公开(公告)号：CN101241128B

公开(公告)日：2012-05-02

申请号：CN200810034739.9

申请日：2008-03-18

Applicant: 上海大学

Inventor： 陈宇光 ,  戴小峰 ,  田汉莉 ,  沈彦萍 ,  顾鸣 ,  黎双华

IPC: G01N33/531 ,  G01N33/558

Abstract: 本发明涉及一种黄曲霉毒素免疫亲和柱的制备方法。该方法的具体步骤为：酰肼化抗体的制备：用过碘酸钠将抗体非结合活性区域Fc端羟基氧化成醛基，再与己二酸二酰肼反应，生成酰肼化抗体；醛基化固相基质的制备：将含有连二醇结构的固相基质用过碘酸钠氧化，得到醛基化的固相基质；抗体与固相基质的偶联：将酰肼化抗体和醛基化的固相基质混合，振荡反应，待反应结束后，再加入硼氢化钠封闭固相基质上未反应的醛基，得到偶联抗体的固相基质；装柱。本发明将抗体的非结合活性区域Fc端定向偶联到固相基质上，更好地保持抗体的活性；将抗体衍生上酰肼，而不是固相基质，避免酰肼基团可能带来的非特异性吸附；合成好的亲和柱，除偶联抗体外，未引入新基团(如羧基、氨基等)，避免由此可能引起的非特异性吸附。

公开(公告)号：CN1295511C

公开(公告)日：2007-01-17

申请号：CN200510023579.4

申请日：2005-01-26

Applicant: 上海大学

Inventor： 陈宇光 ,  黎双华 ,  顾鸣

IPC: G01N33/559 ,  G01N33/577 ,  G01N33/543 ,  C12P21/08 ,  G01N21/64

Abstract: 发明涉及一种玉米赤霉烯酮的检测方法，它是利用玉米赤霉烯酮单克隆抗体制备的免疫亲和柱及荧光光度计来检测玉米赤霉烯酮的方法，属生物细胞学及微生物菌类毒性代谢产物检测方法技术领域。本发明的方法具有以下检测过程和步骤：一.免疫亲和柱的准备和制备：1.制备单克隆抗体：单克隆抗体的制备要通过抗原合成、小鼠免疫、细胞融合、杂交瘤筛选及获取杂交瘤细胞株、采集单克隆抗体等步骤来获得，2.利用上述的单克隆抗体来制备免疫亲和柱；二.样品中玉米赤霉烯酮的分离与检测方法：将玉米试样用甲醇/水溶液提取其中的ZEN，经过过滤步骤并进行适当稀释之后，将液体样品流经亲和柱，再用甲醇洗脱下来后，用荧光分光光度计测定样液中玉米赤霉烯酮的含量。

公开(公告)号：CN101241128A

公开(公告)日：2008-08-13

申请号：CN200810034739.9

申请日：2008-03-18

Applicant: 上海大学

Inventor： 陈宇光 ,  戴小峰 ,  田汉莉 ,  沈彦萍 ,  顾鸣 ,  黎双华

IPC: G01N33/531 ,  G01N33/558

Abstract: 本发明涉及一种黄曲霉毒素免疫亲和柱的制备方法。该方法的具体步骤为：酰肼化抗体的制备：用过碘酸钠将抗体非结合活性区域Fc端羟基氧化成醛基，再与己二酸二酰肼反应，生成酰肼化抗体；醛基化固相基质的制备：将含有连二醇结构的固相基质用过碘酸钠氧化，得到醛基化的固相基质；抗体与固相基质的偶联：将酰肼化抗体和醛基化的固相基质混合，振荡反应，待反应结束后，再加入硼氢化钠封闭固相基质上未反应的醛基，得到偶联抗体的固相基质；装柱。本发明将抗体的非结合活性区域Fc端定向偶联到固相基质上，更好地保持抗体的活性；将抗体衍生上酰肼，而不是固相基质，避免酰肼基团可能带来的非特异性吸附；合成好的亲和柱，除偶联抗体外，未引入新基团(如羧基、氨基等)，避免由此可能引起的非特异性吸附。

公开(公告)号：CN1645134A

公开(公告)日：2005-07-27

申请号：CN200510023579.4

申请日：2005-01-26

Applicant: 上海大学

Inventor： 陈宇光 ,  黎双华 ,  顾鸣

IPC: G01N30/88 ,  G01N30/74 ,  G01N30/02 ,  G01N33/52 ,  G01N33/53 ,  G01N33/531

Abstract: 发明涉及一种玉米赤霉烯酮的检测方法，它是利用玉米赤霉烯酮单克隆抗体制备的免疫亲和柱及荧光光度计来检测玉米赤霉烯酮的方法，属生物细胞学及微生物菌类毒性代谢产物检测方法技术领域。本发明方法的具有以下检测过程和步骤：一.免疫亲和柱的准备和制备：1.制备单克隆抗体：单克隆抗体的制备要通过抗原合成、小鼠免疫、细胞融合、杂交瘤筛选及获取杂交瘤细胞株、采集单克隆抗体等步骤来获得，2.利用上述的单克隆抗体来制备免疫亲和柱；二.样品中玉米赤霉烯酮的分离与检测方法：将玉米试样用甲醇/水溶液提取其中的ZEN，经过过滤步骤并进行适当稀释之后，将液体样品流经亲和柱，再用甲醇洗脱下来后，用荧光分光光度计测定样液中玉米赤霉烯酮的含量。

公开(公告)号：CN1588068A

公开(公告)日：2005-03-02

申请号：CN200410054318.4

申请日：2004-09-07

Applicant: 上海大学

Inventor： 黎双华 ,  陈宇光

IPC: G01N33/53 ,  G01N33/558 ,  G01N33/532 ,  G01N33/577 ,  G01N33/52 ,  G01N30/88

Abstract: 本发明涉及一种黄曲霉毒素的检测方法，更确切的说它是利用黄曲霉毒素单克隆抗体制备的免疫亲和柱及荧光光度计来检测食品中黄曲霉毒素的方法，属生物细胞学及微生物菌类毒性代谢产物检测方法技术领域。本发明方法的是：首先制备制备单克隆抗体，单克隆抗体的制备要通过小鼠免疫、细胞融合、杂交瘤筛选及获取杂交瘤细胞株、采集单克隆抗体等步骤来获得，然后利用上述的单克隆抗体来制备免疫亲和柱，最后将食品或饲料磨细后用甲醇/水溶液提取其中的黄曲霉毒素，经过过滤，将液体样品流经亲和柱达到净化后，再用甲醇将亲和柱上的AFT洗脱下来，然后用荧光分光光度计测定样液中黄曲霉毒素的含量。