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公开(公告)号：CN107746890B
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN201711229375.5
申请日：2017-11-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了鉴定单增李斯特菌血清型的多重PCR检测引物及方法，属于生物技术领域。所述引物分别为单增李斯特菌种上下游引物、1/2a血清型上下游引物、1/2b血清型上下游引物、1/2c血清型上下游引物和4b血清型上下游引物；所述检测方法采用上述5对引物，分别以单增李斯特菌1/2a血清型DNA、1/2b血清型DNA、1/2c血清型DNA和4b血清型DNA为模板进行多重PCR扩增反应，并将PCR扩增产物进行电泳检测，验证引物的特异性。本发明仅需要常规仪器，通过单次PCR扩增反应即可鉴定单增李斯特菌4种主要血清型，此检测方法具有特异性强、检测灵敏度高、抗干扰性强等特点。
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公开(公告)号：CN112301139A
公开(公告)日：2021-02-02
申请号：CN202011284156.9
申请日：2020-11-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种检测大肠杆菌O157:H7的特异性靶点、引物、检测方法及应用。本发明的新型靶点，与常规检测靶点相比具有较好的特异性，降低了检测中假阳性的产生；本发明中采用Eva Green第三代饱和荧光染料，该染料具有较高的荧光信号值，提高了检测的灵敏度。同时，该染料即使在高浓度使用时，也为表现出PCR的抑制效果，大幅了检测时熔解曲线的分辨率，进而改善了本发明的检测准确性；检测方法便捷，方便观察，且无需繁琐的电泳操作，检测时间缩短在12h以内；检测过程不涉及抗体，检测成本低，可满足一般实验室的检测需求。
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公开(公告)号：CN106834311B
公开(公告)日：2020-11-06
申请号：CN201710052445.8
申请日：2017-01-24
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种酸性脂肪氧合酶及其制备方法与应用。本发明从Myxococcus xanthus DK1622菌株基因组中，克隆并获得一种脂肪氧合酶基因MxLOX，其氨基酸序列为SEQ ID NO.2。该酶在pH3.0,30℃条件下活性最高，pH2.5‑5.0，30℃条件下活性稳定。重组脂肪氧合酶rMxLOX可高效地催化三苯甲烷类染料苯胺蓝、甲基蓝的降解，在酸性工业废水的处理中具有潜在的应用价值。
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公开(公告)号：CN105754917B
公开(公告)日：2019-07-30
申请号：CN201610010187.2
申请日：2016-01-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种Plipastatin衍生环五脂肽及其产生菌和应用。产Plipastatin衍生环五脂肽的枯草芽孢杆菌Best2，通过同源重组的方法靶向缺失枯草芽孢杆菌pB2‑L基因组中的ppsC和ppsD基因，获得缺失ppsC和ppsD基因的枯草芽孢杆菌Best2。在改良的Landy培养基中对枯草芽孢杆菌Best2进行发酵，获得含Plipastatin衍生环五脂肽的发酵液，对发酵液进行分离纯化，获得含Plipastatin衍生环五脂肽粗提物。该新型的plipastatin衍生环五脂肽不仅对丝状真菌仍然具有一定的抑菌活性，并且对革兰氏阳性菌的抑菌活性有所提高。
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![一种新型抗菌脂肽[△Leu3]Surfactin、制备方法及应用](/CN/2015/1/30/images/201510150563.jpg)
公开(公告)号：CN104725477B
公开(公告)日：2019-07-23
申请号：CN201510150563.3
申请日：2015-03-31
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于微生物发酵生产领域，提供一种新型抗菌脂肽，命名为[ΔLeu3]Surfactin，共有3种组分，包括C13的抗菌脂肽类化合物1、包括C14的抗菌脂肽类化合物2、包括C15的抗菌脂肽类化合物3，分子量分别为909、923、937Da。本发明还提供产该抗菌脂肽工程菌枯草芽孢杆菌LS1菌株的构建方法及该抗菌脂肽的制备过程和应用。[ΔLeu3]Surfactin是一种新型surfactin类抗菌脂肽，相比于surfactin其具有较弱的溶血活性，但对短小芽孢杆菌、藤黄微球菌、蜡状芽孢杆菌都有抑制作用，能够防治多种植物病害，其毒性较低，在生物防治、食品加工和农产品贮藏保鲜等方面具有应用潜力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105695543B
