公开(公告)号：CN118948897A

公开(公告)日：2024-11-15

申请号：CN202411054934.3

申请日：2024-08-02

Applicant: 南京大学 ,  南京大学深圳研究院

Inventor： 沈萍萍 ,  杨南飞 ,  黄亚红

IPC: A61K35/28 ,  A61K38/18 ,  A61P37/02 ,  A61P1/16 ,  C12N5/0775

Abstract: 本发明涉及干细胞技术领域，具体涉及一种间充质干细胞制剂及其制备方法和应用。本发明所述的间充质干细胞制剂由人脐带间充质干细胞和人源成纤维细胞生长因子FGF23混合得到。在自体免疫性肝炎小鼠模型中静脉注射所述间充质干细胞制剂后，可显著改善自体免疫肝炎小鼠的肝脏炎症状态及损伤，促进肝脏修复，主要表现为：血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和炎性细胞因子的含量显著降低，促炎症消退的抗炎因子(IL‑10)的含量显著上升，细胞毒性T细胞(CTL，CD8+CD3+)的含量显著减少以及调节性T细胞(Treg，CD4+CD25+)的含量显著上升。

公开(公告)号：CN118749491A

公开(公告)日：2024-10-11

申请号：CN202411054931.X

申请日：2024-08-02

Applicant: 南京大学 ,  南京大学深圳研究院

Inventor： 沈萍萍 ,  田强 ,  黄亚红 ,  韩东

IPC: A01K67/02

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种自身免疫性肝炎动物模型的构建方法。所述构建方法包括如下步骤：先向小鼠体内注射CCl4溶液；接着向小鼠体内注射Ad5‑CYP2D6腺病毒，获得自身免疫性肝炎动物模型。本发明所述的构建方法稳定可靠，在构建的动物模型中成功观察到了明显增加的自身抗体汇管区淋巴细胞浸润，淋巴细胞穿入，B细胞在外周血、肝脏和脾脏出现大量克隆等现象，实现了CYP2D6在肝脏的高效率转染。本发明构建了一种合适、稳定、可重复的自身免疫性肝炎动物模型，能够为自身免疫性肝炎的致病机制、药物干预等研究提供一个可靠研究工具。

公开(公告)号：CN119265116A

公开(公告)日：2025-01-07

申请号：CN202310813738.9

申请日：2023-07-04

Applicant: 南京大学

Inventor： 沈萍萍 ,  田强 ,  黄亚红

IPC: C12N5/0775 ,  A61K35/28 ,  A61P1/16 ,  A61P37/02

Abstract: 本发明公开了一种靶向调控肝脏巨噬细胞的工程化外泌体制备方法及其应用。本发明构建了能装载维生素D3的人脐带来源间充质干细胞外泌体，利用巨噬细胞的吞噬作用，激活巨噬细胞的AhR受体，进而调控巨噬细胞的表型和功能。该工程化外泌体能重编程M1型巨噬细胞为M2型巨噬细胞，降低TNF‑α、INF‑γ、IL‑1β和IL‑6炎性细胞因子，并且能促进IL‑22释放。IL‑22能够改善肝细胞的凋亡和促进其增殖。体内实验表明，工程化外泌体能够明显改善自身免疫性肝炎症状，对全身器官无损伤，可克服传统糖皮质激素类和免疫抑制类药物的带来的副作用，具有广阔的应用前景和临床价值。

公开(公告)号：CN116731967A

公开(公告)日：2023-09-12

申请号：CN202311033278.4

申请日：2023-08-16

Applicant: 南京大学 ,  南京元迈细胞生物科技有限公司

Inventor： 沈萍萍 ,  陈一军 ,  章文龙 ,  王锐

IPC: C12N5/0786

Abstract: 本发明公开了一种从多能干细胞通过诱导分化制备巨噬细胞的方法、试剂盒及其应用，所述方法包括：首先使多能干细胞分化为拟胚体，然后使所述拟胚体与一种或多种选自以下的细胞因子接触，从而得到所述巨噬细胞：胎肝激酶配体(Flt3L)、粒细胞‑巨噬细胞集落刺激因子（GM‑CSF）、巨噬细胞集落刺激因子(M‑CSF)、血管内皮生长因子(VEGF)、干细胞因子(SCF)、胰岛素样生长因子1（IGF‑1）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和白介素3(IL‑3)。本发明方法耗时短、分化效率高、产品纯度高、可重复性强、有利于大规模自动化生产。

公开(公告)号：CN111057719B

公开(公告)日：2022-11-11

申请号：CN201811233196.3

申请日：2018-10-17

Applicant: 南京大学

Inventor： 沈萍萍 ,  章文龙 ,  唐嘉荩 ,  黄亚红

IPC: C12N15/867

Abstract: 本发明为一种高效的小鼠骨髓来源巨噬细胞的转染方法及其应用，其包括以下步骤：1)首先将293T细胞传代至60mm*15mm皿中，培养过夜，使其密度达到80％，按照目的质粒/psPAX2/pMD2.G的顺序以6/3/1的比例进行慢病毒的包装，以获得高滴度慢病毒，滴度为2～3×107TU/mL(总体积5mL)；2)取小鼠骨髓，加入鼠源M‑CSF(10ng/mL)进行巨噬细胞诱导，在诱导的第二天加入慢病毒，可以获得高转染效率。本发明在巨噬细胞诱导过程中加入慢病毒，不但能够提高了慢病毒的转染效率，同时还能在不影响巨噬细胞得率的情况下，缩短实验时间。

