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公开(公告)号:CN102127560A
公开(公告)日:2011-07-20
申请号:CN201010581407.X
申请日:2010-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提出了一种源自宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001菌株的新型β-1,4-内切木聚糖酶基因完整mRNA和DNA序列的克隆和分析方法,其核苷酸序列分别为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2。生物信息学分析表明该β-1,4-内切木聚糖酶是在A.usamii E001中发现的第四种11家族的木聚糖酶,所以命名为Aus Xyn11D,其氨基酸序列为SEQ ID NO:3,相应的基因命名为Aus xyn11D。这为该基因的异源表达和工业化生产奠定了理论基础,有较大的工业化生产和应用潜力及经济价值,也为其它β-1,4-内切木聚糖酶的研究奠定了理论基础。
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公开(公告)号:CN102127557A
公开(公告)日:2011-07-20
申请号:CN201010581355.6
申请日:2010-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提出了一种源自宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001菌株的新型β-1,4-内切木聚糖酶基因完整mRNA和DNA序列的克隆方法,其核苷酸序列分别为SEQ ID NO:1和SEQ IDNO:2。生物信息学分析表明该木聚糖酶属于糖苷水解酶第11家族,命名为Aus Xyn11A,其氨基酸序列为SEQ ID NO:3,相应的基因命名为Aus xyn11A。本发明还公开了Aus Xyn11A工程菌的构建以及重组Aus Xyn11A的高效表达和纯化的方法,制备的重组Aus Xyn11A的最适作用温度和pH分别为50℃和5.0,在pH 3.0-7.0、50℃以下稳定,具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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公开(公告)号:CN101570579A
公开(公告)日:2009-11-04
申请号:CN200910032934.2
申请日:2009-06-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明属生物工程技术领域,具体涉及一种具有免疫增强活性的茶树菇胞外粗多糖的制备方法。该茶树菇胞外粗多糖为淡黄色粉末,是茶树菇通过深层发酵获得的发酵液经过浓缩,醇沉,脱蛋白,透析后冷冻干燥得到的。制备该多糖的发酵液所含氨基酸中谷氨酸占18%以上,天冬氨酸占12%以上,甘氨酸占8%以上,赖氨酸占7%以上,丙氨酸占6%以上。该粗多糖所含单糖以葡萄糖为主,用苯酚-硫酸法测得多糖含量为76.3%。具有免疫增强活性,可应用于制备具有增强免疫力,抗疲劳功能的保健品。
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公开(公告)号:CN101067130A
公开(公告)日:2007-11-07
申请号:CN200710022406.X
申请日:2007-05-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种利用黑曲霉生产β-甘露聚糖酶的方法,属于酶工程技术领域。本发明采用麸皮、玉米粉和菜籽饼粉等农副产品为基料,并添加适量的魔芋粉、玉米浆、无机盐和自来水等,利用黑曲霉(Aspergillus niger)WA9024菌株固态发酵生产β-甘露聚糖酶,提供了小试生产和产业化生产的发酵培养基配方和发酵条件,小试生产成熟发酵曲的β-甘露聚糖酶活性达18912~22185IU/g干曲,比WA9024菌株原小试生产固态发酵的酶活性(8984IU/g干曲)提高了2.11~2.47倍,高于目前国内水平;产业化生产产品酶活性为12678~15921IU/g干曲。本发明用廉价的麸皮、玉米粉和菜籽饼粉等为发酵主原料,是一种充分利用自然界可再生资源,又是一种绿色环保且可持续的生产方法。
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公开(公告)号:CN108559734B
公开(公告)日:2020-09-04
申请号:CN201810033895.7
申请日:2018-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的L‑乳酸脱氢酶突变体及其应用,属于基因工程技术领域。本发明在L‑乳酸脱氢酶基础上,通过定点突变生物技术改造L‑乳酸脱氢酶分子结构,得到一株L‑乳酸脱氢酶大肠杆菌工程菌,突变酶比酶活提高5.2倍,催化活性提高3.8倍。本发明解决了L‑乳酸脱氢酶催化活性低的限制性问题,为L‑乳酸脱氢酶分子改造提供了一条新的思路。
