公开(公告)号：CN119162247A

公开(公告)日：2024-12-20

申请号：CN202411485227.X

申请日：2024-10-23

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 尹双辉 ,  郭慧琛 ,  孙世琪 ,  丁耀忠 ,  尚佑军 ,  谭书桢 ,  张韵 ,  白满元 ,  董虎 ,  吴金恩 ,  周静静 ,  腾志冬

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/64 ,  C12N15/62 ,  C12N15/54 ,  C12N5/10 ,  C07K14/18 ,  C07K1/22 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明提供了一种稳定表达猪瘟病毒疫苗株E2蛋白的悬浮HEK293细胞系的构建方法。本发明构建了表达猪瘟病毒疫苗株E2蛋白的悬浮HEK293细胞系。在细胞稳定传代试验中证实，当HEK‑E2细胞系能够稳定传10代时，培养上清中E2蛋白的表达量稳定，产量稳定保持在1.0‑1.2 mg/ml，亲和层析纯化获得的E2蛋白纯度达到95%，双抗体夹心ELISA确定其具有很好的反应原性，206佐剂乳化E2蛋白免疫猪能够诱导高水平的血清抗体，攻击强毒后能够得到完全保护。本发明构建的HEK‑293细胞系能够稳定分泌表达的CSFV E2蛋白的具备开发为重组E2基因工程疫苗的应用前景。