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公开(公告)号：CN102977180A
公开(公告)日：2013-03-20
申请号：CN201210438973.4
申请日：2012-11-06
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
IPC: C07K1/14 , C07K1/18 , C07K1/20 , C07K1/22 , C07K1/16 , C07K1/34 , C07K14/47 , C07K14/79 , C07K14/765 , C07K14/775 , C07K14/81 , C07K16/06 , C12N9/02
Abstract: 本发明公开了一种从组分IV中提取人血清白蛋白、免疫球蛋白、转铁蛋白、结合珠蛋白、α2-巨球蛋白、α1-抗胰蛋白酶、铜蓝蛋白、抗凝血酶III、载脂蛋白A1、C1酯酶抑制剂等蛋白的方法。所述方法包括：a）用不同pH值的溶液对沉淀进行分布溶解，将不同的蛋白富集在不同的pH值缓冲液中；b）将溶出液用离子交换层析处理，将组分IV分穿透峰（HSA，IgG，Apo A1，转铁蛋白）和洗脱峰（结合珠蛋白，α2-巨球蛋白、α1-抗胰蛋白酶、抗凝血酶III、铜蓝蛋白和C1酯酶抑制剂），再进一步针对不同的蛋白采用不同层析处理。本发明中所述方法蛋白收率高，容易放大，适合工业化生产，实现了目前血浆生产中废弃物的综合利用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN100543031C
公开(公告)日：2009-09-23
申请号：CN200610011217.8
申请日：2006-01-18
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
Abstract: 本发明涉及一种分离纯化汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原的方法，其集成了细胞破碎、层析和膜分离等技术，具体包括：将常规工艺发酵培养得到的汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原培养液破碎至细胞破碎率达到50～90%；离心除去细胞碎片，调节pH值和电导率后进行阴离子交换层析，收集活性回收率大于20%以上的洗脱液；合并洗脱液，再次分别调节电导率和pH值后进行疏水层析；采用超滤膜将样品浓缩；最后使用凝胶过滤柱进行凝胶过滤，得到纯度大于99%以上的汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原。该方法纯化活性回收率高，且纯度可达到99%以上，操作步骤少，操作周期短，成本相对较低，易于放大到工业化规模生产，具有较大的实际应用价值。
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公开(公告)号：CN102977180B
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201210438973.4
申请日：2012-11-06
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
IPC: C07K1/14 , C07K1/18 , C07K1/20 , C07K1/22 , C07K1/16 , C07K1/34 , C07K14/47 , C07K14/79 , C07K14/765 , C07K14/775 , C07K14/81 , C07K16/06 , C12N9/02
Abstract: 本发明公开了一种从组分IV中提取人血清白蛋白、免疫球蛋白、转铁蛋白、结合珠蛋白、α2-巨球蛋白、α1-抗胰蛋白酶、铜蓝蛋白、抗凝血酶III、载脂蛋白A1、C1酯酶抑制剂等蛋白的方法。所述方法包括：a）用不同pH值的溶液对沉淀进行分布溶解，将不同的蛋白富集在不同的pH值缓冲液中；b）将溶出液用离子交换层析处理，将组分IV分穿透峰（HSA，IgG，Apo A1，转铁蛋白）和洗脱峰（结合珠蛋白，α2-巨球蛋白、α1-抗胰蛋白酶、抗凝血酶III、铜蓝蛋白和C1酯酶抑制剂），再进一步针对不同的蛋白采用不同层析处理。本专利中所述方法蛋白收率高，容易放大，适合工业化生产，实现了目前血浆生产中废弃物的综合利用。
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公开(公告)号：CN100486688C
公开(公告)日：2009-05-13
申请号：CN200610001813.8
申请日：2006-01-20
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
IPC: B01J20/291 , C12N1/02 , C12N15/10
Abstract: 本发明涉及一种琼脂糖疏水层析介质，结构式如式I所示，是以琼脂糖凝胶为基质，经环氧活化后与丁硫醇偶联，制得的以硫原子为基原子、以丁基为配基、配基密度为60～1250μmol/g干胶的琼脂糖疏水层析介质；-O-R-S(CH2)3CH3式I其中：代表琼脂糖凝胶，为选自琼脂糖6FF、琼脂糖4FF、琼脂糖CL-6B、琼脂糖CL-4B、琼脂糖6B和琼脂糖4B中的一种。该琼脂糖疏水层析介质可用于纯化酵母表达HBsAg。与现有技术相比，本发明的优点在于：介质机械强度高、通透性好，介质配基密度可控，分离效果良好。该介质的制备工艺简单，易于放大。
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公开(公告)号：CN101003017A
公开(公告)日：2007-07-25
申请号：CN200610001813.8
申请日：2006-01-20
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
IPC: B01J20/291 , C12N1/02 , C12N15/10
Abstract: 本发明涉及一种琼脂糖疏水层析介质，结构式如式I所示，是以琼脂糖凝胶为基质，经环氧活化后与丁硫醇偶联，制得的以硫原子为基原子、以丁基为配基、配基密度为60～1250μmol/g干胶的琼脂糖疏水层析介质；式I其中：代表琼脂糖凝胶，为选自琼脂糖6FF、琼脂糖4FF、琼脂糖CL－6B、琼脂糖CL－4B、琼脂糖6B和琼脂糖4B中的一种。该琼脂糖疏水层析介质可用于纯化酵母表达HBsAg。与现有技术相比，本发明的优点在于：介质机械强度高、通透性好，介质配基密度可控，分离效果良好。该介质的制备工艺简单，易于放大。
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公开(公告)号：CN101003564A
公开(公告)日：2007-07-25
申请号：CN200610011217.8
申请日：2006-01-18
Applicant: 中国科学院过程工程研究所
Abstract: 本发明涉及一种分离纯化汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原的方法，其集成了细胞破碎、层析和膜分离等技术，具体包括：将常规工艺发酵培养得到的汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原培养液破碎至细胞破碎率达到50～90％；离心除去细胞碎片，调节pH值和电导率后进行阴离子交换层析，收集活性回收率大于20％以上的洗脱液；合并洗脱液，再次分别调节电导率和pH值后进行疏水层析；采用超滤膜将样品浓缩；最后使用凝胶过滤柱进行凝胶过滤，得到纯度大于99％以上的汉逊酵母表达的重组乙肝表面抗原。该方法纯化活性回收率高，且纯度可达到99％以上，操作步骤少，操作周期短，成本相对较低，易于放大到工业化规模生产，具有较大的实际应用价值。
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