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公开(公告)号:CN118086229A
公开(公告)日:2024-05-28
申请号:CN202410329522.X
申请日:2024-03-21
Applicant: 兰州大学 , 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种猪繁殖与呼吸综合征复制缺陷型病毒株、制备方法及应用,所述的复制缺陷型病毒株将亲本猪繁殖与呼吸综合征病毒全基因组感染性克隆的ORF3基因第346‑543位核苷酸缺失得到,所述的复制缺陷型病毒株在稳定表达猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF3基因编码的GP3蛋白的细胞系中正常连续复制,在MARC‑145、CRL2843‑CD163和PAMs等不表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP3蛋白的其他PRRSV易感细胞系中仅进行单轮感染,有望成为一种安全有效的活病毒疫苗株,解决PRRSV灭活疫苗免疫效果差和弱毒疫苗存在持续带毒、间歇排毒和毒力返强的潜在危害,对于PRRSV防控具有重要意义。
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公开(公告)号:CN119798381A
公开(公告)日:2025-04-11
申请号:CN202510007027.1
申请日:2025-01-03
Applicant: 兰州大学 , 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K14/01 , C07K7/06 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569 , C07K16/08 , A61K39/12 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒4型Cap蛋白抗原表位肽及其单克隆抗体。所述抗原表位肽的氨基酸序列如SEQ ID No.11所示;所述单克隆抗体重链可变区包括SEQ ID No.1‑3所示的CDR1‑3;轻链可变区包括SEQ ID No.4‑6所示的CDR1‑3;所述单克隆抗体与PCV2、PCV3、PEDV、PRRSV等多种其他猪源病毒无反应,特异性良好;且可利用常规基因工程等生物学手段获得,避免了传统杂交瘤细胞长期冻存导致抗体遗传序列易丢失的问题;还有利于抗体在基因或蛋白水平上优化,进一步提高抗体的特异性和亲和力。
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公开(公告)号:CN119264226A
公开(公告)日:2025-01-07
申请号:CN202411694450.5
申请日:2024-11-25
Applicant: 兰州大学 , 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K14/08 , C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白抗原表位肽及其单克隆抗体。所述抗原表位肽的氨基酸序列如SEQ ID No.11所示;所述单克隆抗体重链可变区包括SEQ ID No.1‑3所示的CDR1‑3;轻链可变区包括SEQ ID No.4‑6所示的CDR1‑3;所述单克隆抗体与经典PRRSV、HP‑PRRSV、类NADC30PRRSV、类NADC34PRRSV和欧洲型PRRSV等多种PRRSV毒株反应,保守性良好;且可利用常规基因工程等生物学手段获得,避免了传统杂交瘤细胞长期冻存导致抗体遗传序列易丢失的问题;还有利于抗体在基因或蛋白水平上优化,进一步提高抗体的特异性和亲和力。
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公开(公告)号:CN120053629A
公开(公告)日:2025-05-30
申请号:CN202510187942.3
申请日:2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: A61K39/135 , C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12N7/00 , C12N15/12 , A61K39/125 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明提供了KRT31基因敲除的细胞系与其在促进小RNA病毒科病毒复制和/或生产小RNA病毒科病毒疫苗中的应用,属于基因工程技术领域。本发明提供了一种KRT31基因或其编码蛋白作为靶点在制备调控小RNA病毒科病毒复制产品和/或疫苗生产中的应用。上调所述KRT31基因表达水平能够抑制小RNA病毒科病毒复制,降低所述KRT31基因表达水平能够促进小RNA病毒科病毒复制。本发明采用sgRNA敲除KRT31基因制备基因编码蛋白功能丧失的细胞系促进小RNA病毒科病毒的复制,提高病毒滴度和抗原产量,有助于高效制备小RNA病毒科病毒疫苗。
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公开(公告)号:CN118852447B
公开(公告)日:2025-03-21
申请号:CN202410996016.6
申请日:2024-07-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种鼠源抗猪IgA的单链抗体及应用,所述的单链抗体包括重链可变区和轻链可变区,所述的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,所述的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示,将鼠源抗体可变区的基因序列与所制备的单链抗体的基因序列进行了比对分析,结果表明所述的单链抗体的基因序列与鼠源抗体可变区的基因序列基本一致,证明所构建的抗体基因序列是正确的,所述的单链抗体填补了目前市场上抗猪源IgA单链抗体的空白,为猪源IgA抗体的早期诊断与防控提供新的材料,为尽快控制猪腹泻疾病的疫情传播提供了新的技术支持。
