新型溶菌酶制剂及其制备方法

    公开(公告)号:CN103518978A

    公开(公告)日:2014-01-22

    申请号:CN201310497875.2

    申请日:2013-10-22

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种新型溶菌酶口服制剂的制备,即通过合成溶菌酶二聚体蛋白并以此制备溶菌酶二聚体海藻酸钠微球,与谷芽或其汤剂或其吸附剂混合制得。该制剂明显促进溶菌酶蛋白的肠道吸收效率,作为新型饲料添加剂,可取代抗生素增强猪等哺乳类养殖动物的生产性能和非特异性免疫功能。

    一种果蝇抗菌肽伏蝇素的制备方法

    公开(公告)号:CN101280307A

    公开(公告)日:2008-10-08

    申请号:CN200810037734.1

    申请日:2008-05-20

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种果蝇抗菌肽伏蝇素Diptericin的制备方法。该方法的具体步骤为:果蝇伏蝇素Diptericin基因的获得,重组质粒pGEX-4T-1-diptericin的构建以及融合蛋白的表达纯化和伏蝇素Diptericin的获得。本发明方法采用基因工程方法生产果蝇伏蝇素Diptericin,比化学合成法成本低。以大肠杆菌为表达宿主,表达量较高,达到了315.4mg/L。以pGEX-4T-1为表达载体,易于融合蛋白的纯化,只需经一次亲和层析便可得到纯度较高的融合蛋白。只需经一次酶切便可得到纯的伏蝇素Diptericin,纯化简便。

    分子佐剂牛C3d3分子及其制备方法

    公开(公告)号:CN101066995A

    公开(公告)日:2007-11-07

    申请号:CN200710041198.8

    申请日:2007-05-24

    Applicant: 上海大学

    Abstract: 本发明涉及一种新型分子佐剂牛C3d3分子及其制备方法。本发明的C3d3分子是一种新型分子佐剂,它由三个C3d分子通过柔性连接臂(G4S)2GS串联而得的C3d3。其制备方法包括重组质粒pSecTag2A-C3d2的构建、重组质粒pSecTag2A-C3d3的构建。本发明的分子佐剂牛C3d3不但可以显著地提高目的抗原刺激小鼠产生的特异性抗体水平,而且还有效地增强了小鼠的特异性淋巴细胞增殖反应,该结果表明分子佐剂牛C3d3能同时提高目的抗原在机体内的体液免疫应答和细胞免疫应答。

    基因重组融合蛋白PFK的制备方法

    公开(公告)号:CN1948477A

    公开(公告)日:2007-04-18

    申请号:CN200610026217.5

    申请日:2006-04-28

    Applicant: 上海大学

    Inventor: 陈宇光 黄筱颖

    Abstract: 本发明涉及一种基因重组融合蛋白PFK的制备方法。该方法包括以下步骤:重组质粒pPICZαA-PFK的构建、重组酵母基因工程菌pPICZαA-PFK/GS115的构建、重组融合蛋白PFK的表达、重组融合蛋白PFK的纯化。毕赤酵母是真核表达系统,能以甲醇为唯一碳源,pPICZαA是分泌型表达质粒,含有醇氧化酶的强启动子(PAOX1),在甲醇的诱导下能表达外源蛋白,并能分泌到胞外,方便蛋白的提取与纯化。毕赤酵母能通过发酵罐发酵生产大量的目的蛋白,不需要外加热源,成本低,规模大。

    巴士德毕赤酵母GS115/PFK-K5的高密度发酵方法

    公开(公告)号:CN1699550A

    公开(公告)日:2005-11-23

    申请号:CN200510025862.0

    申请日:2005-05-17

    Applicant: 上海大学

    Inventor: 陈宇光 余波

    Abstract: 本发明涉及一种巴士德毕赤酵母GS115/PFK-K5的高密度发酵方法。本发明方法包括以下步骤:种子的培养、接种前准备及接种;补料生长阶段:该阶段包括补加甘油和组氨酸;甲醇诱导巴士德毕赤酵母表达PFK-K5:在补料生长阶段结束,即当菌体湿重达到180~220g/L时,停止补加甘油,当甘油彻底耗尽后,开始甲醇诱导,首次补加含PTM112ml/L的甲醇,同时添加5~12%组氨酸至使发酵液终浓度达到0.01~0.5%,待甲醇耗尽后,再次补加含PTM112ml/L的甲醇,如此诱导表达36~60小时后结束发酵;分离提取。采用本发明的巴士德毕赤酵母GS115/PFK-K5高密度发酵法,使巴士德毕赤酵母的菌体量和外源蛋白表达量均有大幅度提高。

