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公开(公告)号:CN104726498A
公开(公告)日:2015-06-24
申请号:CN201510153415.7
申请日:2015-04-02
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/867
Abstract: 本发明涉及一种基于J亚群禽白血病病毒LTR的线性化真核表达载体的构建及应用。本发明是SEQ ID NO.1和2的序列为引物,以JSNT毒株为模板,进行PCR扩增得ALV-J病毒LTR线性化载体;本发明不仅可用于研究ALV-J或其它反转录病毒的复制、转译、致病等机制;而且能实现对外源基因的快速克隆、高效表达。
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公开(公告)号:CN104450695A
公开(公告)日:2015-03-25
申请号:CN201410704520.0
申请日:2014-11-26
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种流感病毒基因克隆方法,具体涉及A型流感病毒基因PCR扩增引物及A型流感病毒基因快速克隆方法。本发明提供了A型流感病毒8个基因片段的PCR扩增引物和流感病毒反向遗传线性化载体的引物。本发明还提供了A型流感病毒基因快速克隆方法,用上述引物通过PCR反应即聚合酶链式反应扩增出流感病毒基因片段以及线性化的流感病毒反向遗传载体,然后利用重组酶将上述线流感病毒各基因片段以及线性化的流感病毒反向遗传载体在体外重组克隆,并转化到大肠杆菌进行克隆。本发明的大大简化了传统的流感病毒反向遗传技术中的基因克隆过程,解决传统的流感病毒反向遗传技术中流感病毒基因的克隆过程复杂、效率不高的问题。
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公开(公告)号:CN119101660A
公开(公告)日:2024-12-10
申请号:CN202410802456.3
申请日:2024-06-20
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , C07K14/075 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种识别高致病性血清4型禽腺病毒Hexon蛋白第188位氨基酸的杂交瘤细胞株、单克隆抗体及其应用,该细胞株2C5的保藏编号为CGMCC NO.45829,并分泌一种特异性识别高致病性血清4型禽腺病毒六邻体Hexon蛋白单克隆抗体2C5,其识别的抗原表位的氨基酸序列为Hexon蛋白GPGRNP,其中Hexon蛋白中R188氨基酸是其识别的关键氨基酸。本发明制备的单抗2C5具有高致病性FAdV‑4的特异性,能够特异性识别高致病性FAdV‑4,而与非致病性FAdV‑4和其他血清型的FAdV没有交叉反应,可作为诊断试剂应用于区分高致病性FAdV‑4和非致病性FAdV‑4。
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公开(公告)号:CN118994330A
公开(公告)日:2024-11-22
申请号:CN202410908628.5
申请日:2024-07-08
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/15 , C12N15/866 , C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种具有竞争活性的抗牛白血病病毒gp51蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用,包括,所述抗牛白血病病毒gp51真核重组蛋白的核酸序列如SEQ ID NO.1所示,氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,本发明采用杆状病毒表达系统制备了真核重组gp51蛋白,该系统表达的重组gp51蛋白能够正确折叠和翻译后修饰,并具有生物活性。利用真核重组gp51蛋白作为免疫原免疫小鼠,采用细胞融合技术制备抗gp51蛋白的单克隆抗体。制备的单抗能够用于建立检测gp51抗体的阻断ELISA,为BLV的诊断提供一种简单、可靠的验证方法。
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公开(公告)号:CN118185885A
公开(公告)日:2024-06-14
申请号:CN202410361207.5
申请日:2024-03-27
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种基于CRISPR‑Cas9技术构建的表达H3N8禽流感病毒HA蛋白的重组血清4型禽腺病毒及其构建方法,H3N8禽流感病毒HA蛋白,其序列如SEQ ID NO.1所示;重组血清4型禽腺病毒,其中使用H3N8禽流感病毒HA基因替换血清4型禽腺病毒Fiber‑2基因,替换的是血清4型禽腺病毒Fiber‑2基因的253位核苷酸到1440位核苷酸。本发明利用当下流行的血清4型禽腺病毒作为载体插入H3N8禽流感病毒HA基因,成功获得了表达H3N8禽流感病毒HA蛋白的重组血清4型禽腺病毒,此重组病毒可作为免疫防控H3N8以及血清4型腺病毒的二联疫苗候选株。
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公开(公告)号:CN115820638A
公开(公告)日:2023-03-21
