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公开(公告)号：CN112877246B
公开(公告)日：2022-01-18
申请号：CN202110200360.6
申请日：2021-02-23
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一种高效制备霍乱弧菌菌影的方法，包括：在霍乱弧菌工程菌的培养过程中加入阿拉伯糖进行诱导，诱导培养1～3h后，再次加入阿拉伯糖进行二次诱导：在诱导阶段，当检测到溶氧值突然下降时，添加卡那霉素，继续培养0.5～1.5h后活菌数目为0；诱导培养4～6h后，菌影形成率达到99％以上。本发明利用二次诱导策略，缩短诱导时间，收获菌影量提高了16％以上，且内毒素含量降低至初始工艺的1/5以下，显著提高了生产效率，降低生产成本；本发明制备的霍乱弧菌菌影形态均匀、完整，活菌数目为0，无需再进行灭活处理，安全性更高。
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公开(公告)号：CN113249378A
公开(公告)日：2021-08-13
申请号：CN202110759625.6
申请日：2021-07-05
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 英国佩布赖特动物健康研究所
IPC: C12N15/11 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12Q1/70 , C12Q1/6844
Abstract: 本发明公开了RPA特异性引物对、单链DNA、crRNA片段以及CRISPR‑Cas13a检测体系及其在制备ALV相关诊断产品和疫苗中的应用。本发明可以在37℃恒温条件下对目的核酸进行RPA扩增，对仪器设备要求低，扩增的目的片段转录为RNA后被特异性的crRNA识别，进而被Cas13a切割，Cas13a的“附带切割”活性可以切割体系中的RNA报告分子，本发明的RPA反应时间在30 min左右，SHERLOCK反应时间在40 min左右，总体的检测时间低于2 h；本发明配合侧流层析试纸条的应用将检测结果可视化能实现ALV‑A/B/J的快速检测和鉴别诊断。
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公开(公告)号：CN111647055B
公开(公告)日：2021-07-06
申请号：CN202010602999.2
申请日：2020-06-29
Applicant: 清源生物(深圳)有限公司 , 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 中山大学附属第七医院(深圳) , 滨州医学院附属医院 , 深圳明德生物技术有限公司
IPC: C07K14/165 , C12N15/50 , C12N15/70 , C12N1/21 , G01N33/569 , G01N33/68 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于免疫技术领域，具体涉及一种用于新型冠状病毒COVID‑19检测的重组抗原及其制备与应用。用于检测COVID‑19的重组抗原具体为一种截短的N蛋白，其氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示。本发明提供的用于检测COVID‑19的重组N蛋白为血清学检测COVID‑19提供了一种新的选择，采用SEQ ID NO.1所示的截短N蛋白检测COVID‑19具有敏感性高、特异性好，假阳性率明显降低等优点，其中，敏感性较全长N蛋白高出约60～100％，特异性达到98.57％，应用前景广泛。
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公开(公告)号：CN113046329A
公开(公告)日：2021-06-29
申请号：CN202011248670.7
申请日：2020-11-10
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明属于兽用生物制品技术领域，涉及一种猪繁殖与呼吸障碍综合征嵌合重组的PRRSV DIVA疫苗株cDY56的构建方法和应用。利用基因Ⅱ型经典毒株DY株作为亲本株，用高致病性PRRSV XZ株的ORF5和ORF6基因替换亲本株相应基因，构建嵌合重组PRRSV疫苗株cDY56。本发明的嵌合重组PRRSV毒株cDY56相对于目前商品化的疫苗，在诱导体液免疫和细胞免疫以及降低免疫抑制等方面具有更好的效果，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN112877479A
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN202110396251.6
申请日：2021-04-13
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明提供了一种猪伪狂犬活疫苗中外源病毒快速检测引物及其在试剂盒中的应用，该引物包括针对非洲猪瘟病毒的特异性引物Ⅰ、针对牛病毒性腹泻病毒的特异性引物Ⅱ和针对猪圆环病毒2型的特异性引物Ⅲ；将引物应用于试剂盒中，在一个反应体系中同时完成非洲猪瘟病毒(ASFV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和猪圆环病毒2型(PCV2)三种病原快速筛查检测；通过检测引物的设置，可提高检测ASFV、BVDV、PCV2三种病原的特异性、稳定性和灵敏度；该试剂盒在应用时，具有操作简单、检测时间短、且不受检测人员水平和实验室水平限制的优点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112575119A
