公开(公告)号：CN110628816B

公开(公告)日：2022-10-18

申请号：CN201910863564.0

申请日：2019-09-12

Applicant: 中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所)

Inventor： 程涛 ,  张健萍 ,  程新新 ,  赵梅 ,  李国华 ,  许静 ,  张凤 ,  张孝兵

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/12 ,  A61K31/7105 ,  A61K48/00 ,  A61K31/675 ,  A61K31/573 ,  A61P7/04

Abstract: 本发明提供一种用于血友病A的双切供体，将BDDF8定位于肝细胞中高度表达的Alb位点，同源臂两侧还设有可被Cas9‑sgAlb识别的sgAlb‑PAM序列，高压尾静脉注射新型双切HDR供体质粒编码Cas9、sgAlb和pDonor的质粒后，1‑2％的肝细胞在Alb位点精确整合了BDDF8。此外，联合使用免疫抑制剂使BDDF8在80％以上的小鼠中终生稳定表达。可以认为血友病A在大多数小鼠中得到了彻底治愈。

公开(公告)号：CN113336841B

公开(公告)日：2022-09-23

申请号：CN202110613444.2

申请日：2021-06-02

Applicant: 中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所)

Inventor： 程涛 ,  张健萍 ,  赵梅 ,  殷梦迪 ,  李斯昂 ,  杨智学 ,  张凤 ,  李国华 ,  张孝兵

IPC: C07K14/755 ,  C12N15/12 ,  C12N15/864 ,  A61K48/00 ,  A61K38/37 ,  A61P7/04 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明提供了F8蛋白变体及利用其制备的基因治疗载体。所述F8蛋白变体为BDDF8‑N6变体删除至少4个氨基酸后得到的氨基酸序列中的任意一种；其中，删除的氨基酸中包含弗林蛋白识别位点RHQR。本发明提供的F8蛋白变体，以BDDF8‑N6变体为基础，对B结构域进行优化，删除了F8蛋白弗林蛋白识别位点及其附近的氨基酸，得到了新的高效变体，所得变体载体滴度增加，体内测试中F8的活性较高，具有较高的临床转化价值。

公开(公告)号：CN113336841A

公开(公告)日：2021-09-03

申请号：CN202110613444.2

申请日：2021-06-02

Applicant: 中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所)

Inventor： 程涛 ,  张健萍 ,  赵梅 ,  殷梦迪 ,  李斯昂 ,  杨智学 ,  张凤 ,  李国华 ,  张孝兵

IPC: C07K14/755 ,  C12N15/12 ,  C12N15/864 ,  A61K48/00 ,  A61K38/37 ,  A61P7/04 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明提供了F8蛋白变体及利用其制备的基因治疗载体。所述F8蛋白变体为BDDF8‑N6变体删除至少4个氨基酸后得到的氨基酸序列中的任意一种；其中，删除的氨基酸中包含弗林蛋白识别位点RHQR。本发明提供的F8蛋白变体，以BDDF8‑N6变体为基础，对B结构域进行优化，删除了F8蛋白弗林蛋白识别位点及其附近的氨基酸，得到了新的高效变体，所得变体载体滴度增加，体内测试中F8的活性较高，具有较高的临床转化价值。

公开(公告)号：CN110628816A

公开(公告)日：2019-12-31

申请号：CN201910863564.0

申请日：2019-09-12

Applicant: 中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所)

Inventor： 程涛 ,  张健萍 ,  程新新 ,  赵梅 ,  李国华 ,  许静 ,  张凤 ,  张孝兵

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/12 ,  A61K31/7105 ,  A61K48/00 ,  A61K31/675 ,  A61K31/573 ,  A61P7/04

Abstract: 本发明提供一种用于血友病A的双切供体，将BDDF8定位于肝细胞中高度表达的Alb位点，同源臂两侧还设有可被Cas9-sgAlb识别的sgAlb-PAM序列，高压尾静脉注射新型双切HDR供体质粒编码Cas9、sgAlb和pDonor的质粒后，1-2％的肝细胞在Alb位点精确整合了BDDF8。此外，联合使用免疫抑制剂使BDDF8在80％以上的小鼠中终生稳定表达。可以认为血友病A在大多数小鼠中得到了彻底治愈。