501A

    公开(公告)日:2023-08-11

    申请号:CN202211023374.6

    申请日:2022-08-25

    Abstract: 一种基于纳米抗体‑单抗夹心检测新型冠状病毒核衣壳蛋白的均相方法,涉及抗原检测领域,本发明制备了多种新型冠状病毒核衣壳蛋白纳米抗体做为固相抗体,核衣壳蛋白单克隆抗体作为检测抗体,新型冠状病毒N蛋白作为检测靶标,通过酶联免疫吸附实验筛选出一组检测性能优良的抗体对,最低检测线为0.8ng/mL。此外,一步活化法将纳米抗体、单克隆抗体分别偶联到量子点微球及磁性纳米微球的表面,成功制备两种靶向新型冠状病毒核衣壳蛋白的探针,并构建了一种快速检测新型冠状病毒核衣壳蛋白的磁分离免疫均相方法,核衣壳蛋白的最低检测线为0.15ng/mL。本发明操作简单、成本低廉、反应速度快、可实现原位检测、配对抗体筛选效率高,在新型冠状病毒的快速检测中具有良好的应用前景。

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