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公开(公告)号：CN112501096B
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202011421568.2
申请日：2020-12-08
Applicant: 南开大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C07K14/245 , A61K39/108 , A61P31/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一组肠道外致病大肠杆菌糖蛋白结合疫苗的基因工程大肠杆菌的构建及应用。基于CRISPR‑cas9删除E.coli K‑12 MG1655菌株中zwf、pfkB、lacZ、manA和pykA基因，构建能够协同利用葡萄糖和甘油的菌株，分别用于合成O抗原多糖和维持细菌生理代谢；进一步删除waaL、肠杆科共有抗原（ECA）和O16基因簇，构建底盘细胞为OSLA。分别导入O5和O7抗原合成基因簇，同时导入表达糖基转移酶以及载体蛋白，合成各血清型糖蛋白结合疫苗。纯化的糖蛋白经过动物免疫实验证实能够刺激小鼠产生具有保护性作用的抗体，保护率可以达到90%以上。本发明构建的重组大肠杆菌糖蛋白结合疫苗为抗肠道外致病大肠杆菌感染的免疫治疗提供了新的选择。
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公开(公告)号：CN112375833A
公开(公告)日：2021-02-19
申请号：CN202011316948.X
申请日：2020-11-23
Applicant: 南开大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/10 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及一种对阪崎肠杆菌O1‑O7血清型O抗原分型的环介导等温扩增（LAMP）检测方法。本发明以阪崎肠杆菌O1‑O7的O抗原基因簇内的特异基因，即wzx和wzy为靶基因，设计并筛选了对阪崎肠杆菌O1‑O7的O抗原分型的各自四条引物，并建立了一种环介导等温扩增（LAMP）反应体系。为食品，特别是婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的检测和血清学分型提供了相应技术。利用本发明的LAMP体系检测阪崎肠杆菌，并且对其进行血清学分型，具有操作简便和快速高效的优点。
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公开(公告)号：CN111876500A
公开(公告)日：2020-11-03
申请号：CN202010649559.2
申请日：2020-07-08
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明涉及对杨葛氏柠檬酸杆菌（Citrobacter youngae）O4血清型及沃克曼氏柠檬酸杆菌（Citrobacter werkmanii）O24血清型的O抗原使用基于MGB探针的实时荧光TaqMan聚合酶链式反应快速检测体系进行分析。以柠檬酸杆菌O抗原基因簇内的特异基因，设计并筛选了用于杨葛氏柠檬酸杆菌及沃克曼氏柠檬酸杆菌的O抗原分型的引物及MGB探针，为在水、土壤、食物和人或动物肠道中柠檬酸杆菌的O抗原分型提供一条可信的途径。利用本发明的MGB探针来检测水、土壤、食物和人或动物肠道中的柠檬酸杆菌，并且对其进行O抗原分型，具有高灵敏度、高特异性及快速检测等诸多优点。
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公开(公告)号：CN111748641A
公开(公告)日：2020-10-09
申请号：CN202010649557.3
申请日：2020-07-08
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明涉及对普罗威登斯菌（Providencia）O19、O20、O28、O30、O31、O36血清型的O抗原使用基于MGB探针的实时荧光TaqMan聚合酶链式反应快速检测体系进行分析。本发明以普罗威登斯菌O抗原基因簇特异基因为靶基因，设计并筛选了用于普罗威登斯菌的O抗原分型的引物及MGB探针，并建立了相应的实时荧光PCR（RT-PCR）检测方法，为利用分子生物学手段对亲水气单胞菌的O抗原分型提供一条可信的途径。利用本发明的MGB探针检测大便、尿道感染、伤口、烧伤和菌血症标本中的普罗威登斯菌，并且对其进行O抗原分型，具有高灵敏度、高特异性及快速检测等诸多优点。
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公开(公告)号：CN111690723A
公开(公告)日：2020-09-22
申请号：CN202010649398.7
申请日：2020-07-08
Applicant: 南开大学
IPC: C12Q1/6844 , C12Q1/689 , C12Q1/04 , C12R1/01
