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公开(公告)号：CN116731967A
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202311033278.4
申请日：2023-08-16
Applicant: 南京大学 , 南京元迈细胞生物科技有限公司
IPC: C12N5/0786
Abstract: 本发明公开了一种从多能干细胞通过诱导分化制备巨噬细胞的方法、试剂盒及其应用，所述方法包括：首先使多能干细胞分化为拟胚体，然后使所述拟胚体与一种或多种选自以下的细胞因子接触，从而得到所述巨噬细胞：胎肝激酶配体(Flt3L)、粒细胞‑巨噬细胞集落刺激因子（GM‑CSF）、巨噬细胞集落刺激因子(M‑CSF)、血管内皮生长因子(VEGF)、干细胞因子(SCF)、胰岛素样生长因子1（IGF‑1）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和白介素3(IL‑3)。本发明方法耗时短、分化效率高、产品纯度高、可重复性强、有利于大规模自动化生产。
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公开(公告)号：CN111057719B
公开(公告)日：2022-11-11
申请号：CN201811233196.3
申请日：2018-10-17
Applicant: 南京大学
IPC: C12N15/867
Abstract: 本发明为一种高效的小鼠骨髓来源巨噬细胞的转染方法及其应用，其包括以下步骤：1)首先将293T细胞传代至60mm*15mm皿中，培养过夜，使其密度达到80％，按照目的质粒/psPAX2/pMD2.G的顺序以6/3/1的比例进行慢病毒的包装，以获得高滴度慢病毒，滴度为2～3×107TU/mL(总体积5mL)；2)取小鼠骨髓，加入鼠源M‑CSF(10ng/mL)进行巨噬细胞诱导，在诱导的第二天加入慢病毒，可以获得高转染效率。本发明在巨噬细胞诱导过程中加入慢病毒，不但能够提高了慢病毒的转染效率，同时还能在不影响巨噬细胞得率的情况下，缩短实验时间。
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公开(公告)号：CN113106067B
公开(公告)日：2024-06-21
申请号：CN202010029500.3
申请日：2020-01-10
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明涉及一种嵌合抗原受体‑单核/巨噬细胞(CAR‑M)的构建及其应用。运用基因编辑手段设计、优化适于导入单核/巨噬细胞细胞膜组构的基因工程受体分子作为嵌合抗原受体，包括前导肽，识别区，铰链区和跨膜/胞内信号区，具体地，所述嵌合抗原受体包括如SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.18所示的序列。本发明还涉及上述嵌合抗原受体‑单核/巨噬细胞(CAR‑M)的应用，本发明采用单核/巨噬细胞作为细胞免疫治疗的载体细胞，是利用其良好的组织浸润性与细胞因子趋化性，可以解决CAR‑T无法进入实体瘤内部的问题。本发明利用嵌合抗原受体赋予单核/巨噬细胞对肿瘤细胞的靶向性，并增强对肿瘤细胞的吞噬，进一步可以递呈肿瘤抗原给T细胞，增强抗肿瘤免疫。本发明所构建的嵌合抗原受体‑单核/巨噬细胞(CAR‑M)可用于肝癌、胃癌、肺癌、乳腺癌等实体瘤的细胞免疫治疗。
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公开(公告)号：CN113106067A
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN202010029500.3
申请日：2020-01-10
Applicant: 南京大学
Abstract: 本发明涉及一种嵌合抗原受体‑单核/巨噬细胞(CAR‑M)的构建及其应用。运用基因编辑手段设计、优化适于导入单核/巨噬细胞细胞膜组构的基因工程受体分子作为嵌合抗原受体，包括前导肽，识别区，铰链区和跨膜/胞内信号区，具体地，所述嵌合抗原受体包括如SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.18所示的序列。本发明还涉及上述嵌合抗原受体‑单核/巨噬细胞(CAR‑M)的应用，本发明采用单核/巨噬细胞作为细胞免疫治疗的载体细胞，是利用其良好的组织浸润性与细胞因子趋化性，可以解决CAR‑T无法进入实体瘤内部的问题。本发明利用嵌合抗原受体赋予单核/巨噬细胞对肿瘤细胞的靶向性，并增强对肿瘤细胞的吞噬，进一步可以递呈肿瘤抗原给T细胞，增强抗肿瘤免疫。本发明所构建的嵌合抗原受体‑单核/巨噬细胞(CAR‑M)可用于肝癌、胃癌、肺癌、乳腺癌等实体瘤的细胞免疫治疗。
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公开(公告)号：CN111057719A
公开(公告)日：2020-04-24
申请号：CN201811233196.3
申请日：2018-10-17
Applicant: 南京大学
IPC: C12N15/867