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公开(公告)号:CN108034644B
公开(公告)日:2020-03-06
申请号:CN201810033897.6
申请日:2018-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的L‑乳酸脱氢酶突变体及其构建方法,属于基因工程技术领域。本发明在L‑乳酸脱氢酶基础上,通过定点突变生物技术改造L‑乳酸脱氢酶分子结构,得到一株L‑乳酸脱氢酶大肠杆菌工程菌,突变酶比酶活提高6.1倍,催化活性提高4.2倍。本发明解决了L‑乳酸脱氢酶催化活性低的限制性问题,为L‑乳酸脱氢酶分子改造提供了一条新的思路。
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公开(公告)号:CN105969837B
公开(公告)日:2019-12-24
申请号:CN201610535106.0
申请日:2016-07-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种酶法制备(S)‑环氧苯乙烷的方法,属于生物催化技术领域。本发明在正己醇/缓冲液的双相体系中,利用来源于宇佐美曲霉的环氧化物水解酶催化外消旋环氧苯乙烷的水解动力学拆分,制备(S)‑环氧苯乙烷的方法;与单相反应体系相比,动力学拆分rac‑SO的浓度从24g/L提高至120g/L;时空产率从为3.1g/L/h提高至20.3g/L/h;动力学拆分120g/Lrac‑SO制备(S)‑SO的ee值从36.8%提高至98.3%,并实现了(S)‑SO的克级制备。本发明方法工艺简单、产物的对映体纯度和得率高、催化效率高和环境友好,具有较大工业化应用前景。
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公开(公告)号:CN110484495A
公开(公告)日:2019-11-22
申请号:CN201910783787.6
申请日:2019-08-23
Applicant: 江南大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明涉及一种从老年人体滑膜关节软骨分离培养细胞的方法,属于人体组织工程技术领域。其从老年关节软骨中获取大量且具有代谢活性的细胞,应用于临床自体软骨细胞移植修复软骨组织缺损和软骨退行性病变的分子病理与生物治疗基础研究。本发明所阐述的软骨细胞分离方法,结合机械切割与酶解软骨组织,在高温高压灭菌的组织分解瓶(Spinner flask)和细胞培养箱中,使软骨碎片与可降解软骨细胞外基质蛋白特异蛋白酶充分接触,达到完全溶解基质最大程度释放软骨细胞的目的。本发明相较于现有的人负重滑膜关节软骨细胞分离方法,软骨细胞的产量更高,活软骨细胞的比例更大,污染几率更低。
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公开(公告)号:CN106047834B
公开(公告)日:2019-11-08
申请号:CN201610534898.X
申请日:2016-07-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种对映选择性提高的宇佐美曲霉环氧化物水解酶突变体,属于酶工程和生物催化技术领域。本发明基于理性设计对宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)环氧化物水解酶(AuEH2)进行分子改造,结合基因的定点饱和突变方法,获得多个对映选择性提高的环氧化物水解酶突变体。本发明获得的6个对映选择性提高的突变体:AuEH2A250I、AuEH2A250M、AuEH2A250Y、AuEH2A250S、AuEH2A250L和AuEH2A250V催化外消旋环氧苯乙烷(rac‑SO)的对映体比率(E值)相比野生型,从16分别提高至48、27.2、23.9、21.8、20.0和19.4。
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公开(公告)号:CN106244637B
公开(公告)日:2019-05-17
申请号:CN201610926649.5
申请日:2016-10-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种双酶催化外消旋环氧苯乙烷制备(R)‑苯乙二醇的方法,属于生物催化技术领域。本发明以外消旋环氧苯乙烷(rac‑SO)为底物,以双环氧化物水解酶:环氧化物水解酶突变体AuEH2A250I和环氧化物水解酶VrEH3对映归一性水解外消旋环氧苯乙烷(rac‑SO)制备高对映纯产物(R)‑苯乙二醇(PED)。本发明是首次把来源于绿豆的VrEH3和来源于宇佐美曲霉的AuEH2A250I结合对映归一性水解rac‑SO。催化10mM rac‑SO制备(R)‑PED的ee值为96.0%。具有适合于工业应用的理想特性,本发明为该酶的产业化生产奠定了理论基础,有较大的工业化应用潜力及经济价值。
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