Abstract: 本发明涉及一种对斯氏普罗威登斯菌O33血清型O抗原分子分型的检测方法。本发明以斯氏普罗威登斯菌O33的O抗原基因簇内的特异基因为靶基因，设计并筛选用于斯氏普罗威登斯菌O33的O抗原分型的四条引物，并建立了相应的LAMP检测方法，为斯氏普罗威登斯菌的O33抗原分型提供一条可信的途径。利用本发明的LAMP引物检测腹泻大便、尿道感染、伤口、烧伤和菌血症标本的斯氏普罗威登斯菌，并且对其进行O抗原分型，具有操作简单、快速高效、高灵敏度等诸多优点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106190938B
公开(公告)日：2019-05-14
申请号：CN201610562413.8
申请日：2016-07-18
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明公开了一种构建的重组大肠杆菌及生物合成3'‑唾液乳糖的方法，其名称为E.coli‑XYY，它具有3'‑唾液乳糖的合成途径，同时也公开了构建的方法。本发明同时克服了现有的技术难题，获得了一个高效的基因敲除方案；原始菌株在通过基因工程改造以后，除了生产3'‑唾液乳糖外，没有改变菌株的其它特性，不影响发酵生产；该菌株采用的质粒为成熟的大肠杆菌质粒，因此在代谢过程中不影响细菌生长和正常代谢。本发明构建的重组大肠杆菌具有很好的应用前景，为生物法生成3'‑唾液乳糖提供了新的思路。
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公开(公告)号：CN105331693B
公开(公告)日：2019-05-14
申请号：CN201510735337.1
申请日：2015-11-03
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明涉及一种对8种类志贺邻单胞菌（Plesiomonas shigelloides，P.S）的O抗原进行分型的液相芯片及其制备方法。本发明还涉及利用所述的基因液相芯片进行O抗原分型的方法。本发明以类志贺邻单胞菌O抗原基因簇内的特异基因，包括Wzx，Wzy等为靶基因，建立了对8种类志贺邻单胞菌的O抗原分型液相芯片和分型方法，为肠道及水环境中类志贺邻单胞菌的O抗原分型提供一条可信的途径。利用本发明的基因芯片检测肠道及水环境中的类志贺邻单胞菌，并且对其进行O抗原分型，具有特异性强、灵敏度高、重复性好等诸多优点。
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公开(公告)号：CN105256043B
公开(公告)日：2018-10-26
申请号：CN201510730650.6
申请日：2015-11-02
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明涉及一种对亲水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)O抗原特异的核苷酸及其应用，所述核苷酸包括1）SEQ ID NO:1‑8所示的核苷酸中的至少一种；2）与SEQ ID NO:1‑8所示的核苷酸互补的核苷酸中的至少一种。这些核苷酸可用于制备检测亲水气单胞菌用PCR试剂盒和基因芯片。本发明的对亲水气单胞菌O抗原特异的核苷酸及包含该核苷酸的PCR试剂盒、基因芯片的实用性强，PCR试剂盒配制方法简便，检测周期短、速度快，可操作性强，易于产业化生产，而检测成本却相对较低；准确性高；灵敏度高。
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公开(公告)号：CN105177133B
公开(公告)日：2018-08-17
申请号：CN201510562605.4
申请日：2015-09-07
Applicant: 南开大学
CPC classification number: Y02A50/52
Abstract: 本发明涉及一种对霍乱弧菌(Vibro cholerae)O抗原特异的核苷酸及其应用，所述核苷酸包括1）SEQ ID NO:1‑8所示的核苷酸中的至少一种；2）与SEQ ID NO:1‑8所示的核苷酸互补的核苷酸中的至少一种。这些核苷酸可用于制备检测霍乱弧菌用PCR试剂盒和基因芯片。本发明的对霍乱弧菌O抗原特异的核苷酸及包含该核苷酸的PCR试剂盒、基因芯片的实用性强，PCR试剂盒配制方法简便，检测周期短、速度快，可操作性强，易于产业化生产，而检测成本却相对较低；准确性高；灵敏度高。
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公开(公告)号：CN106701647A
公开(公告)日：2017-05-24
申请号：CN201610851779.7
申请日：2016-09-27
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明公开了绞股蓝糖基转移酶在合成稀有人参皂苷中的应用。所述的绞股蓝糖基转移酶，可以催化原人参二醇合成稀有人参皂苷CK。其名称为UGTGp5。本发明同时也公开了合成稀有人参皂苷CK的方法与应用。本发明通过将来自于绞股蓝的糖基转移酶基因在大肠杆菌中异源表达，体外酶促反应进行了功能鉴定。对其产物进行ESI质谱和HPLC检测都显示有较高的信号。本发明所制备的人参皂苷具有得率高，副产物少，容易工业化生产等优点，为绞股蓝皂苷异源生物合成奠定了基础。
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