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公开(公告)号：CN101398381A
公开(公告)日：2009-04-01
申请号：CN200810234984.4
申请日：2008-11-12
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了一种梨花粉和花粉管微丝骨架的荧光标记方法，属于生物技术领域。包括采集成熟花粉，在培养基中分别培养花粉0.5h和2h，用新鲜的花粉培养基配制的200μmol/L MBS(顺丁烯酰胺苯甲酸－N－琥珀酸酯)预固定5－10min后分别用2％多聚甲醛和4％多聚甲醛各固定0.5h，洗涤花粉(管)，用终浓度为5μg/ml[含5％DMSO(二甲基亚砜)]的FITC－ph染色液(异硫氰酸荧光素标记的鬼笔环肽染色液)，在25℃避光下染色0.5－1h，微丝骨架被荧光标记。本发明具有操作简单、快速、标记效果好、对微丝骨架结构破坏小等特点，可用于蔷薇科植物花粉(管)的开发利用，实际应用价值高。
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公开(公告)号：CN101265461A
公开(公告)日：2008-09-17
申请号：CN200810023305.9
申请日：2008-04-08
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明涉及一种梨花粉管中分离和纯化线粒体的方法，属于生物技术领域。包括花粉的采集、培养，线粒体提取液的配制、清洗液的配制、Percoll梯度的配制以及花粉管线粒体分离过程，将培养好的花粉管用细胞筛过滤，添加线粒体提取液研磨，获得细胞质液体，振荡离心后，用Percoll梯度液纯化、清洗获得线粒体。采用本方法获得完整的具有活力的花粉管的线粒体，提高了线粒体分离纯化效率。这种从微量花粉管中分离纯化线粒体技术，适合于作为花粉管的生理生化及细胞遗传等实验材料。对于研究开发花粉管的快速生长、以及不亲和花粉管的生长抑制技术将具有重要意义。
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公开(公告)号：CN101012480A
公开(公告)日：2007-08-08
申请号：CN200710020086.4
申请日：2007-02-12
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了李品种自交不亲和性基因型(S基因型)的分子标记鉴定方法，属于生物技术领域。用标记引物扩增不同李品种材料DNA，可扩增出1300bp的扩增片段，标志着花粉SFB基因的存在；再使用Mbo I酶切扩增产物获得扩增产物的酶切谱带；根据不同单元型的花粉SFB基因间表现出不同的酶切谱带，确定各品种的自交不亲和基因型：相同谱带为同一S基因型，反之为不同S基因型。通过本发明提供的李花粉自交不亲和基因型分子标记方法用于不同李自交不亲和性基因型品种的鉴定、指导育种亲本的选择及其授粉品种的配置，可提高自交不亲和基因型的检测效率，缩短育种进程，节约生产成本。
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公开(公告)号：CN1818057A
公开(公告)日：2006-08-16
申请号：CN200510134904.4
申请日：2005-12-30
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明梨花粉和花粉管原生质体的提取方法，涉及植物体细胞壁的破除和原生质体获取的方法，是属于生物化学及食品科学领域；本发明的主要是依据植物花粉细胞壁的特性来获取完整的花粉或花粉管原生质体，而且保持原有的活力。采用两步法获取花粉及花粉管原生质体，步骤主要包括采集成熟花粉，在花粉培养基中培养3～3.5h后，进行酶解反应50min后、离心，就能获得完整的具有活力的花粉粒(管)的原生质体，而且该原生质体仍然保持原有活性，适合于作为花粉及花粉管的生理生化及细胞信号转导特性研究的实验材料。
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公开(公告)号：CN1799399A
公开(公告)日：2006-07-12
申请号：CN200610037844.9
申请日：2006-01-17
Applicant: 南京农业大学
IPC: A23L1/076
Abstract: 本发明梨花粉和花粉管原生质体的提取方法，涉及植物体细胞壁的破除和原生质体获取的方法，是属于生物化学及食品科学领域；本发明主要是依据植物花粉细胞壁的特性来获取完整的花粉或花粉管原生质体，而且保持原有的活力。利用柠檬酸去除花粉壁的方法，该方法是将干燥的花粉放入2－3mol/L柠檬酸液中，经过约30分钟左右的培养，可看到花粉的原生质体逐渐从萌芽口处出来，通过离心能够获得脱壁的花粉原生质体，该方法获得了原生质，能够保持原有的营养价值，没有污染，方法简单，成本低，非常适合于在食品科学领域的应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN120005937A
公开(公告)日：2025-05-16
申请号：CN202510191552.3
申请日：2025-02-20