Abstract: 本发明为一种高效的小鼠骨髓来源巨噬细胞的转染方法及其应用，其包括以下步骤：1)首先将293T细胞传代至60mm*15mm皿中，培养过夜，使其密度达到80％，按照目的质粒/psPAX2/pMD2.G的顺序以6/3/1的比例进行慢病毒的包装，以获得高滴度慢病毒，滴度为2～3×107TU/mL(总体积5mL)；2)取小鼠骨髓，加入鼠源M-CSF(10ng/mL)进行巨噬细胞诱导，在诱导的第二天加入慢病毒，可以获得高转染效率。本发明在巨噬细胞诱导过程中加入慢病毒，不但能够提高了慢病毒的转染效率，同时还能在不影响巨噬细胞得率的情况下，缩短实验时间。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118652355B
公开(公告)日：2025-04-22
申请号：CN202411143417.3
申请日：2024-08-20
Applicant: 南京大学 , 南京元迈细胞生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种嵌合抗原受体（CAR），该CAR包括胞外结构域、跨膜结构域和胞内结构域，其中，所述胞外结构域包括靶向前列腺特异性膜抗原（PSMA）的单链可变片段（scFv）。通过在嵌合抗原受体上整合靶向PSMA的scFv，经过遗传改造的包含该CAR的巨噬细胞具有靶向PSMA及前列腺癌细胞的效果，进而促进巨噬细胞对于前列腺癌细胞的吞噬和杀伤效果。
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公开(公告)号：CN113116878A
公开(公告)日：2021-07-16
申请号：CN202010029581.7
申请日：2020-01-10
Applicant: 南京大学
IPC: A61K31/202 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了一种脂质衍生物15S‑HEPE作为T细胞介导的抗肿瘤免疫激活剂，用于治疗黑色素瘤的新用途。本发明发现，15S‑HEPE通过提高黑色素肿瘤中T细胞的浸润和活化水平，有效抑制黑色素肿瘤的生长。本发明所涉及的15S‑HEPE抗肿瘤活性可被用于制备抗黑色素肿瘤免疫治疗药物。
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公开(公告)号：CN118652355A
公开(公告)日：2024-09-17
申请号：CN202411143417.3
申请日：2024-08-20
Applicant: 南京大学 , 南京元迈细胞生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种嵌合抗原受体（CAR），该CAR包括胞外结构域、跨膜结构域和胞内结构域，其中，所述胞外结构域包括靶向前列腺特异性膜抗原（PSMA）的单链可变片段（scFv）。通过在嵌合抗原受体上整合靶向PSMA的scFv，经过遗传改造的包含该CAR的巨噬细胞具有靶向PSMA及前列腺癌细胞的效果，进而促进巨噬细胞对于前列腺癌细胞的吞噬和杀伤效果。
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公开(公告)号：CN116731967B
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202311033278.4
申请日：2023-08-16
Applicant: 南京大学 , 南京元迈细胞生物科技有限公司
IPC: C12N5/0786
Abstract: 本发明公开了一种从多能干细胞通过诱导分化制备巨噬细胞的方法、试剂盒及其应用，所述方法包括：首先使多能干细胞分化为拟胚体，然后使所述拟胚体与一种或多种选自以下的细胞因子接触，从而得到所述巨噬细胞：胎肝激酶配体(Flt3L)、粒细胞‑巨噬细胞集落刺激因子（GM‑CSF）、巨噬细胞集落刺激因子(M‑CSF)、血管内皮生长因子(VEGF)、干细胞因子(SCF)、胰岛素样生长因子1（IGF‑1）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和白介素3(IL‑3)。本发明方法耗时短、分化效率高、产品纯度高、可重复性强、有利于大规模自动化生产。
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公开(公告)号：CN114632062A
公开(公告)日：2022-06-17
申请号：CN202210274891.4
申请日：2022-03-21
Applicant: 南京大学
IPC: A61K9/127 , A61K31/7088 , A61K47/24 , A61K47/28 , A61K47/42
Abstract: 本发明公开了一种用于递送核酸药物的中性脂质体及其制备方法和应用。一种用于递送核酸药物的中性脂质体，所述的中性脂质体主要由卵磷脂、胆固醇、核酸药物以及阳离子肽组成；其中带负电的核酸药物与阳离子肽混合成电中性。本专利通过成分组成的中性脂质体，并发现中性脂质体可以特异性靶向单核/巨噬细胞，并利用体内体外实验证实了这一点特性，充分提高中性脂质体对提高单核/巨噬细胞的转染效率，实现体内改造单核/巨噬细胞并影响相关功能。
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