黄曲霉毒素免疫亲和柱的制备方法

    公开(公告)号:CN101241128B

    公开(公告)日:2012-05-02

    申请号:CN200810034739.9

    申请日:2008-03-18

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种黄曲霉毒素免疫亲和柱的制备方法。该方法的具体步骤为:酰肼化抗体的制备:用过碘酸钠将抗体非结合活性区域Fc端羟基氧化成醛基,再与己二酸二酰肼反应,生成酰肼化抗体;醛基化固相基质的制备:将含有连二醇结构的固相基质用过碘酸钠氧化,得到醛基化的固相基质;抗体与固相基质的偶联:将酰肼化抗体和醛基化的固相基质混合,振荡反应,待反应结束后,再加入硼氢化钠封闭固相基质上未反应的醛基,得到偶联抗体的固相基质;装柱。本发明将抗体的非结合活性区域Fc端定向偶联到固相基质上,更好地保持抗体的活性;将抗体衍生上酰肼,而不是固相基质,避免酰肼基团可能带来的非特异性吸附;合成好的亲和柱,除偶联抗体外,未引入新基团(如羧基、氨基等),避免由此可能引起的非特异性吸附。

    黄曲霉毒素免疫亲和柱的制备方法

    公开(公告)号:CN101241128A

    公开(公告)日:2008-08-13

    申请号:CN200810034739.9

    申请日:2008-03-18

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种黄曲霉毒素免疫亲和柱的制备方法。该方法的具体步骤为:酰肼化抗体的制备:用过碘酸钠将抗体非结合活性区域Fc端羟基氧化成醛基,再与己二酸二酰肼反应,生成酰肼化抗体;醛基化固相基质的制备:将含有连二醇结构的固相基质用过碘酸钠氧化,得到醛基化的固相基质;抗体与固相基质的偶联:将酰肼化抗体和醛基化的固相基质混合,振荡反应,待反应结束后,再加入硼氢化钠封闭固相基质上未反应的醛基,得到偶联抗体的固相基质;装柱。本发明将抗体的非结合活性区域Fc端定向偶联到固相基质上,更好地保持抗体的活性;将抗体衍生上酰肼,而不是固相基质,避免酰肼基团可能带来的非特异性吸附;合成好的亲和柱,除偶联抗体外,未引入新基团(如羧基、氨基等),避免由此可能引起的非特异性吸附。

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