一种分离纯化汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原的方法

    公开(公告)号:CN101003564A

    公开(公告)日:2007-07-25

    申请号:CN200610011217.8

    申请日:2006-01-18

    Abstract: 本发明涉及一种分离纯化汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原的方法,其集成了细胞破碎、层析和膜分离等技术,具体包括:将常规工艺发酵培养得到的汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原培养液破碎至细胞破碎率达到50~90%;离心除去细胞碎片,调节pH值和电导率后进行阴离子交换层析,收集活性回收率大于20%以上的洗脱液;合并洗脱液,再次分别调节电导率和pH值后进行疏水层析;采用超滤膜将样品浓缩;最后使用凝胶过滤柱进行凝胶过滤,得到纯度大于99%以上的汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原。该方法纯化活性回收率高,且纯度可达到99%以上,操作步骤少,操作周期短,成本相对较低,易于放大到工业化规模生产,具有较大的实际应用价值。

    异源同种乳清蛋白的分离纯化方法

    公开(公告)号:CN101367864A

    公开(公告)日:2009-02-18

    申请号:CN200810118961.7

    申请日:2008-08-27

    Abstract: 本发明一种异源同种乳清蛋白的分离纯化方法,其步骤为:选取含有一种异源同种乳清蛋白的转基因哺乳动物乳液为原料,离心去除脂类和酪蛋白后获得乳清,将所得乳清经预处理去除免疫球蛋白等大分子杂质。将乳清或预处理后的乳清进行疏水作用层析分离操作,乳清中的异源同种乳清蛋白同疏水层析介质相互作用,由于异源同种乳清蛋白之间空间构象和疏水性的不同,两者可以在疏水层析中分离开,进一步通过凝胶过滤层析得到高纯度的异源同种乳清蛋白纯品,工艺回收率高,生产工艺稳定,适于规模化生产。

    异源同种乳清蛋白的分离纯化方法

    公开(公告)号:CN101367864B

    公开(公告)日:2011-12-14

    申请号:CN200810118961.7

    申请日:2008-08-27

    Abstract: 本发明一种异源同种乳清蛋白的分离纯化方法,其步骤为:选取含有一种异源同种乳清蛋白的转基因牛乳为原料,离心去除脂类和酪蛋白后获得乳清,将所得乳清经预处理去除免疫球蛋白等大分子杂质。将乳清或预处理后的乳清进行疏水作用层析分离操作,乳清中的异源同种乳清蛋白同疏水层析介质相互作用,由于异源同种乳清蛋白之间空间构象和疏水性的不同,两者可以在疏水层析中分离开,进一步通过凝胶过滤层析得到高纯度的异源同种乳清蛋白纯品,工艺回收率高,生产工艺稳定,适于规模化生产。

    一种分离纯化汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原的方法

    公开(公告)号:CN100543031C

    公开(公告)日:2009-09-23

    申请号:CN200610011217.8

    申请日:2006-01-18

    Abstract: 本发明涉及一种分离纯化汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原的方法,其集成了细胞破碎、层析和膜分离等技术,具体包括:将常规工艺发酵培养得到的汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原培养液破碎至细胞破碎率达到50~90%;离心除去细胞碎片,调节pH值和电导率后进行阴离子交换层析,收集活性回收率大于20%以上的洗脱液;合并洗脱液,再次分别调节电导率和pH值后进行疏水层析;采用超滤膜将样品浓缩;最后使用凝胶过滤柱进行凝胶过滤,得到纯度大于99%以上的汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原。该方法纯化活性回收率高,且纯度可达到99%以上,操作步骤少,操作周期短,成本相对较低,易于放大到工业化规模生产,具有较大的实际应用价值。

    一种琼脂糖疏水层析介质及其在纯化酵母表达HBsAg中的应用

    公开(公告)号:CN100486688C

    公开(公告)日:2009-05-13

    申请号:CN200610001813.8

    申请日:2006-01-20

    Abstract: 本发明涉及一种琼脂糖疏水层析介质,结构式如式I所示,是以琼脂糖凝胶为基质,经环氧活化后与丁硫醇偶联,制得的以硫原子为基原子、以丁基为配基、配基密度为60~1250μmol/g干胶的琼脂糖疏水层析介质;-O-R-S(CH2)3CH3式I其中:代表琼脂糖凝胶,为选自琼脂糖6FF、琼脂糖4FF、琼脂糖CL-6B、琼脂糖CL-4B、琼脂糖6B和琼脂糖4B中的一种。该琼脂糖疏水层析介质可用于纯化酵母表达HBsAg。与现有技术相比,本发明的优点在于:介质机械强度高、通透性好,介质配基密度可控,分离效果良好。该介质的制备工艺简单,易于放大。

    二醇聚合物-白介素-1受体拮抗剂偶联物及制备方法和用途

    公开(公告)号:CN101125206A

    公开(公告)日:2008-02-20

    申请号:CN200610089288.X

    申请日:2006-08-15

    Abstract: 本发明涉及二醇聚合物-白介素-1受体拮抗剂偶联物及制法和用途。该偶联物将二醇聚合物活化为末端具有醛基或N-羟基琥珀酰亚胺功能基的活性中间体,再与白介素-1受体拮抗剂反应;二醇聚合物分子根据活化方式的不同共价连接在白介素-1受体拮抗剂的氨基或其组氨酸的咪唑基上,产物通过液相色谱分离得电泳纯二醇聚合物-白介素-1受体拮抗剂偶联物;偶联物保留了未修饰蛋白45%-75%生物学活性。动物实验表明其在生物体内的循环半衰期从未修饰蛋白的6小时提高到18小时;在牛胶原蛋白造型的类风湿性关节炎大鼠模型试验中,能显著(p<0.05)改善动物踝关节和后脚掌病症;说明可作长效活性化合物药物有效地用于治疗类风湿关节炎。

Patent Agency Ranking