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公开(公告)号:CN106995487A
公开(公告)日:2017-08-01
申请号:CN201710248386.1
申请日:2017-04-17
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/01
Abstract: 本发明涉及一种源于鸡传染性贫血病毒(Chicken anemia virus,CAV)VP1‑aa 23‑43多肽作为高效细胞穿膜肽的应用。所述VP1‑aa 23‑43多肽序列如SEQ ID NO.2所示。该多肽可以携带FITC在30min内进入293T细胞、HCT‑116细胞、3T3细胞、MDCK细胞、MSB1细胞,而且穿膜效率与穿膜肽浓度呈正相关性,关键特点其可高效进入悬浮培养细胞。结合激光共聚焦显微镜和流式细胞术结果显示,鸡传染性贫血病毒VP1‑aa 23‑43多肽在10μM时具有比TAT短肽的穿膜效率高2倍多。
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公开(公告)号:CN106349348A
公开(公告)日:2017-01-25
申请号:CN201610937104.4
申请日:2016-11-01
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C07K14/005 , C12N15/70 , C12N2750/10022 , C12N2800/101
Abstract: 本发明提供了一种GyV7环形病毒VP3蛋白制备方法。该方法基于重组酶ExnaseTM II将线性化的pGEX-6p-1载体与GyV7病毒VP3基因片段PCR产物不经酶切连接反应,直接重组克隆技术;并转化到大肠杆菌,实现VP3蛋白表达;其中,用于PCR扩增GyV7病毒VP3基因的上、下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。该方法操作简单、快速高效,获得的GyV7病毒VP3表达及纯化的蛋白,可直接提供VP3蛋白作为GyV7诊断抗原;作为免疫原获得抗VP3多克隆抗体;为开展GyV7流行病学调查提供有效诊断试剂;并为进一步探究VP3生物学功能具有重要意义。
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公开(公告)号:CN106018780A
公开(公告)日:2016-10-12
申请号:CN201610327488.8
申请日:2016-05-17
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: G01N33/5302 , G01N21/6486
Abstract: 本发明属于生物技术检测领域,具体涉及一种基于F1蛋白的检测4型禽腺病毒抗体的间接免疫荧光试剂盒。该试剂盒包括表达F1蛋白的293T细胞,FITC标记的羊抗鸡抗体,样品稀释液,洗涤液。本发明试剂盒具有良好的特异性;该试剂盒不仅能用于血清4型禽腺病毒感染状况流行病学调查,而且能有效用于监测免疫鸡群血清4型禽腺病毒抗体水平,用于评价免疫保护性抗体水平等。
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公开(公告)号:CN105973854A
公开(公告)日:2016-09-28
申请号:CN201610327763.6
申请日:2016-05-17
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: G01N21/6486 , G01N33/5302
Abstract: 本发明属于生物技术检测领域,具体涉及一种基于F2蛋白的检测4型禽腺病毒抗体的间接免疫荧光试剂盒。该试剂盒包括表达F2蛋白的293T细胞,FITC标记的羊抗鸡抗体,样品稀释液和洗涤液。本发明试剂盒具有良好的特异性。该试剂盒不仅能用于血清4型禽腺病毒感染状况流行病学调查,而且能有效用于监测免疫鸡群血清4型禽腺病毒抗体水平,用于评价免疫保护性抗体水平等。
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公开(公告)号:CN105037504A
公开(公告)日:2015-11-11
申请号:CN201510359309.4
申请日:2015-06-25
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C07K14/01 , C07K2319/23 , C12N2750/10011
Abstract: 本发明提供了一种AGV2型环形病毒VP2可溶性蛋白及其制备方法。是利用pGEX-6p-1线性化载体以及AGV2病毒VP2基因片段的引物,利用重组酶ExnaseTM II不经酶切连接反应,直接在体外快速重组克隆VP2,转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达、实现AGV2的VP2蛋白与GST的融合可溶性表达,并获得纯化的VP2可溶性蛋白。本发明获得的AGV2病毒VP2可溶性表达及纯化的蛋白,可直接提供VP2可容性蛋白作为AGV2诊断抗原;作为免疫原获得抗VP2多克隆抗体;为开展AGV2血清学流行病学调查及VP2功能研究提供有效免疫学试剂,填补国内外空白;并为进一步探究VP2生物学功能具有重要意义。
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公开(公告)号:CN104833801A
