公开(公告)号：CN114410813B

公开(公告)日：2023-12-22

申请号：CN202111336972.4

申请日：2021-11-12

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 张文利 ,  冯逸龙 ,  马星 ,  史依宁 ,  杨莹 ,  程雪姣

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明公开一种在全基因组水平鉴定植物基因组DNA胞嘧啶四联体位点的方法，该方法包括如下步骤：(1)准备植物材料；(2)提取并纯化细胞核；(3)对细胞核内染色质进行片段化并回收基因组DNA；(4)在变复性Buffer中进行变复性反应；(5)iMab‑iM DNA复合物；(6)用Protein G Beads回收过夜反应形成的iMab‑iMDNA复合物；DNA片段；(8)用qPCR方法检测DNA iM富集程度；(9)建库和Illumina测序，在全基因组水平鉴iM位点。整个方法流程简单，耗时较短，DNA片段化可视化效果强，理论上该方法适应于多种植物。(7)从beads上洗脱iMab‑iM DNA复合物，并回收(56)对比文件Zeraati M, et al.I-motif DNAstructures are formed in the nuclei ofhuman cells《.Nat Chem》.2018,第10卷(第6期),摘要.冯逸龙,张文利.DNA鸟嘌呤四联体研究进展《.生物技术通报》.2020,第36卷(第7期),全文.Abou Assi H,et al..i-Motif DNA:structural features and significance tocell biology《.Nucleic Acids Res》.2018,第46卷(第16期),全文.

公开(公告)号：CN114276417B

公开(公告)日：2024-05-03

申请号：CN202111470420.2

申请日：2021-12-03

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 张文利 ,  田瑞平 ,  史依宁 ,  冯逸龙 ,  罗振宇 ,  马星 ,  杨莹 ,  韩琪

IPC: C07K14/00 ,  C12N15/82 ,  C12N15/11 ,  C12N15/65 ,  C12Q1/6869

Abstract: 本发明公开了一种在植物正常生理条件下鉴定全基因组DNA鸟嘌呤四联体位点的方法，该方法在植物正常生理条件下，利用可以在植物体内表达的且特异结合DNA鸟嘌呤四联体位点的优化蛋白，在全基因组水平鉴定基因组DNA鸟嘌呤四联体位点的高能量测序方法，属于生物技术应用领域。该方法是首次利用在植物中表达的G4P蛋白，在植物生理条件下，在全基因组水平鉴定鸟嘌呤四联体位点的方法。整个方法流程简单，耗时较短，DNA片段化可视化效果强。因此，利用本方法提供的核苷酸序列和操作步骤，理论上可在全基因组水平鉴定多种植物的DNA鸟嘌呤四联体位点。

公开(公告)号：CN114410813A

公开(公告)日：2022-04-29

申请号：CN202111336972.4

申请日：2021-11-12

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 张文利 ,  冯逸龙 ,  马星 ,  史依宁 ,  杨莹 ,  程雪姣

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明公开一种在全基因组水平鉴定植物基因组DNA胞嘧啶四联体位点的方法，该方法包括如下步骤：(1)准备植物材料；(2)提取并纯化细胞核；(3)对细胞核内染色质进行片段化并回收基因组DNA；(4)在变复性Buffer中进行变复性反应；(5)iMab‑iM DNA复合物；(6)用Protein G Beads回收过夜反应形成的iMab‑iMDNA复合物；(7)从beads上洗脱iMab‑iM DNA复合物，并回收DNA片段；(8)用qPCR方法检测DNA iM富集程度；(9)建库和Illumina测序，在全基因组水平鉴iM位点。整个方法流程简单，耗时较短，DNA片段化可视化效果强，理论上该方法适应于多种植物。

公开(公告)号：CN114276417A

公开(公告)日：2022-04-05

申请号：CN202111470420.2

申请日：2021-12-03

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 张文利 ,  田瑞平 ,  史依宁 ,  冯逸龙 ,  罗振宇 ,  马星 ,  杨莹 ,  韩琪

IPC: C07K14/00 ,  C12N15/82 ,  C12N15/11 ,  C12N15/65 ,  C12Q1/6869

Abstract: 本发明公开了一种在植物正常生理条件下鉴定全基因组DNA鸟嘌呤四联体位点的方法，该方法在植物正常生理条件下，利用可以在植物体内表达的且特异结合DNA鸟嘌呤四联体位点的优化蛋白，在全基因组水平鉴定基因组DNA鸟嘌呤四联体位点的高能量测序方法，属于生物技术应用领域。该方法是首次利用在植物中表达的G4P蛋白，在植物生理条件下，在全基因组水平鉴定鸟嘌呤四联体位点的方法。整个方法流程简单，耗时较短，DNA片段化可视化效果强。因此，利用本方法提供的核苷酸序列和操作步骤，理论上可在全基因组水平鉴定多种植物的DNA鸟嘌呤四联体位点。