一种迟缓爱德华菌实时荧光PCR检测方法及应用

    公开(公告)号:CN114854886A

    公开(公告)日:2022-08-05

    申请号:CN202210755672.8

    申请日:2022-06-30

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明涉及基于MGB探针的实时荧光PCR反应快速检测体系对4种迟缓爱德华菌血清型菌株进行检测。本发明以4种血清型迟缓爱德华菌的wzx基因为靶基因,设计和筛选了针对每一个血清型的Taqman特异性引物及MGB探针,并建立了实时荧光PCR检测方法。利用本发明提供的方法可以准确、快速、灵敏地对4种迟缓爱德华菌血清型菌株进行分子生物学检测。

    一种用于检测蜡样芽孢杆菌的液相芯片及应用

    公开(公告)号:CN112575097B

    公开(公告)日:2022-05-10

    申请号:CN202011082335.4

    申请日:2020-10-12

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明提供了用于检测8种蜡样芽孢杆菌的DNA序列,连接在标记有不同荧光染料磁性微球上的DNA探针,包括:从蜡样芽孢杆菌G6235、G6206、G6239、G2724、G6211、G6217、G6207、G6214中分别选取的一种DNA片段。本发明结合Bio‑Rad公司的Bio‑Plex 200悬液芯片系统,建立了一套用于检测8种蜡样芽孢杆菌的悬液芯片检测系统及其检测方法,填补了利用分子生物学方法对蜡样芽孢杆菌检测的技术空白,对于这一重要致病菌的临床鉴定和流行病学监测具有重要意义。

    河流弧菌实时荧光PCR检测方法及应用

    公开(公告)号:CN112375836A

    公开(公告)日:2021-02-19

    申请号:CN202011368067.2

    申请日:2020-11-30

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明涉及河流弧菌实时荧光PCR检测方法及应用。它是基于MGB探针的实时荧光PCR反应快速检测体系对河流弧菌进行检测和血清学分型。本发明以8种河流弧菌的特异性基因为靶基因,设计并筛选了针对每一个血清型的Taqman特异性引物及MGB探针,并建立了实时荧光PCR检测方法。利用本发明提供的方法可以准确、快速、灵敏地对8种血清型河流弧菌进行分子生物学检测。

    一种用于阪崎肠杆菌O抗原血清型分型的环介导等温扩增检测方法

    公开(公告)号:CN112375833A

    公开(公告)日:2021-02-19

    申请号:CN202011316948.X

    申请日:2020-11-23

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明涉及一种对阪崎肠杆菌O1‑O7血清型O抗原分型的环介导等温扩增(LAMP)检测方法。本发明以阪崎肠杆菌O1‑O7的O抗原基因簇内的特异基因,即wzx和wzy为靶基因,设计并筛选了对阪崎肠杆菌O1‑O7的O抗原分型的各自四条引物,并建立了一种环介导等温扩增(LAMP)反应体系。为食品,特别是婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的检测和血清学分型提供了相应技术。利用本发明的LAMP体系检测阪崎肠杆菌,并且对其进行血清学分型,具有操作简便和快速高效的优点。

    一种对柠檬酸杆菌O4和O24血清型O抗原分子分型的检测方法

    公开(公告)号:CN111876500A

    公开(公告)日:2020-11-03

    申请号:CN202010649559.2

    申请日:2020-07-08

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明涉及对杨葛氏柠檬酸杆菌(Citrobacter youngae)O4血清型及沃克曼氏柠檬酸杆菌(Citrobacter werkmanii)O24血清型的O抗原使用基于MGB探针的实时荧光TaqMan聚合酶链式反应快速检测体系进行分析。以柠檬酸杆菌O抗原基因簇内的特异基因,设计并筛选了用于杨葛氏柠檬酸杆菌及沃克曼氏柠檬酸杆菌的O抗原分型的引物及MGB探针,为在水、土壤、食物和人或动物肠道中柠檬酸杆菌的O抗原分型提供一条可信的途径。利用本发明的MGB探针来检测水、土壤、食物和人或动物肠道中的柠檬酸杆菌,并且对其进行O抗原分型,具有高灵敏度、高特异性及快速检测等诸多优点。

