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公开(公告)号：CN109652455B
公开(公告)日：2022-09-23
申请号：CN201910121665.0
申请日：2019-02-19
Applicant: 南京农业大学 , 南京市蔬菜科学研究所
IPC: C12N15/87
Abstract: 为解决不结球白菜再生率低，受基因型影响大，使得转化效率低的技术问题，本发明提供一种磁性纳米载体介导的不结球白菜高效遗传转化方法，包括将含有外源基因的质粒与具有顺磁性、表面覆盖一层PEI薄膜的Fe3O4的磁性纳米载体以质量比1：1连接，得到基因—磁性纳米载体复合物；在花粉培养基中混合基因—磁性纳米载体与待转化植物花粉，在0.1～0.5T的磁场介导下进行磁转化，直接递送基因—磁性纳米载体复合物进入花粉细胞；然后通过植物授粉和受精过程实现待转化植物的外源基因遗传转化。本发明花粉培养基配方、磁性纳米粒子和质粒DNA的质量比、磁转化时间三者的组合，能够保证不结球白菜的花粉活力并有效提高磁转化效率，建立简单高效的遗传转化体系。
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公开(公告)号：CN109652455A
公开(公告)日：2019-04-19
申请号：CN201910121665.0
申请日：2019-02-19
Applicant: 南京农业大学 , 南京市蔬菜科学研究所
IPC: C12N15/87
Abstract: 为解决不结球白菜再生率低，受基因型影响大，使得转化效率低的技术问题，本发明提供一种磁性纳米载体介导的不结球白菜高效遗传转化方法，包括将含有外源基因的质粒与具有顺磁性、表面覆盖一层PEI薄膜的Fe3O4的磁性纳米载体以质量比1：1连接，得到基因—磁性纳米载体复合物；在花粉培养基中混合基因—磁性纳米载体与待转化植物花粉，在0.1～0.5T的磁场介导下进行磁转化，直接递送基因—磁性纳米载体复合物进入花粉细胞；然后通过植物授粉和受精过程实现待转化植物的外源基因遗传转化。本发明花粉培养基配方、磁性纳米粒子和质粒DNA的质量比、磁转化时间三者的组合，能够保证不结球白菜的花粉活力并有效提高磁转化效率，建立简单高效的遗传转化体系。
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公开(公告)号：CN117512161A
公开(公告)日：2024-02-06
申请号：CN202210931718.7
申请日：2022-08-04
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11 , C12Q1/686
Abstract: 本发明公开了一种与不结球白菜色素含量紧密相关的InDel分子标记及其应用，本发明公开的与不结球白菜色素含量相关的分子标记在SEQ ID No.1和SEQ ID No.2引物的扩增下获得SEQ ID No.3或SEQ ID No.4所示的DNA片段，试验证明，该分子标记与不结球白菜中的叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素、叶黄素、胡萝卜素和类胡萝卜素的含量相关，利用该分子标记，可以有效的鉴定不结球白菜中叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素、叶黄素、胡萝卜素和类胡萝卜素的含量，具有重复性好、特异性高的特点，可以用于不结球白菜的分子标记辅助育种选择，这不仅节约了育种成本还大大的加快了育种进程。
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公开(公告)号：CN113549617B
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202110618334.5
申请日：2021-06-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开编辑不结球白菜CENH3基因的sgRNA及其CRISPR/Cas9载体和应用，本发明设计了不结球白菜CENH3基因的sg RNA，构建CRISPR/Cas9基因编辑载体，将连接了目的DNA片段的CRISPR/Cas9载体转入不结球白菜基因组中，通过基因编辑实现对不结球白菜CENH3基因的定点突变。本发明使用花粉纳米磁转化技术结合CRISPR/Cas9技术对不结球白菜内源基因CENH3进行编辑，通过植株抗性筛选、PCR检测、基因测序筛选得到CENH3单倍体诱导系，为在不结球白菜双单倍体育种中利用CENH3介导的染色体消除机制获得单倍体奠定基础。
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公开(公告)号：CN110804675B
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN201911148269.3
申请日：2019-11-21