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公开(公告)号:CN119097704A
公开(公告)日:2024-12-10
申请号:CN202410938039.1
申请日:2024-07-12
Applicant: 中国农业大学 , 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: A61K45/00 , A61K31/713 , A61P31/14 , C12N15/113 , A01K67/0276
Abstract: 本发明公开了一种CRY1ZL1基因/蛋白作为靶点在筛选预防或治疗塞内卡病毒感染的药物中的用途,属于基因工程技术领域。具体公开了CRYZL1基因/蛋白表达抑制剂或敲除试剂在预防或治疗SVA感染中的用途,其可抑制SVA内吞、生长、增殖、侵袭。本发明通过在细胞系中敲除CRYZL1基因,发现细胞系对SVA感染的抗病效果显著。
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公开(公告)号:CN118995812A
公开(公告)日:2024-11-22
申请号:CN202410938031.5
申请日:2024-07-12
Applicant: 中国农业大学 , 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/42 , C12N15/113 , C12N9/22 , A61K31/713 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了敲除ZHX3基因在抑制口蹄疫病毒复制中的应用,涉及基因工程技术领域。本发明还公开了敲除ZHX3基因的试剂或药物在制备口蹄疫病毒抑制药物中的应用。本发明发现通过基因编辑技术敲除ZHX3基因后,获得的ZHX3基因敲除细胞系经FMDV攻毒后,细胞内FMDV病毒RNA拷贝数较野生型IBRS‑2细胞显著降低,表明ZHX3基因敲除细胞系具有FMDV抗性表型,能够有效抑制FMDV病毒的复制,为预防或抑制FMDV感染提供了一种可行策略。
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公开(公告)号:CN118979059A
公开(公告)日:2024-11-19
申请号:CN202411031109.1
申请日:2024-07-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N15/85 , C12N15/64 , C12N15/113 , C12N15/12 , C12N5/10
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域,特别是涉及一种猪VASP基因敲除细胞系的构建方法。合成针对VASP基因的带有酶切位点的向导RNA及其互补序列,利用碱基互补配对原则将sgRNA及其互补序列连接为双链sgRNA片段,通过分子克隆重组技术构建重组CRISPR/Cas9质粒,转染到猪肺上皮细胞(Porcine pulmonary epithelial cell)中,设计sgRNA引物,再通过嘌呤霉素药物筛选阳性单细胞克隆株,提取单细胞克隆株的DNA和蛋白质,进行VASP基因测序及蛋白表达检测,最后获得VASP基因敲除的PPE细胞。具有简便、高效、快速、低成本等特点。
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公开(公告)号:CN118852447A
公开(公告)日:2024-10-29
申请号:CN202410996016.6
申请日:2024-07-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种鼠源抗猪IgA的单链抗体及应用,所述的单链抗体包括重链可变区和轻链可变区,所述的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,所述的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示,将鼠源抗体可变区的基因序列与所制备的单链抗体的基因序列进行了比对分析,结果表明所述的单链抗体的基因序列与鼠源抗体可变区的基因序列基本一致,证明所构建的抗体基因序列是正确的,所述的单链抗体填补了目前市场上抗猪源IgA单链抗体的空白,为猪源IgA抗体的早期诊断与防控提供新的材料,为尽快控制猪腹泻疾病的疫情传播提供了新的技术支持。
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公开(公告)号:CN118755721A
公开(公告)日:2024-10-11
申请号:CN202410809804.X
申请日:2024-06-21
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/12 , C12R1/91
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域,特别是涉及一种敲除人源Profilin基因的sgRNA、重组表达载体和构建方法。所述sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明可用于Profilin基因的定向敲除,具有简便、高效、快速、低成本等特点,对于Profilin基因功能和相关通路的研究具有重要意义。
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