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公开(公告)号:CN101280307A
公开(公告)日:2008-10-08
申请号:CN200810037734.1
申请日:2008-05-20
Applicant: 上海大学
IPC: C12N15/12 , C12N15/70 , C07K14/435
Abstract: 本发明涉及一种果蝇抗菌肽伏蝇素Diptericin的制备方法。该方法的具体步骤为:果蝇伏蝇素Diptericin基因的获得,重组质粒pGEX-4T-1-diptericin的构建以及融合蛋白的表达纯化和伏蝇素Diptericin的获得。本发明方法采用基因工程方法生产果蝇伏蝇素Diptericin,比化学合成法成本低。以大肠杆菌为表达宿主,表达量较高,达到了315.4mg/L。以pGEX-4T-1为表达载体,易于融合蛋白的纯化,只需经一次亲和层析便可得到纯度较高的融合蛋白。只需经一次酶切便可得到纯的伏蝇素Diptericin,纯化简便。
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公开(公告)号:CN101066995A
公开(公告)日:2007-11-07
申请号:CN200710041198.8
申请日:2007-05-24
Applicant: 上海大学
Abstract: 本发明涉及一种新型分子佐剂牛C3d3分子及其制备方法。本发明的C3d3分子是一种新型分子佐剂,它由三个C3d分子通过柔性连接臂(G4S)2GS串联而得的C3d3。其制备方法包括重组质粒pSecTag2A-C3d2的构建、重组质粒pSecTag2A-C3d3的构建。本发明的分子佐剂牛C3d3不但可以显著地提高目的抗原刺激小鼠产生的特异性抗体水平,而且还有效地增强了小鼠的特异性淋巴细胞增殖反应,该结果表明分子佐剂牛C3d3能同时提高目的抗原在机体内的体液免疫应答和细胞免疫应答。
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公开(公告)号:CN101241128A
公开(公告)日:2008-08-13
申请号:CN200810034739.9
申请日:2008-03-18
Applicant: 上海大学
IPC: G01N33/531 , G01N33/558
Abstract: 本发明涉及一种黄曲霉毒素免疫亲和柱的制备方法。该方法的具体步骤为:酰肼化抗体的制备:用过碘酸钠将抗体非结合活性区域Fc端羟基氧化成醛基,再与己二酸二酰肼反应,生成酰肼化抗体;醛基化固相基质的制备:将含有连二醇结构的固相基质用过碘酸钠氧化,得到醛基化的固相基质;抗体与固相基质的偶联:将酰肼化抗体和醛基化的固相基质混合,振荡反应,待反应结束后,再加入硼氢化钠封闭固相基质上未反应的醛基,得到偶联抗体的固相基质;装柱。本发明将抗体的非结合活性区域Fc端定向偶联到固相基质上,更好地保持抗体的活性;将抗体衍生上酰肼,而不是固相基质,避免酰肼基团可能带来的非特异性吸附;合成好的亲和柱,除偶联抗体外,未引入新基团(如羧基、氨基等),避免由此可能引起的非特异性吸附。
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公开(公告)号:CN101066464A
公开(公告)日:2007-11-07
申请号:CN200710041199.2
申请日:2007-05-24
Applicant: 上海大学
Abstract: 本发明涉及生物新技术领域,特别是一种链球菌DNA疫苗构建,制备以及其免疫效果检测。将停乳链球菌的GapC基因插入到载体pcDNA3.1中构建DNA疫苗pcDNA3.1-GapC,并制备基因工程重组菌pcDNA3.1-GapC/DH5α。高密度培养上述基因工程重组菌,并大规模制备上述DNA疫苗。所构建的DNA疫苗免疫小鼠后,能诱导机体产生针对GapC的抗体和细胞免疫反应。
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公开(公告)号:CN1320351C
公开(公告)日:2007-06-06
申请号:CN200410054319.9
申请日:2004-09-07
Applicant: 上海大学
Abstract: 本发明涉及一种饲料中碘化酪蛋白的测定方法。该方法包括如下步骤:碘离子催化铈铵反应的标准工作曲线的绘制,饲料样品的准备以及饲料中碘化酪蛋白的测定,本方法中饲料样品经过索氏抽提、等电点沉淀和三氯乙酸沉淀,除去了干扰的有机碘和无机碘化物,使样品中的碘仅以特有的有机结合碘碘化蛋白形式存在,因此使用本方法测定样品中的蛋白碘含量,回收率高,相对偏差小。而且该方法操作简单,成本低,灵敏度高,是一种切实可行的检测方法。