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种不结球白菜微卫星DNA标记指纹图谱及其应用。本发明以9对SSR引物等位片段的组合为基础，以8个不结球白菜品种/系为标准材料，通过DNA的提取、PCR扩增、PCR产物的鉴定、数据分析，最终构建得到DNA指纹图谱。该指纹图谱可以区分开供试的不结球白菜品种/系，可用于不结球白菜品种/系的鉴定或纯度分析。本发明与传统的形态学和细胞学鉴定检测相比，具有检测时间短、准确性高、可重复性好的优点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109852717B
公开(公告)日：2022-04-08
申请号：CN201811566959.6
申请日：2018-12-19
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于鉴定不结球白菜油亮矮脚黄、黄玫瑰、绿星的分子标记方法，利用开发的SSR分子标记引物对及其检测方法可以将不结球白菜油亮矮脚黄、黄玫瑰、绿星三个品种同时区分开来。本方法不受植株生长发育阶段和环境的影响，具有检测快速、准确等优点，当出现品种假冒或有争议情况时可进行有效地监督和仲裁，值得大范围推广。
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公开(公告)号：CN113755623A
公开(公告)日：2021-12-07
申请号：CN202110941003.5
申请日：2021-08-17
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一组不结球白菜早抽薹的分子标记引物及其应用，属于分子生物学技术领域。所述分子标记引物的序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示，以不结球白菜DNA为模板，通过聚合酶链式反应扩增该片段，根据目的条带的有无，可筛选出不结球白菜早抽薹品种或材料。本发明提供的分子标记引物，可以快速检测不结球白菜早抽薹的品种和材料，极大的节约时间和资源，大大提高选择效率，从而加快育种进程。
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公开(公告)号：CN112575117A
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN202110018658.5
申请日：2021-01-07
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一组用于鉴定不结球白菜红菜薹“靓红玫瑰”和“十月红”的SSR分子标记引物及其应用，属于蔬菜品种鉴定与良种技术领域。所述SSR分子标记引物的序列为：BrcSSR60‑F:5’‑GAGCATCATCACCAAGCTCA‑3’，BrcSSR60‑R:5’‑ATGTAACCGTTTCCTGGCTG‑3’。利用本发明公开的SSR分子标记引物及其检测方法可以将不结球白菜红菜薹“靓红玫瑰”和“十月红”两个品种进行有效区分。该方法不受植株生长发育阶段和环境的影响，操作简单，检测准确迅速，当出现品种混淆或有争议时可进行有效地监督和仲裁。
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公开(公告)号：CN109852717A
公开(公告)日：2019-06-07
申请号：CN201811566959.6
申请日：2018-12-19
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于鉴定不结球白菜油亮矮脚黄、黄玫瑰、绿星的分子标记方法，利用开发的SSR分子标记引物对及其检测方法可以将不结球白菜油亮矮脚黄、黄玫瑰、绿星三个品种同时区分开来。本方法不受植株生长发育阶段和环境的影响，具有检测快速、准确等优点，当出现品种假冒或有争议情况时可进行有效地监督和仲裁，值得大范围推广。
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公开(公告)号：CN106941823A
公开(公告)日：2017-07-14
申请号：CN201710225230.1
申请日：2017-04-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 一种手持式气控型小颗粒种子单粒播种器，它包括壳体（12）和支座（1），其特征是所述支座的一端安插在壳体上，另一端分别安装有排种管（4）和种箱（2）；所述壳体上端安装有气泵（11）并连接有把手（13）；吸管（3）的下端插入种箱中，吸管的上端通过导气管（8）与所述气泵相连通；长连杆（6）和短连杆（7）的一端均与吸管铰接相连，长连杆和短连杆的另一端铰装在壳体上，在壳体上与长连杆驱动端相匹配位置处安装有扳机（17），在长连杆的中部安装有复位弹簧（18），在把手上中安装有为气泵供电的电池（16）；所述导气管通过控气装置（20）实现种子的吸取和释放。本发明结构简单，控制可靠，采用气动吸附方式实现种子的取放，不会出现卡滞。
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