    一种对普罗威登斯菌O19、O20、O28、O30等血清型O抗原分子分型的检测方法

    公开(公告)号:CN111748641A

    公开(公告)日:2020-10-09

    申请号:CN202010649557.3

    申请日:2020-07-08

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明涉及对普罗威登斯菌(Providencia)O19、O20、O28、O30、O31、O36血清型的O抗原使用基于MGB探针的实时荧光TaqMan聚合酶链式反应快速检测体系进行分析。本发明以普罗威登斯菌O抗原基因簇特异基因为靶基因,设计并筛选了用于普罗威登斯菌的O抗原分型的引物及MGB探针,并建立了相应的实时荧光PCR(RT-PCR)检测方法,为利用分子生物学手段对亲水气单胞菌的O抗原分型提供一条可信的途径。利用本发明的MGB探针检测大便、尿道感染、伤口、烧伤和菌血症标本中的普罗威登斯菌,并且对其进行O抗原分型,具有高灵敏度、高特异性及快速检测等诸多优点。

    一种对斯氏普罗威登斯菌O33血清型O抗原分子分型的检测方法

    公开(公告)号:CN111690723A

    公开(公告)日:2020-09-22

    申请号:CN202010649398.7

    申请日:2020-07-08

    Applicant: 南开大学

    Abstract: 本发明涉及一种对斯氏普罗威登斯菌O33血清型O抗原分子分型的检测方法。本发明以斯氏普罗威登斯菌O33的O抗原基因簇内的特异基因为靶基因,设计并筛选用于斯氏普罗威登斯菌O33的O抗原分型的四条引物,并建立了相应的LAMP检测方法,为斯氏普罗威登斯菌的O33抗原分型提供一条可信的途径。利用本发明的LAMP引物检测腹泻大便、尿道感染、伤口、烧伤和菌血症标本的斯氏普罗威登斯菌,并且对其进行O抗原分型,具有操作简单、快速高效、高灵敏度等诸多优点。

    对普罗威登斯菌O5和O21特异的核苷酸及其应用

    公开(公告)号:CN105154561A

    公开(公告)日:2015-12-16

    申请号:CN201510633619.0

    申请日:2015-09-29

    Applicant: 南开大学

    CPC classification number: C12Q1/689

    Abstract: 本发明涉及对普罗威登斯菌O5和O21血清型特异的核苷酸及其应用,所述核苷酸为SEQ ID NO:1-4所示的核苷酸中的至少一种。这些核苷酸可用于制备检测普罗威登斯菌用PCR试剂盒。所述的普罗威登斯菌可以取样于腹泻大便、尿道感染、伤口、烧伤和菌血症标本的培养物的粗提液,或是普罗威登斯菌的纯培养物的粗提液等。本发明对普罗威登斯菌O5和O21血清型特异的核苷酸及包含该核苷酸的PCR试剂盒,PCR试剂盒配制方法简便,检测周期短、速度快,可操作性强,易于产业化生产,而检测成本却相对较低;准确性高;灵敏度高。

    单核细胞增生李斯特菌主要致病性血清型多重PCR检测方法及应用

    公开(公告)号:CN118389721A

    公开(公告)日:2024-07-26

    申请号:CN202410833072.8

    申请日:2024-06-26

    Applicant: 南开大学

    Inventor: 郭玺 王婧 秦婧靓

    Abstract: 本发明涉及一种用于单核细胞增生李斯特菌主要致病性血清型多重PCR检测用的特异寡核苷酸序列及其应用,所述寡核苷酸包括:(1)单核细胞增生李斯特菌的hlyA基因中选取的2段DNA片段,如SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:2所示;(2)单核细胞增生李斯特菌4b型、1/2a型、1/2b型和1/2c型的gttA、lmo0701、A409_0759和lmo1118基因中分别选取的2段DNA片段,如SEQ ID NO:3至SEQ ID NO:10所示。本发明还建立了一套利用上述寡核苷酸,检测单核细胞增生李斯特菌4个主要致病性血清型的多重PCR检测体系及检测方法,克服了已有技术的检测缺陷,实现了单核细胞增生李斯特菌4个主要致病性血清型的准确检测。

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