    饲料中碘化酪蛋白的测定方法

    公开(公告)号:CN1609595A

    公开(公告)日:2005-04-27

    申请号:CN200410054319.9

    申请日:2004-09-07

    Applicant: 上海大学

    Inventor: 胡建军 陈宇光

    Abstract: 本发明涉及一种饲料中碘化酪蛋白的测定方法。该方法包括如下步骤:碘离子催化铈铵反应的标准工作曲线的绘制,饲料样品的准备以及饲料中碘化酪蛋白的测定,本方法中饲料样品经过索氏抽提、等电点沉淀和三氯乙酸沉淀,除去了干扰的有机碘和无机碘化物,使样品中的碘仅以特有的有机结合碘碘化蛋白形式存在,因此使用本方法测定样品中的蛋白碘含量,回收率高,相对偏差小。而且该方法操作简单,成本低,灵敏度高,是一种切实可行的检测方法。

    酶标记克伦特罗及其制备方法

    公开(公告)号:CN1594284A

    公开(公告)日:2005-03-16

    申请号:CN200410025228.2

    申请日:2004-06-17

    Applicant: 上海大学

    Inventor: 陈宇光 戴小峰

    Abstract: 本发明涉及一种酶标记克伦特罗及其制备方法。本发明的一种酶标记克伦特罗,其结构(如图):其中,E的结构为:其中,本发明的制备方法包括:1.克伦特罗衍生物半戊二酸克伦特罗的合成;2.克伦特罗衍生物长臂克伦特罗的合成,3.长臂克伦特罗与辣根过氧化物酶的交联。采用本发明制备的酶标记克伦特罗,通过其与β2-肾上腺素能受体的亲和力,可以快速、准确的检测出β2-兴奋剂,而且该方法操作简单、成本低、使用方便。

    巴士德毕赤酵母GS115/PFK-K5的高密度发酵方法

    公开(公告)号:CN100368524C

    公开(公告)日:2008-02-13

    申请号:CN200510025862.0

    申请日:2005-05-17

    Applicant: 上海大学

    Inventor: 陈宇光 余波

    Abstract: 本发明涉及一种巴士德毕赤酵母GS115/PFK-K5的高密度发酵方法。本发明方法包括以下步骤:种子的培养、接种前准备及接种;补料生长阶段:该阶段包括补加甘油和组氨酸;甲醇诱导巴士德毕赤酵母表达PFK-K5:在补料生长阶段结束,即当菌体湿重达到180~220g/L时,停止补加甘油,当甘油彻底耗尽后,开始甲醇诱导,首次补加含PTM112ml/L的甲醇,同时添加5~12%组氨酸至使发酵液终浓度达到0.01~0.5%,待甲醇耗尽后,再次补加含PTM112ml/L的甲醇,如此诱导表达36~60小时后结束发酵;分离提取。采用本发明的巴士德毕赤酵母GS115/PFK-K5高密度发酵法,使巴士德毕赤酵母的菌体量和外源蛋白表达量均有大幅度提高。

    重组酵母基因工程菌pPICZαA-K1-KDR(1-3)/GS115的制备方法

    公开(公告)号:CN101070523A

    公开(公告)日:2007-11-14

    申请号:CN200610026206.7

    申请日:2006-04-28

    Applicant: 上海大学

    Inventor: 黄筱颖 陈宇光

    Abstract: 本发明涉及一种重组酵母基因工程菌pPICZαA-K1-KDR(1-3)/GS115的制备方法。该方法包括以下步骤:重组质粒pPICZαA-K1-KDR(1-3)的构建(包括重组质粒pPICZαA-K1的构建、重组质粒pPICZαA-K1-KDR(1-3)的构建)、重组酵母基因工程菌pPICZαA-K1-KDR(1-3)/GS115的构建。毕赤酵母是真核表达系统,能以甲醇为唯一碳源,pPICZαA是分泌型表达质粒,含有醇氧化酶的强启动子(PAOX1),在甲醇的诱导下能表达外源蛋白,并能分泌到胞外,方便蛋白的提取与纯化。毕赤酵母能通过发酵罐发酵生产大量的目的蛋白,不需要外加热源,成本低,规模大。

Patent Agency Ranking