公开(公告)号：CN113750220A

公开(公告)日：2021-12-07

申请号：CN202010492150.4

申请日：2020-06-02

Applicant: 南京大学

Inventor： 沈萍萍 ,  左诗曼 ,  孙璐琛 ,  杨南飞 ,  郑薇

IPC: A61K38/19 ,  A61K35/28 ,  A61P35/02 ,  C12N5/0775 ,  A61K31/4152

Abstract: 本发明属于医药生物技术领域，具体涉及一种脐带来源间充质干细胞联合TPO及其类似物在制备治疗慢性髓性白血病中的应用。本发明提供的间充质干细胞为人来源的脐带间充质干细胞(UC‑MSCs)，在联合TPO类似物Eltrombopag后可高效诱导慢性髓性白血病细胞分化，该种能力是通过MSCs分泌TPO并诱导白血病细胞表达TPO受体(MPL)来实现的；相较于化疗，间充质干细胞移植的毒副作用更低，且具有低免疫原性，满足临床需求，且Eltrombopag为临床批准药物。该种方法为髓性白血病的干细胞移植治疗提供了新的思路，可应用于髓性白血病的分化治疗。

公开(公告)号：CN111454896A

公开(公告)日：2020-07-28

申请号：CN202010282961.1

申请日：2020-04-10

Applicant: 南京大学

Inventor： 沈萍萍 ,  孙璐琛 ,  杨南飞 ,  郑薇

IPC: C12N5/0775

Abstract: 本发明属于医药生物技术领域，具体涉及一种提高间充质干细胞促进急性髓系白血病细胞分化能力的诱导方法的应用。本发明提供的间充质干细胞为人来源的脐带间充质干细胞(UC-MSCs)，在经过细胞因子骨形成蛋白6(BMP6)预处理活化后得到的间充质干细胞(pre-active MSCs)；所述pre-active MSCs可高效诱导急性髓系白血病细胞分化，该种能力是通过改变UC-MSCs的IL-6和IDO的表达量来实现的；所述间充质干细胞为异体间充质干细胞，在经过BMP6处理活化后能够使其分泌能力显著改变，抗AML能力显著增强。相较于化疗，间充质干细胞移植的毒副作用更低，且具备低免疫原性，满足临床需求。该种方法采用BMP6预处理活化MSCs的方法提高了MSCs诱导急性髓系白血病细胞分化的能力，可应用于急性髓系白血病的分化治疗。

公开(公告)号：CN105779386B

公开(公告)日：2019-09-20

申请号：CN201610208206.2

申请日：2016-04-06

Applicant: 南京大学

Inventor： 沈萍萍 ,  姚永芳 ,  陈兵 ,  黄亚红

IPC: C12N5/0775 ,  A61K35/51 ,  A61K9/08 ,  A61P35/02

Abstract: 本发明属于医药生物技术领域，具体涉及一种间充质干细胞在制备治疗M5型白血病药物中的应用。本发明提供的间充质干细胞是特定的炎性因子TNF‑α和IFN‑γ刺激后得到的间充质干细胞；所述间充质干细胞诱导肿瘤细胞凋亡的能力是通过肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL来实现的；所述间充质干细胞为离体间充质干细胞。TNF‑α和IFN‑γ的刺激使间充质干细胞表达TRAIL的能力显著提高，抗肿瘤能力显著增强，相较化疗，间充质干细胞移植的毒副作用更低，且其低的免疫原性也大大降低移植物抗宿主病的发病率，满足临床需求，为干细胞移植治疗提供了新的思路。可在制备治疗M5型白血病药物中应用。

公开(公告)号：CN101717349A

公开(公告)日：2010-06-02

申请号：CN200910032017.4

申请日：2009-07-07

Applicant: 南京大学

Inventor： 沈萍萍 ,  徐加发 ,  成义祥 ,  黄小波

IPC: C07C245/10 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K14/795 ,  C07K1/107 ,  C07K1/34 ,  C07K16/44

Abstract: 本发明属于免疫学检测技术领域，具体涉及苏丹红I号的中间修饰物及其制备方法和应用。该方法根据威廉姆森合成法成醚的基本原理，在碱性条件下，将苏丹红I号中酚羟基变为酚钾盐，然后与含有溴的溴酸乙酯反应成酯，用碱水解酯键，再酸化得含有羧基的中间修饰物。将此中间修饰物以碳二亚胺为偶联剂与载体蛋白偶联从而得到苏丹红I号的人工抗原。整个方法简单易行，操作简便，人工抗原得率和纯度高。

公开(公告)号：CN118652355B

公开(公告)日：2025-04-22

申请号：CN202411143417.3

申请日：2024-08-20

Applicant: 南京大学 ,  南京元迈细胞生物科技有限公司

Inventor： 沈萍萍 ,  陈一军 ,  孙璐琛 ,  章文龙

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N5/10 ,  C12N15/861 ,  A61K39/00 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明公开了一种嵌合抗原受体（CAR），该CAR包括胞外结构域、跨膜结构域和胞内结构域，其中，所述胞外结构域包括靶向前列腺特异性膜抗原（PSMA）的单链可变片段（scFv）。通过在嵌合抗原受体上整合靶向PSMA的scFv，经过遗传改造的包含该CAR的巨噬细胞具有靶向PSMA及前列腺癌细胞的效果，进而促进巨噬细胞对于前列腺癌细胞的吞噬和杀伤效果。