公开(公告)号：CN112575119A

公开(公告)日：2021-03-30

申请号：CN202011162977.5

申请日：2020-10-27

Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 ,  山东农业大学

Inventor： 曲光刚 ,  沈志强 ,  李芸 ,  姚永秀 ,  苗立中 ,  唐娜 ,  成子强

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种快速检测禽白血病毒J亚群的RPA引物和探针、试剂盒及检测方法。该快速检测禽白血病毒J亚群的RPA引物的正向引物序列如SEQ ID No.1所示、反向引物序列如SEQ ID No.2所示；探针序列如SEQ ID No.3所示。本发明所建立的RPA方法可实现对ALV‑J亚群的快速检测，RPA检测限为10copies/μL；RPA仅特异性扩增禽白血病病毒J亚群GP85基因。采用本发明的引物和探针及检测方法具有优异的特异性、敏感性，简便、快速，实现了禽白血病毒J亚群现场快速检测；为禽白血病J亚群的临床快速检测提供了一种新的可靠的快速检测工具。

公开(公告)号：CN113249378A

公开(公告)日：2021-08-13

申请号：CN202110759625.6

申请日：2021-07-05

Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 ,  英国佩布赖特动物健康研究所

Inventor： 徐晴晴 ,  姚永秀 ,  维诺·奈尔 ,  沈志强

IPC: C12N15/11 ,  C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/6844

Abstract: 本发明公开了RPA特异性引物对、单链DNA、crRNA片段以及CRISPR‑Cas13a检测体系及其在制备ALV相关诊断产品和疫苗中的应用。本发明可以在37℃恒温条件下对目的核酸进行RPA扩增，对仪器设备要求低，扩增的目的片段转录为RNA后被特异性的crRNA识别，进而被Cas13a切割，Cas13a的“附带切割”活性可以切割体系中的RNA报告分子，本发明的RPA反应时间在30 min左右，SHERLOCK反应时间在40 min左右，总体的检测时间低于2 h；本发明配合侧流层析试纸条的应用将检测结果可视化能实现ALV‑A/B/J的快速检测和鉴别诊断。

公开(公告)号：CN113249527A

公开(公告)日：2021-08-13

申请号：CN202110759624.1

申请日：2021-07-05

Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 ,  英国佩布赖特动物健康研究所

Inventor： 徐晴晴 ,  姚永秀 ,  维诺·奈尔 ,  沈志强

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12N15/113 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了检测禽网状内皮组织增生症病毒的RPA特异性引物对及其应用。本发明可以在37℃恒温条件下对目的核酸gp90基因进行RPA扩增，对仪器设备要求低，扩增的目的片段转录为RNA后被特异性的crRNA识别，进而被Cas13a切割，Cas13a的“附带切割”活性可以切割体系中的RNA报告分子，本发明的RPA反应时间在30 min左右，SHERLOCK反应时间在40 min左右，总体的检测时间低于2h；本发明配合侧流层析试纸条的应用将检测结果可视化能实现REV的快速检测和鉴别诊断。

公开(公告)号：CN1117974A

公开(公告)日：1996-03-06

申请号：CN95110458.6

申请日：1995-05-19

Applicant: 山东农业大学

Inventor： 柴家前 ,  陈鑫磊 ,  姚永秀 ,  张绍学 ,  牛钟相

IPC: C07K16/02 ,  C07K1/14

Abstract: 本发明提供了一种提取卵黄中抗体的新方法。该方法是将高免卵黄用磷酸盐缓冲液等稀释液稀释(卵黄∶稀释液＝1∶3-6)，加入0.3-1.2％甲醛溶液(含37％甲醛)，混匀，置于-10℃以下温度，经4-10小时冻结，然后快速解冻，将固形物去除，收集液体，即为富含抗体的提取物。本发明工艺简单可行。按本发明提取的抗体，纯度高，收获率高，活性强，注射于动物体内易吸收，防治效果良好。因此，该方法易于推广应用。