一种表征类病毒颗粒及其聚集体大小的方法

    公开(公告)号:CN103344529A

    公开(公告)日:2013-10-09

    申请号:CN201310240184.4

    申请日:2013-06-18

    Abstract: 本发明涉及类病毒颗粒结构表征领域,具体地,涉及一种采用非对称垂直流场流分级技术对类病毒颗粒及其聚集体结构进行表征的方法。该方法包括如下步骤:(1)使用非对称垂直流场流分级标定不同粒径的标准颗粒的保留时间,并建立线形标准曲线;(2)将不同溶液体系或反应条件下的类病毒颗粒使用非对称垂直流场流分级进行表征,得到类病毒颗粒及其聚集体的保留时间;(3)通过标准曲线计算类病毒颗粒及其聚集体的水力学半径;(4)根据类病毒颗粒及其聚集体的水力学半径计算结果表征其结构。本发明表征方法稳定,重现性好,适于不同类病毒颗粒及其聚集体的结构表征。

    异源同种乳清蛋白的分离纯化方法

    公开(公告)号:CN101367864A

    公开(公告)日:2009-02-18

    申请号:CN200810118961.7

    申请日:2008-08-27

    Abstract: 本发明一种异源同种乳清蛋白的分离纯化方法,其步骤为:选取含有一种异源同种乳清蛋白的转基因哺乳动物乳液为原料,离心去除脂类和酪蛋白后获得乳清,将所得乳清经预处理去除免疫球蛋白等大分子杂质。将乳清或预处理后的乳清进行疏水作用层析分离操作,乳清中的异源同种乳清蛋白同疏水层析介质相互作用,由于异源同种乳清蛋白之间空间构象和疏水性的不同,两者可以在疏水层析中分离开,进一步通过凝胶过滤层析得到高纯度的异源同种乳清蛋白纯品,工艺回收率高,生产工艺稳定,适于规模化生产。

    一种电荷诱导亲和吸附介质、其制备方法及其在蛋白纯化中的应用

    公开(公告)号:CN116078363B

    公开(公告)日:2024-08-13

    申请号:CN202310112685.8

    申请日:2023-02-14

    Abstract: 本申请涉及一种电荷诱导亲和吸附介质、其制备方法及其在蛋白纯化中的应用,其通过将烷基琥珀酸酐与带羧基的间隔臂连接,接枝到活化的交联琼脂糖微球上,利用羧基的静电作用诱导白蛋白吸附于烷基琥珀酸酐亲和配基上,在保持亲和介质高选择性的同时,大幅度提升了亲和介质的载量(动态吸附载量是传统蓝胶亲和介质的2倍以上),克服了传统亲和介质吸附载量低,处理量小的问题,有利于血浆蛋白亲和层析的规模化应用。本申请的电荷诱导亲和吸附介质制备简单,层析操作方便,适应性广,可从多种复杂物料体系包括人血浆(血清)、人血浆低温乙醇沉淀组分IV和组分VI中一步层析操作分离纯化白蛋白,纯度大于98%,收率大于90%。

    一种高效纯化金属离子结合蛋白的疏水层析分离纯化方法

    公开(公告)号:CN101948529B

    公开(公告)日:2013-05-01

    申请号:CN201010252608.5

    申请日:2010-08-13

    Abstract: 本发明一种高效纯化金属离子结合蛋白的疏水层析分离纯化方法,其步骤为:选取含有金属离子结合蛋白的待分离物料,添加沉淀剂进行沉淀粗分离获得蛋白混合物。在蛋白混合物中添加过量的螯合剂去除目标蛋白的钙离子或三价铁离子,透析去除螯合剂后添加适量不易沉淀的钾离子,以保持目标蛋白的三级结构。将处理所得蛋白混合物进行疏水层析分离操作,并在层析缓冲液中添加适量的钾离子,由于钾离子不易沉淀,可以有效地保持目标蛋白的天然结构,因此可以有效地提高目标蛋白与杂蛋白在疏水层析中的分辨率。进一步通过凝胶过滤层析可以得到高纯度、高回收率的金属离子结合蛋白的纯品,生产工艺稳定,适于规模化生产。

    一种高效纯化金属离子结合蛋白的离子交换层析分离纯化方法

    公开(公告)号:CN102382168A

    公开(公告)日:2012-03-21

    申请号:CN201010271461.4

    申请日:2010-09-03

    Abstract: 本发明一种高效纯化金属离子结合蛋白的离子交换层析分离纯化方法,其步骤为:选取含有金属离子结合蛋白的待分离物料,添加沉淀剂进行沉淀粗分离获得蛋白混合物。在蛋白混合物中添加适量的蛋白结合金属离子,以保持目标蛋白的三级结构。将处理所得蛋白混合物进行离子交换层析分离操作,并在层析缓冲液中添加适量的蛋白结合金属离子,由于该金属离子辅基可以有效地保持目标蛋白的天然结构,因此可以有效地提高目标蛋白与杂蛋白在离子交换层析中的分辨率。进一步通过凝胶过滤层析可以得到高纯度、高回收率的金属离子结合蛋白的纯品,生产工艺稳定,适于规模化生产。

    二醇聚合物-白介素-1受体拮抗剂偶联物及制备方法和用途

    公开(公告)号:CN101125206A

    公开(公告)日:2008-02-20

    申请号:CN200610089288.X

    申请日:2006-08-15

    Abstract: 本发明涉及二醇聚合物-白介素-1受体拮抗剂偶联物及制法和用途。该偶联物将二醇聚合物活化为末端具有醛基或N-羟基琥珀酰亚胺功能基的活性中间体,再与白介素-1受体拮抗剂反应;二醇聚合物分子根据活化方式的不同共价连接在白介素-1受体拮抗剂的氨基或其组氨酸的咪唑基上,产物通过液相色谱分离得电泳纯二醇聚合物-白介素-1受体拮抗剂偶联物;偶联物保留了未修饰蛋白45%-75%生物学活性。动物实验表明其在生物体内的循环半衰期从未修饰蛋白的6小时提高到18小时;在牛胶原蛋白造型的类风湿性关节炎大鼠模型试验中,能显著(p<0.05)改善动物踝关节和后脚掌病症;说明可作长效活性化合物药物有效地用于治疗类风湿关节炎。

    一种从Cohn组分Ⅴ上清中分离纯化人血清白蛋白的方法

    公开(公告)号:CN109627322A

    公开(公告)日:2019-04-16

    申请号:CN201910012824.3

    申请日:2019-01-07

    CPC classification number: C07K14/765

    Abstract: 本发明提供了一种从Cohn组分Ⅴ上清中分离纯化人血清白蛋白的方法,包括以下步骤:将Cohn组分Ⅴ的上清液上样至含有阴离子交换层析介质的层析柱中,使用洗脱液洗脱层析柱,收集洗脱液得到人血清白蛋白;本方法首次提出以低温乙醇沉淀组分V上清为原料分离纯化白蛋白的新思路,不采用超滤工艺脱除乙醇,从而大大降低了缓冲液用量,减少操作时间,避免了蛋白长时间在较高乙醇溶液中的变性失活问题,具有操作简单,成本低廉,过程耗时短,蛋白活性收率高等优点。利用本发明方法可以对组分Ⅴ上清中的白蛋白进一步回收,有效提高血浆利用率,降低成本,对于实际应用具有重要的价值。

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