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公开(公告)号:CN101241128B
公开(公告)日:2012-05-02
申请号:CN200810034739.9
申请日:2008-03-18
Applicant: 上海大学
IPC: G01N33/531 , G01N33/558
Abstract: 本发明涉及一种黄曲霉毒素免疫亲和柱的制备方法。该方法的具体步骤为:酰肼化抗体的制备:用过碘酸钠将抗体非结合活性区域Fc端羟基氧化成醛基,再与己二酸二酰肼反应,生成酰肼化抗体;醛基化固相基质的制备:将含有连二醇结构的固相基质用过碘酸钠氧化,得到醛基化的固相基质;抗体与固相基质的偶联:将酰肼化抗体和醛基化的固相基质混合,振荡反应,待反应结束后,再加入硼氢化钠封闭固相基质上未反应的醛基,得到偶联抗体的固相基质;装柱。本发明将抗体的非结合活性区域Fc端定向偶联到固相基质上,更好地保持抗体的活性;将抗体衍生上酰肼,而不是固相基质,避免酰肼基团可能带来的非特异性吸附;合成好的亲和柱,除偶联抗体外,未引入新基团(如羧基、氨基等),避免由此可能引起的非特异性吸附。
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公开(公告)号:CN101066463B
公开(公告)日:2010-09-15
申请号:CN200710041163.4
申请日:2007-05-24
Applicant: 上海大学
Abstract: 本发明涉及一种金黄色葡萄球菌DNA疫苗pcDNA3.1(+)-Minigene及其制备方法。本发明构建的DNA疫苗pcDNA3.1(+)-Minigene,通过免疫小鼠实验显示,该DNA疫苗能刺激小鼠机体产生明显和持久的特异性淋巴细胞增殖反应以及一定水平的体液免疫,与相应的pcDNA3.1接种的阴性对照组比较,差异具有显著性(P<0.05)。同时从攻毒实验的结果来看,pcDNA3.1(+)-Minigene质粒能诱导小鼠产生了抗金葡菌感染的抗体,对免疫小鼠起到了免疫保护的作用。
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公开(公告)号:CN101264331A
公开(公告)日:2008-09-17
申请号:CN200810033063.1
申请日:2008-01-24
Applicant: 上海大学
Abstract: 本发明涉及一种杏仁的新用途,即杏仁作为壳聚糖包覆胰岛素脂质体Ch-Ins-Lipo肠道吸收促进剂的应用以及作为壳聚糖包覆胰岛素脂质体Ch-Ins-Lipo药物缓释剂的应用。杏仁能明显促进该药物的口服肠道吸收,提高其药物的生物利用度,并且能明显延长胰岛素的药效时间,缓释作用明显,药效发挥时间超过三周。
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公开(公告)号:CN101066463A
公开(公告)日:2007-11-07
申请号:CN200710041163.4
申请日:2007-05-24
Applicant: 上海大学
Abstract: 本发明涉及一种金黄色葡萄球菌DNA疫苗pcDNA3.1(+)-Minigene及其制备方法。本发明构建的DNA疫苗pcDNA3.1(+)-Minigene,通过免疫小鼠实验显示,该DNA疫苗能刺激小鼠机体产生明显和持久的特异性淋巴细胞增殖反应以及一定水平的体液免疫,与相应的pcDNA3.1接种的阴性对照组比较,差异具有显著性(P<0.05)。同时从攻毒实验的结果来看,pcDNA3.1(+)-Minigene质粒能诱导小鼠产生了抗金葡菌感染的抗体,对免疫小鼠起到了免疫保护的作用。
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公开(公告)号:CN101280307B
公开(公告)日:2010-08-18
申请号:CN200810037734.1
申请日:2008-05-20
Applicant: 上海大学
IPC: C12N15/12 , C12N15/70 , C07K14/435
Abstract: 本发明涉及一种果蝇抗菌肽伏蝇素Diptericin的制备方法。该方法的具体步骤为:果蝇伏蝇素Diptericin基因的获得,重组质粒pGEX-4T-1-diptericin的构建以及融合蛋白的表达纯化和伏蝇素Diptericin的获得。本发明方法采用基因工程方法生产果蝇伏蝇素Diptericin,比化学合成法成本低。以大肠杆菌为表达宿主,表达量较高,达到了315.4mg/L。以pGEX-4T-1为表达载体,易于融合蛋白的纯化,只需经一次亲和层析便可得到纯度较高的融合蛋白。只需经一次酶切便可得到纯的伏蝇素Diptericin,纯化简便。
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