公开(公告)号：CN101565748A

公开(公告)日：2009-10-28

申请号：CN200910032896.0

申请日：2009-06-05

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 张绍铃 ,  吴华清 ,  齐永杰 ,  吴俊 ,  陶书田 ,  齐开杰 ,  肖家欣

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明提供了早期快速鉴定梨自花结实性株系的分子标记方法，属于分子遗传学领域。通过设计的梨自花结实性S4sm－RNase基因特异正反向引物S4smF与S4smR分别对自花结实性品种'奥嗄二十世纪'的杂交授粉后代基因组DNA的进行扩增，凡是能扩增得到666bp特异条带的梨植株，表明该植株中含有S4sm－RNase基因，就是自花结实性株系。本发明标记的鉴定方法简便快捷，只涉及基因组DNA的PCR扩增，提高了自花结实性基因型的检测效率。可在植株的幼苗期进行，并不受环境条件的影响，在短时间内可进行大量群体后代的检测，节约生产成本，缩短育种进程，具有良好的应用价值和产业化前景。

公开(公告)号：CN101398381A

公开(公告)日：2009-04-01

申请号：CN200810234984.4

申请日：2008-11-12

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 张绍铃 ,  刘珠琴 ,  吴俊 ,  吴华清 ,  肖家欣

IPC: G01N21/64 ,  G01N33/48

Abstract: 本发明提供了一种梨花粉和花粉管微丝骨架的荧光标记方法，属于生物技术领域。包括采集成熟花粉，在培养基中分别培养花粉0.5h和2h，用新鲜的花粉培养基配制的200μmol/L MBS(顺丁烯酰胺苯甲酸－N－琥珀酸酯)预固定5－10min后分别用2％多聚甲醛和4％多聚甲醛各固定0.5h，洗涤花粉(管)，用终浓度为5μg/ml[含5％DMSO(二甲基亚砜)]的FITC－ph染色液(异硫氰酸荧光素标记的鬼笔环肽染色液)，在25℃避光下染色0.5－1h，微丝骨架被荧光标记。本发明具有操作简单、快速、标记效果好、对微丝骨架结构破坏小等特点，可用于蔷薇科植物花粉(管)的开发利用，实际应用价值高。