公开(公告)号：CN110628816B

公开(公告)日：2022-10-18

申请号：CN201910863564.0

申请日：2019-09-12

Applicant: 中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所)

Inventor： 程涛 ,  张健萍 ,  程新新 ,  赵梅 ,  李国华 ,  许静 ,  张凤 ,  张孝兵

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/12 ,  A61K31/7105 ,  A61K48/00 ,  A61K31/675 ,  A61K31/573 ,  A61P7/04

Abstract: 本发明提供一种用于血友病A的双切供体，将BDDF8定位于肝细胞中高度表达的Alb位点，同源臂两侧还设有可被Cas9‑sgAlb识别的sgAlb‑PAM序列，高压尾静脉注射新型双切HDR供体质粒编码Cas9、sgAlb和pDonor的质粒后，1‑2％的肝细胞在Alb位点精确整合了BDDF8。此外，联合使用免疫抑制剂使BDDF8在80％以上的小鼠中终生稳定表达。可以认为血友病A在大多数小鼠中得到了彻底治愈。

公开(公告)号：CN110628816A

公开(公告)日：2019-12-31

申请号：CN201910863564.0

申请日：2019-09-12

Applicant: 中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所)

Inventor： 程涛 ,  张健萍 ,  程新新 ,  赵梅 ,  李国华 ,  许静 ,  张凤 ,  张孝兵

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/12 ,  A61K31/7105 ,  A61K48/00 ,  A61K31/675 ,  A61K31/573 ,  A61P7/04

Abstract: 本发明提供一种用于血友病A的双切供体，将BDDF8定位于肝细胞中高度表达的Alb位点，同源臂两侧还设有可被Cas9-sgAlb识别的sgAlb-PAM序列，高压尾静脉注射新型双切HDR供体质粒编码Cas9、sgAlb和pDonor的质粒后，1-2％的肝细胞在Alb位点精确整合了BDDF8。此外，联合使用免疫抑制剂使BDDF8在80％以上的小鼠中终生稳定表达。可以认为血友病A在大多数小鼠中得到了彻底治愈。