公开(公告)日：2019-06-04
申请号：CN201610046208.6
申请日：2016-01-22
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种生物表面活性素的生产方法，将解淀粉芽孢杆菌fmb50先后接种于PDA斜面培养基进行培养，培养后再接种于BPY种子培养基继续培养，最后再接种于发酵培养基培养后得到含有生物表面活性素的培养液；然后将培养液加水稀释后调节pH，再通过加入壳聚糖、海藻酸钠和硅藻土进行絮凝后过滤；最后将滤饼使用低级醇溶解提取后过滤，将滤液减压蒸馏得到生物表面活性素粗品。本发明提供的生物表面活性素的生产方法能够实现工业化制备生物表面活性素，并且制备得到的生物表面活性素纯度高，有效弥补了目前生物表面活性素不能大规模生产的不足。
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公开(公告)号：CN109022474A
公开(公告)日：2018-12-18
申请号：CN201811024407.2
申请日：2018-09-04
Applicant: 南京农业大学 , 南京福斯弗瑞生物科技有限公司
Abstract: 本发明涉及通过过表达spo0A基因提高抗真菌肽bacillomycin D产量的方法，属于生物技术领域。本方法首先以CGMCC No.0943枯草芽孢杆菌fmbJ为出发菌株，以大肠杆菌‑枯草芽孢杆菌穿梭克隆载体pMAD为骨架构建一个基因过表达载体pCBS‑LPSpo0AR，利用同源重组原理，通过双交换过程在淀粉酶位点敲入枯草芽孢杆菌fmbJ基因组Spo0A基因的方法构建了一个高产bacillomycin D菌株fmbJspo0A。经过高效液相色谱分析，确定改良菌株产bacillomycin D的能力提高1.82倍。
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公开(公告)号：CN108713585A
公开(公告)日：2018-10-30
申请号：CN201810439061.6
申请日：2018-05-09
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及了一种淡水鱼复合保鲜剂及保鲜方法。所述复合保鲜剂包括细菌素粗提物、抗菌脂肽粗提物、百里酚和水。本发明针对淡水鱼中的主要腐败菌群而研制的绿色复合保鲜剂，具有无毒、抗菌谱广和抗菌性强等特点，适用于淡水鱼防腐保鲜，使用方法简单，生产成本低，可有效延长淡水鱼货架期达9 d，提高了冷藏保鲜鱼品质和贮藏稳定性，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN107988245A
公开(公告)日：2018-05-04
申请号：CN201711013192.X
申请日：2017-10-25
Applicant: 南京福斯弗瑞生物科技有限公司 , 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种密码子优化的普鲁兰酶及其表达载体与构建方法。它是以枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis168）密码子偏好性为基础，参考耐酸普鲁兰杆菌（Bacillus acidpullulyticus）普鲁兰酶基因，设计碱基序列，通过自主复制性质粒和整合型质粒的方法在枯草芽孢杆菌中表达。本发明还对表达框的启动子、mRNA稳定序列、信号肽以及它们的组合进行选择，得到一种能够在枯草芽孢杆菌中高效分泌表达的组合。并实现了工业化生产同时提高了酶活稳定性。
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公开(公告)号：CN107904198A
公开(公告)日：2018-04-13
申请号：CN201711121738.3
申请日：2017-11-14
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种高产杆菌肽A的地衣芽孢杆菌基因改组菌株及应用。本发明采取了育种新技术中的等离子体诱变技术，与传统物理、化学诱变方法相结合，并采用基因组改组技术，效果明显，产量提高显著。本发明提供的用于杆菌肽A高效发酵生产的基因改组菌株F2-X1，降低了以地衣芽孢杆菌为发酵菌株，生产杆菌肽的成本。而且产量提高明显，经所述条件发酵后，杆菌肽A产量可达到1.7g/L,适用于大规模发酵生产杆菌肽A。本发明提供的以HPLC检测方法简单准确，是用于快速准确检测杆菌肽A产量。
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