公开(公告)日:2015-08-12
申请号:CN201510113989.1
申请日:2015-03-16
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569
CPC classification number: G01N33/56983
Abstract: 一种检测小鹅瘟抗原的双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用,本发明属于生物技术检测领域,本发明包括包被抗小鹅瘟病毒(GPV)单克隆抗体的酶标板、GPV标准阳性抗原和针对GPV不同表位的酶标记抗GPV单克隆抗体。本发明的技术原理:酶联免疫吸附试验(ELISA)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。本发明可用于检测大分子抗原或特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、易于标准化等优点。
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公开(公告)号:CN103278635B
公开(公告)日:2014-10-22
申请号:CN201310213811.5
申请日:2013-05-31
IPC: G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种动物布鲁氏菌病竞争ELISA抗体检测试剂盒。该试剂盒使用了一种能与布鲁氏菌特异性结合的3E4株单克隆抗体,检测中该单克隆抗体能与布鲁氏菌产生的抗体产生特异性竞争,而与其它病原细菌无竞争性,特别是与布鲁氏菌有强烈交叉反应的小肠结肠炎耶尔森氏菌O9和大肠杆菌O157抗血清无竞争性,有效解决了目前商品化布病竞争ELISA试剂盒无法区分小肠结肠炎耶尔森氏菌O9和大肠杆菌O157的缺陷,提高了检测特异性;本试剂盒使用了对猪牛羊均具有良好反应原性的猪种布鲁氏菌S2株LPS作为包被抗原,既提高了LPS的产量,降低生产成本,又提高了检测敏感性。
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公开(公告)号:CN103995123A
公开(公告)日:2014-08-20
申请号:CN201410266781.9
申请日:2014-06-16
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/577
CPC classification number: G01N33/56911 , G01N33/54373 , G01N2333/23
Abstract: 一种竞争ELISA试剂盒检测牛布氏杆菌病的方法,属于生物技术检测领域,将超声裂解处理的牛种布鲁氏菌A99包被ELISA酶标板;再将抗布鲁氏菌特异单克隆抗体bru-5C10和稀释的待检血清样品加入酶标板的板孔中;并同时分别将抗布鲁氏菌特异单克隆抗体bru-5C10分别和已知的阴、阳性血清加入酶标板的板孔中,水浴后用PBST洗涤,再向各板孔中分别加入抗小鼠IgG酶标抗体,孵育洗涤后,进行显色反应,测得各板孔的OD450值,计算各板孔的抑制率。本发明利用建立的cELISA方法对小肠结肠炎耶尔森菌O9和大肠杆菌O157高免阳性血清进行检测,PI值均低于30%,可以有效地排除假阳性结果的发生。
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公开(公告)号:CN102924577B
公开(公告)日:2014-03-26
申请号:CN201210494560.8
申请日:2012-11-28
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了鸡高迁移率族蛋白B1(chHMGB1)抗原多肽和抗chHMGB1的单克隆抗体。该chHMGB1抗原多肽序列为VDAGKKVVAKAEKSKK。以该抗原多肽为免疫原免疫Balb/c小鼠,筛选得到一株杂交瘤细胞株2G1,保藏编号为CGMCCNo.6708。该细胞株能够持续稳定地分泌抗chHMGB1的单克隆抗体。该单克隆抗体不仅能够与融合蛋白表达的chHMGB1反应,而且能够与禽类巨噬细胞系HD11和CEF、DF1细胞中天然的chHMGB1特异性反应;该抗体还可以用于细胞刺激后培养上清中chHMGB1的分析,因此可用于对chHMGB1分子生物学功能的深入研究。
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公开(公告)号:CN103163299A
公开(公告)日:2013-06-19
申请号:CN201310046928.9
申请日:2013-02-05
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/577
Abstract: 本发明提供了一种禽白血病双抗体夹心ELISA抗原检测试剂盒,其中包括:包被抗ALVp27蛋白单克隆抗体的酶标板、酶标记抗ALVp27蛋白单克隆抗体等。捕获抗体和检测抗体分别针对p27蛋白不同的抗原决定簇;包被在酶标板的抗ALVp27蛋白单克隆抗体由杂交瘤细胞株ALVP27-5D3分泌获得,酶标记抗ALVp27蛋白单克隆抗体由杂交瘤细胞株ALVP27-4F12分泌获得。本发明试剂盒操作简便、快速,可以用于ALV所有亚群病毒的检测,适用于基层各级兽医部门和出入境禽白血病的快速大量筛选检测。该方法所需成本低廉,经济效益显著、应用前景广泛。
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