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN202011162977.5
申请日：2020-10-27
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种快速检测禽白血病毒J亚群的RPA引物和探针、试剂盒及检测方法。该快速检测禽白血病毒J亚群的RPA引物的正向引物序列如SEQ ID No.1所示、反向引物序列如SEQ ID No.2所示；探针序列如SEQ ID No.3所示。本发明所建立的RPA方法可实现对ALV‑J亚群的快速检测，RPA检测限为10copies/μL；RPA仅特异性扩增禽白血病病毒J亚群GP85基因。采用本发明的引物和探针及检测方法具有优异的特异性、敏感性，简便、快速，实现了禽白血病毒J亚群现场快速检测；为禽白血病J亚群的临床快速检测提供了一种新的可靠的快速检测工具。
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公开(公告)号：CN112322613A
公开(公告)日：2021-02-05
申请号：CN202011191934.X
申请日：2020-10-30
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明适用于微生物技术领域，提供了一种核酸免提取试剂，包括如下组分：Chelex‑100、Triton X‑100、Tris‑Cl、NaCl和洋地黄皂苷；各组分中，Chelex‑100、Triton X‑100和洋地黄皂苷的质量浓度分别为0.8～1.2％、0.3～0.5％和1.3～1.7％，Tris‑Cl和NaCl的摩尔浓度分别为45～55mmol/L和80～120mmol/L；本发明还提供了核酸免提取试剂的使用方法。借此，本发明温度适应范围广，能够在较差的实验环境中进行样品处理和核酸提取，耗时短，效率高，使用便捷且生产成本低，具有较高的市场推广价值。
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公开(公告)号：CN111849990A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010770696.1
申请日：2020-08-03
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
IPC: C12N15/113 , C12N15/63 , C12N15/90 , C12N15/39 , C12N7/01 , C07K14/065 , C12Q1/70 , C12Q1/686 , G01N33/569 , A61K39/275 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一种gRNA，所述gRNA序列如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示，本发明还公开了重组质粒、ORF016基因缺失型山羊痘病毒株及其制备方法和应用。本发明首次通过基因敲除方法获得了ORF016基因缺失型山羊痘病毒株，该方法是首次将CRISPR技术在山羊痘病毒中进行应用，同时本发明采用了反向转染方法对ORF016基因进行了敲除，该方法的敲除效率达到了31.6%，远远高于现有技术中的敲除效率。同时，本发明所获得的SDLVDUORF016毒株是一株仅缺失ORF016的毒株，基因的缺失对其生长特性没有影响，该毒株可用于山羊痘疫苗、检测试剂、山羊痘病毒鉴定等用途。
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公开(公告)号：CN111848772A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010770180.7
申请日：2020-08-03
Applicant: 山东绿都生物科技有限公司 , 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明公开了SAMD9突变型蛋白，所述SAMD9突变型蛋白的氨基酸序列缺少第61~448位氨基酸。本发明还公开了编码该蛋白的基因、细胞系及其在制备山羊痘病毒疫苗中的应用。本发明还公开了SAMD9突变型蛋白的Vero细胞系的制备方法。本发明通过基因编辑技术敲除了Vero细胞SAMD9基因的AlbA_2结构域及其两侧序列，以降低Vero细胞的病毒抑制功能，获得的SAMD9突变型蛋白Vero细胞对山羊痘病毒具有更高的易感性，且遗传性状稳定，能够应用到山羊痘病毒等病毒疫苗生产中，替代原代细胞疫苗生产工艺，大幅度降低生产成本，并提高疫苗的安全性。
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公开(公告)号：CN109964876A
公开(公告)日：2019-07-05
申请号：CN201910377776.8
申请日：2019-05-04
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明涉及一种林下肉鸡的养殖方法，其方法为：选择成片树林，地势高燥，背风向阳，水源充足，排水条件好，树林周边设置围栏，防止鸡丢失，雏鸡的投放量为每亩50‑60只；在树林中央或选择坐北朝南适当位置建设鸡舍与管理设施，每2‑3亩地建一个鸡舍，鸡舍面积为50‑55平米，鸡白天放入树林中觅食饲养，晚上赶入鸡舍；在树林中每亩地设2‑3个食槽，投放饲喂料供鸡自由采食；早春及冬天要注意防寒保暖，夏季注意防暑降温。经本发明人试验研究证明，使用本发明的养殖方法及饲喂料对肉鸡的投喂，不仅能够提高肉鸡的免疫力，减少疾病的发生，既能节省饲料，又可减少投药量和降低养殖成本，提高了肉鸡的品质。
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