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/82 , C12N15/29 , C07K14/415 , A01H5/02 , A01H6/74
Abstract: 本发明公开了梨PbrGIS1基因在促进梨花粉管生长中的应用，属于植物基因工程技术领域。本发明利用植物基因克隆技术从‘砀山酥梨’花粉中克隆得到基因PbrGIS1，其核苷酸序列为SEQ ID No.1所示；其编码的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2。研究表明，PbrGIS1能促进梨花粉管生长，PbrGIS1表达的变化与花粉管顶端ROS水平和纤维素含量的变化有关，同时PbrGIS1也参与自交不亲和反应的调控机制。采用花粉磁转染技术研究花粉管中基因的功能，为提高授粉效率方面提供了广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN120005936A
公开(公告)日：2025-05-16
申请号：CN202510191551.9
申请日：2025-02-20
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/82 , C12N15/29 , C07K14/415 , A01H5/02 , A01H6/74
Abstract: 本发明公开了快速碱化因子家族基因PbrRALF6在促进梨花粉管生长中的应用，属于植物基因工程技术领域。本发明利用植物基因克隆技术从‘砀山酥梨’花粉中克隆得到基因PbrRALF6，其核苷酸序列为SEQ ID No.1所示；其编码的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2。研究表明，PbrRALF6能促进梨花粉管生长，PbrRALF6表达的变化与花粉管顶端ROS水平的变化有关，同时PbrRALF6也参与自交不亲和反应的调控机制。采用花粉磁转染技术研究花粉管中基因的功能，为提高授粉效率方面提供了广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN119969394A
公开(公告)日：2025-05-13
申请号：CN202411944644.6
申请日：2024-12-27
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了一种利用酪醇防控梨轮纹病的方法，通过外源喷施酪醇水溶液防控梨轮纹病；所述的酪醇水溶液中酪醇的浓度为1‑5mg/ml。本发明以‘砀山’梨为实验材料，通过体外抑菌实验以及轮纹病菌接种实验，证明了酪醇对梨轮纹病菌有显著的抑制作用，能够有效的抑制轮纹菌病斑的发展速度，减少病害的发生和蔓延，从而降低轮纹病菌对植物体的侵害。酪醇是植物体内的天然化合物，具有低毒性，将其应用于梨轮纹病的防治可以增强其自身的防御机制，提高其对轮纹病的自然抵抗力，同时减少或替代化学农药的使用，降低对环境和人类健康的潜在风险。
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公开(公告)号：CN119177249A
公开(公告)日：2024-12-24
申请号：CN202411318784.2
申请日：2024-09-21
Applicant: 南京农业大学
Inventor： 张绍铃 , 王利斌 , 李岚清 , 张旭 , 张丽 , 谭筱玉 , 贾璐婷 , 张苏玲 , 谢智华 , 任晓镤 , 乔鑫 , 谢玉花 , 杨兵 , 马敏 , 牛军鹏 , 李雪晖 , 刘腾飞
IPC: C12N15/82 , C07K14/415 , C12N15/29 , A01H5/08 , A01H6/74
Abstract: 本发明公开了转录因子PbrNAC34a和PbrMYB3在调控梨果实中柠檬酸积累中的应用。本发明首次揭示了梨果实中PbrNAC34a通过调控转录因子PbrMYB3和PbrMYB65的表达，进而调控柠檬酸代谢关键基因PbrACO2的表达，促进柠檬酸异构化，减少其在果实中的积累，为实现梨果实品质性状的定向改良提供了理论及实践基础。
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公开(公告)号：CN117660474B
公开(公告)日：2024-10-01
申请号：CN202311391230.0
申请日：2023-10-25
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/08 , A01H6/74
Abstract: 本发明公开了梨转录因子PbrMYB65与PbrACO2基因启动子互作在调控果实柠檬酸异构化中的应用。梨MYB家族转录因子PbrMYB65的核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO.1所示，所属基因编码蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明首次揭示了调控梨果实PbrACO2基因表达的转录因子PbrMYB65。阐明了PbrMYB65与PbrACO2基因启动子中的MYB结合位点(P1：(‑800)‑(‑795)；P2：(‑203)‑(‑198))互作在调控梨果实柠檬酸异构化的作用机制，为实现梨果实品质性状的定向改良提供了理论及实践基础。
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