申请号:CN202211207679.2
申请日:2022-09-30
Applicant: 扬州大学
Inventor: 金文杰 , 钱金涵 , 朱亭帆 , 秦爱建 , 邵红霞 , 羊扬 , 闫彩虹 , 叶建强 , 钱琨 , 王倩倩 , 邓建中 , 王建 , 郑建高 , 金松 , 洪枫 , 王培永 , 张文成 , 卞红春
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , A61K31/713 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种抑制水禽源禽呼肠孤病毒复制的外源性人工miRNA及其应用,涉及基因工程技术领域。本发明提供了一种抑制水禽源禽呼肠孤病毒复制的外源性人工miRNA,是针对水禽源ARV的L2基因保守序列设计得到。经试验证实可知,所述外源性人工miRNA不仅能够抑制水禽源禽呼肠孤病毒复制及增殖,而且能够作为一种新的基因治疗手段,应用于抗水禽源禽呼肠孤病毒新型药物的研制,同时也可以用于水禽源禽呼肠孤病毒致病机制的研究以及转基因动物的制备,从而减少水禽源禽呼肠孤病毒对养禽业造成的经济损失。
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公开(公告)号:CN113354717B
公开(公告)日:2022-04-08
申请号:CN202110631147.0
申请日:2021-06-07
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/165 , C07K19/00 , C12N15/50 , C12N15/70 , C07K16/10 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种新冠病毒SARS‑CoV‑2广谱多肽抗原及其特异性中和抗体和应用,属于病毒免疫检测技术领域。一种新冠病毒SARS‑CoV‑2广谱多肽抗原,氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,与SARS‑CoV‑2人阳性血清的反应,能够特异性与新冠病毒抗体结合。基于本发明的多肽序列,利用PCR、原核表达及蛋白纯化技术,制备了三重SARS‑CoV‑2广谱多肽串联融合蛋白,模拟SARS‑CoV‑2S蛋白自然状态下三聚体模式,以该融合蛋白作为抗原免疫小鼠,可以产生抗SARS‑CoV‑2特异性中和抗体,所述中和抗体在SARS‑CoV‑2抗感染治疗、疫苗研发和检测试剂盒研制中将具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN113981137A
公开(公告)日:2022-01-28
申请号:CN202110084845.3
申请日:2021-01-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种检测非洲猪瘟病毒的荧光定量PCR试剂盒及应用。所述荧光定量PCR试剂盒中含有SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的引物,荧光定量PCR反应试剂,以及标准品和和对照品。本发明的荧光定量PCR试剂盒可以对非洲猪瘟病毒进行检测,该试剂盒的特异性强,只与非洲猪瘟病毒特异性结合,与其他猪源病毒没有交叉反应;而且检测的灵敏度高,在标准品为1×101~1×108拷贝范围内都有极好的线性关系,可以高效检测非洲猪瘟病毒病猪棉拭子以及无临床症状的病毒携带猪,提高了检测效率。
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公开(公告)号:CN113201561A
公开(公告)日:2021-08-03
申请号:CN202110497755.7
申请日:2021-05-08
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及到一种精确敲除鸡NHE1基因W38位氨基酸的细胞系构建方法,本发明的原理和最核心的关键技术是科学合理的构建了靶向鸡NHE1基因W38位氨基酸的sgRNA,之后转染带有sgRNA和Cas9基因的lentiCRISPR v2质粒,利用CRISPR‑Cas9系统达到基因位点的精确敲除,通过药物筛选及亚克隆的方法获得单克隆细胞株,从而获得鸡源NHE1基因W38位敲除的细胞系。
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公开(公告)号:CN113061586A
公开(公告)日:2021-07-02
申请号:CN202110332476.5
申请日:2021-03-29
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/861 , C12N15/113 , C12N15/34 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及表达血清8型禽腺病毒纤突蛋白重组血清4型禽腺病毒及其制备方法,发明的原理和最核心的关键技术是利用sgRNA,替换EGFP后进行病毒纯化,获得可以稳定扩增血清8型禽腺病的纤突蛋白的重组禽腺病毒。利用当下流行的血清4型禽腺病毒作为载体插入的血清8型禽腺病毒纤突蛋白基因F,成功获得了表达血清8型禽腺病毒纤突蛋白的重组FAdV‑4,在体外实验结果显示,FAdV4‑F1‑F‑F2重组病毒与FAdV‑4野毒的复制能力几乎相同,可作为防控FAdV‑4和FAdV‑8的灭活重组多价苗。
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