一种GyV7环形病毒VP3蛋白制备方法

    公开(公告)号:CN106349348A

    公开(公告)日:2017-01-25

    申请号:CN201610937104.4

    申请日:2016-11-01

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: C07K14/005 C12N15/70 C12N2750/10022 C12N2800/101

    Abstract: 本发明提供了一种GyV7环形病毒VP3蛋白制备方法。该方法基于重组酶ExnaseTM II将线性化的pGEX-6p-1载体与GyV7病毒VP3基因片段PCR产物不经酶切连接反应,直接重组克隆技术;并转化到大肠杆菌,实现VP3蛋白表达;其中,用于PCR扩增GyV7病毒VP3基因的上、下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。该方法操作简单、快速高效,获得的GyV7病毒VP3表达及纯化的蛋白,可直接提供VP3蛋白作为GyV7诊断抗原;作为免疫原获得抗VP3多克隆抗体;为开展GyV7流行病学调查提供有效诊断试剂;并为进一步探究VP3生物学功能具有重要意义。

    一种检测小鹅瘟抗原的双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN104833801A

    公开(公告)日:2015-08-12

    申请号:CN201510113989.1

    申请日:2015-03-16

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: G01N33/56983

    Abstract: 一种检测小鹅瘟抗原的双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用,本发明属于生物技术检测领域,本发明包括包被抗小鹅瘟病毒(GPV)单克隆抗体的酶标板、GPV标准阳性抗原和针对GPV不同表位的酶标记抗GPV单克隆抗体。本发明的技术原理:酶联免疫吸附试验(ELISA)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。本发明可用于检测大分子抗原或特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、易于标准化等优点。

    动物布鲁氏菌病竞争ELISA抗体检测试剂盒

    公开(公告)号:CN103278635B

    公开(公告)日:2014-10-22

    申请号:CN201310213811.5

    申请日:2013-05-31

    Abstract: 本发明涉及一种动物布鲁氏菌病竞争ELISA抗体检测试剂盒。该试剂盒使用了一种能与布鲁氏菌特异性结合的3E4株单克隆抗体,检测中该单克隆抗体能与布鲁氏菌产生的抗体产生特异性竞争,而与其它病原细菌无竞争性,特别是与布鲁氏菌有强烈交叉反应的小肠结肠炎耶尔森氏菌O9和大肠杆菌O157抗血清无竞争性,有效解决了目前商品化布病竞争ELISA试剂盒无法区分小肠结肠炎耶尔森氏菌O9和大肠杆菌O157的缺陷,提高了检测特异性;本试剂盒使用了对猪牛羊均具有良好反应原性的猪种布鲁氏菌S2株LPS作为包被抗原,既提高了LPS的产量,降低生产成本,又提高了检测敏感性。

    一种竞争ELISA试剂盒检测牛布氏杆菌病的方法

    公开(公告)号:CN103995123A

    公开(公告)日:2014-08-20

    申请号:CN201410266781.9

    申请日:2014-06-16

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: G01N33/56911 G01N33/54373 G01N2333/23

    Abstract: 一种竞争ELISA试剂盒检测牛布氏杆菌病的方法,属于生物技术检测领域,将超声裂解处理的牛种布鲁氏菌A99包被ELISA酶标板;再将抗布鲁氏菌特异单克隆抗体bru-5C10和稀释的待检血清样品加入酶标板的板孔中;并同时分别将抗布鲁氏菌特异单克隆抗体bru-5C10分别和已知的阴、阳性血清加入酶标板的板孔中,水浴后用PBST洗涤,再向各板孔中分别加入抗小鼠IgG酶标抗体,孵育洗涤后,进行显色反应,测得各板孔的OD450值,计算各板孔的抑制率。本发明利用建立的cELISA方法对小肠结肠炎耶尔森菌O9和大肠杆菌O157高免阳性血清进行检测,PI值均低于30%,可以有效地排除假阳性结果的发生。

    禽白血病双抗体夹心ELISA抗原检测试剂盒

    公开(公告)号:CN103163299A

    公开(公告)日:2013-06-19

    申请号:CN201310046928.9

    申请日:2013-02-05

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种禽白血病双抗体夹心ELISA抗原检测试剂盒,其中包括:包被抗ALVp27蛋白单克隆抗体的酶标板、酶标记抗ALVp27蛋白单克隆抗体等。捕获抗体和检测抗体分别针对p27蛋白不同的抗原决定簇;包被在酶标板的抗ALVp27蛋白单克隆抗体由杂交瘤细胞株ALVP27-5D3分泌获得,酶标记抗ALVp27蛋白单克隆抗体由杂交瘤细胞株ALVP27-4F12分泌获得。本发明试剂盒操作简便、快速,可以用于ALV所有亚群病毒的检测,适用于基层各级兽医部门和出入境禽白血病的快速大量筛选检测。该方法所需成本低廉,经济效益显著、应用前景广泛。

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