一种间充质干细胞制剂及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN118948897A

    公开(公告)日:2024-11-15

    申请号:CN202411054934.3

    申请日:2024-08-02

    Abstract: 本发明涉及干细胞技术领域,具体涉及一种间充质干细胞制剂及其制备方法和应用。本发明所述的间充质干细胞制剂由人脐带间充质干细胞和人源成纤维细胞生长因子FGF23混合得到。在自体免疫性肝炎小鼠模型中静脉注射所述间充质干细胞制剂后,可显著改善自体免疫肝炎小鼠的肝脏炎症状态及损伤,促进肝脏修复,主要表现为:血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和炎性细胞因子的含量显著降低,促炎症消退的抗炎因子(IL‑10)的含量显著上升,细胞毒性T细胞(CTL,CD8+CD3+)的含量显著减少以及调节性T细胞(Treg,CD4+CD25+)的含量显著上升。

    一种自身免疫性肝炎动物模型的构建方法

    公开(公告)号:CN118749491A

    公开(公告)日:2024-10-11

    申请号:CN202411054931.X

    申请日:2024-08-02

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种自身免疫性肝炎动物模型的构建方法。所述构建方法包括如下步骤:先向小鼠体内注射CCl4溶液;接着向小鼠体内注射Ad5‑CYP2D6腺病毒,获得自身免疫性肝炎动物模型。本发明所述的构建方法稳定可靠,在构建的动物模型中成功观察到了明显增加的自身抗体汇管区淋巴细胞浸润,淋巴细胞穿入,B细胞在外周血、肝脏和脾脏出现大量克隆等现象,实现了CYP2D6在肝脏的高效率转染。本发明构建了一种合适、稳定、可重复的自身免疫性肝炎动物模型,能够为自身免疫性肝炎的致病机制、药物干预等研究提供一个可靠研究工具。

    一种用巢式PCR鉴定肝素猪、牛、羊来源的方法

    公开(公告)号:CN101363058A

    公开(公告)日:2009-02-11

    申请号:CN200810123709.5

    申请日:2008-05-30

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种可以鉴定肝素粗成品成分来源的检测方法。引物及其反应体系。特征是根据Genbank公布的猪、牛、羊线粒体DNA序列,经同源性比对后,利用Primer 5.0与Oligo 6软件辅助设计得到引物,并建立了具体的稳定的巢式聚合酶链式反应(PCR)体系。经过具体实例验证,经巢式PCR反应,本发明可以用来鉴定肝素粗品成分的猪、牛、羊来源,其基因含量灵敏度达到0.01pg,可以广泛的运用到肝素粗成品检验中。本发明还可用于其它产品中猪、牛、羊的成分鉴定。

    一种新型调控褐色脂肪组织的小分子药物虚拟筛选方法及应用

    公开(公告)号:CN119269780A

    公开(公告)日:2025-01-07

    申请号:CN202310813681.2

    申请日:2023-07-04

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明涉及药物筛选技术领域,公开了一种新型调控褐色脂肪组织的小分子药物虚拟筛选方法及应用,包括鉴定新颖的PPARγ结合口袋、PPARγ分子动力学模拟、天然产物数据库的建立、2D及3D分子相似性筛选、基于新型结合口袋的分子对接、结合自由能分析、体外活性筛选和体内效果评估。本发明首次建立了能调节脾胃的天然产物数据库,鉴定了PPARγ的新型结合口袋。并基本此结合口袋进行小分子药物虚拟筛选,节约了成本,提高筛选效率和命中率,可用于进一步开发新型治疗肥胖的药物。

    一种靶向调控肝脏巨噬细胞的工程化外泌体制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN119265116A

    公开(公告)日:2025-01-07

    申请号:CN202310813738.9

    申请日:2023-07-04

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种靶向调控肝脏巨噬细胞的工程化外泌体制备方法及其应用。本发明构建了能装载维生素D3的人脐带来源间充质干细胞外泌体,利用巨噬细胞的吞噬作用,激活巨噬细胞的AhR受体,进而调控巨噬细胞的表型和功能。该工程化外泌体能重编程M1型巨噬细胞为M2型巨噬细胞,降低TNF‑α、INF‑γ、IL‑1β和IL‑6炎性细胞因子,并且能促进IL‑22释放。IL‑22能够改善肝细胞的凋亡和促进其增殖。体内实验表明,工程化外泌体能够明显改善自身免疫性肝炎症状,对全身器官无损伤,可克服传统糖皮质激素类和免疫抑制类药物的带来的副作用,具有广阔的应用前景和临床价值。

    一种高效的小鼠骨髓来源巨噬细胞的转染方法及其应用

    公开(公告)号:CN111057719B

    公开(公告)日:2022-11-11

    申请号:CN201811233196.3

    申请日:2018-10-17

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明为一种高效的小鼠骨髓来源巨噬细胞的转染方法及其应用,其包括以下步骤:1)首先将293T细胞传代至60mm*15mm皿中,培养过夜,使其密度达到80%,按照目的质粒/psPAX2/pMD2.G的顺序以6/3/1的比例进行慢病毒的包装,以获得高滴度慢病毒,滴度为2~3×107TU/mL(总体积5mL);2)取小鼠骨髓,加入鼠源M‑CSF(10ng/mL)进行巨噬细胞诱导,在诱导的第二天加入慢病毒,可以获得高转染效率。本发明在巨噬细胞诱导过程中加入慢病毒,不但能够提高了慢病毒的转染效率,同时还能在不影响巨噬细胞得率的情况下,缩短实验时间。

    一种间充质干细胞在制备治疗M5型白血病药物中的应用

    公开(公告)号:CN105779386B

    公开(公告)日:2019-09-20

    申请号:CN201610208206.2

    申请日:2016-04-06

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明属于医药生物技术领域,具体涉及一种间充质干细胞在制备治疗M5型白血病药物中的应用。本发明提供的间充质干细胞是特定的炎性因子TNF‑α和IFN‑γ刺激后得到的间充质干细胞;所述间充质干细胞诱导肿瘤细胞凋亡的能力是通过肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL来实现的;所述间充质干细胞为离体间充质干细胞。TNF‑α和IFN‑γ的刺激使间充质干细胞表达TRAIL的能力显著提高,抗肿瘤能力显著增强,相较化疗,间充质干细胞移植的毒副作用更低,且其低的免疫原性也大大降低移植物抗宿主病的发病率,满足临床需求,为干细胞移植治疗提供了新的思路。可在制备治疗M5型白血病药物中应用。

    一种用PCR鉴定刀鲚和凤鲚的方法

    公开(公告)号:CN101864476B

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN200910030771.4

    申请日:2009-04-15

    Abstract: 本发明公开了一种特异性鉴别刀鲚与凤鲚的PCR技术。根据刀鲚与凤鲚线粒体DNA控制区(D-loop)和细胞色素b(Cytochrome b)基因的保守序列,设计出两对特异引物,制定了便捷的鉴别刀鲚与凤鲚的PCR反应体系。提取鱼肌肉DNA进行PCR扩增,取扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳,紫外灯下检测,如P1F/R引物对扩增产物存在1220bp DNA条带,P2F/R引物对无扩增,则确定所检鲚鱼为刀鲚;如P1F/R引物对无扩增,P2F/R引物对产物存在280bp DNA条带,则可确定为凤鲚。本方法为形态学上无法鉴别的不同发育时期刀鲚与凤鲚的定性检测提供了快速、可靠的分子生物学鉴定技术。

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