一种马铃薯Patatin突变体及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN120060205A

    公开(公告)日:2025-05-30

    申请号:CN202510306823.5

    申请日:2025-03-15

    Abstract: 本发明提供了一种马铃薯Patatin突变体及其制备方法与应用,采用毕赤酵母表达系统对Patatin进行异源表达,并进行酶学性质的探究。采用最佳发酵条件进行高细胞密度发酵,表达量可达121mg/L;以p‑NPP为底物验证Patatin的酶学性质和底物特异性,发现其最适底物为短链脂肪酸;经过定向设计改造的Patatin D286A突变体显著提高了蛋白质的变性温度,提高了对长链底物的选择性,且不改变蛋白质的折叠;分子动力学模拟表明,D286A突变体会破坏结构域280‑286的螺旋构型,将其转变为柔性环,可以更好地将长链底物pNP‑C16容纳在活性口袋中。本发明为高效合成并大规模生产Patatin,提高Patatin脂肪酶水解长链脂肪酸的催化效率、稳定性和特异性,为其在中链脂肪酸等功能脂质中应用奠定了基础。

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