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公开(公告)号:CN109517809B
公开(公告)日:2022-03-22
申请号:CN201811449640.5
申请日:2018-11-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一株缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明将野生型传染性支气管炎病毒的E蛋白的第26位氨基酸由丙氨酸突变为苯丙氨酸,得到的缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒。本发明通过构建缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒,以及获得了回复突变体,对突变后的病毒进行分离纯化方法及其特性分析,有助于开发特异性的抗病毒药物和预防病毒感染的有效疫苗,对冠状病毒的研究具有重大的公共卫生和经济意义。
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公开(公告)号:CN113088539A
公开(公告)日:2021-07-09
申请号:CN202110217088.2
申请日:2021-02-26
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/861 , C12N15/40 , A61K39/12 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,公开了一种表达IBDV VP2蛋白的重组腺病毒及制备与应用。通过PCR扩增IBDV的VP2基因片段与穿梭质粒pAdtrack‑GOI的双酶切产物进行同源重组得到穿梭质粒pAdTrack‑GOI‑VP2,将穿梭质粒线性化后与携带了腺病毒骨架质粒pAdEasy‑1的BJ5183感受态细胞进行菌内同源重组得到重组腺病毒载体pAd‑VP2;最后将pAd‑VP2线性化后转染HEK293A细胞得到重组腺病毒rAd‑VP2。本发明重组腺病毒rAd‑VP2纯化后滴度可达6.72×109GFU/mL,接种动物后能够有效刺激特异性抗体的产生,为IBDV亚单位疫苗的研发奠定一定的基础。
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公开(公告)号:CN111926025A
公开(公告)日:2020-11-13
申请号:CN202010346610.2
申请日:2020-04-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及反向遗传操作技术领域,公开了一株经过密码子替换的基因Ⅶ型新城疫病毒的拯救方法。分别将新城疫病毒的NP、P和L基因以及表达T7 RNA聚合酶的DE3基因克隆进pXJ40载体,获得质粒pXJ40-NP、pXJ40-P、pXJ40-L和pXJ40-DE3;将新城疫病毒的全基因组cDNA克隆进pBR322质粒中得到pBR322-DHN3;将NP基因编码区部分密码子统一替换成使用频率最高的密码子,替换到pBR322-DHN3质粒上,形成新质粒pBR322-mNPDHN3;采用上述5种质粒共转染BHK-21细胞,得到拯救病毒rDHN3-mNP。本发明方法更利于病毒的拯救和病毒致病机制的研究。
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公开(公告)号:CN107475245B
公开(公告)日:2020-07-10
申请号:CN201710786499.7
申请日:2017-09-04
Applicant: 肇庆大华农生物药品有限公司 , 华南农业大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明提供了一种简易的质粒粗提的方法,具体为:在含有质粒的基因工程菌体中加入PBS溶液重悬;加入20~100ug/ml的RNA酶和1~10mg/ml的溶菌酶;搅拌混匀,搅拌速度为100~5000rpm/min,搅拌的时间为10~50min;反复冻融3~6次,每次冻融后,进行搅拌,搅拌速度和时间同上;3000~10000rpm/min离心20~60min,取上清液;向上清中加入乙醇,乙醇最终浓度为60~80%;混匀后在2~8℃放置10~60min;8000~12000rpm/min离心15~90min,收集沉淀;加入TE溶液,电泳检测。相对于传统方法,本发明提取质粒的方法能够规模化,提取量不受限制,适合产业化;提取仅仅需要反复冻融菌体、乙醇沉淀两个主要步骤,避免了有毒有害试剂的使用;能够提取菌体中80%以上的质粒。
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公开(公告)号:CN106238371B
公开(公告)日:2019-01-08
申请号:CN201610919944.8
申请日:2016-10-21
Applicant: 华南农业大学 , 广东大麟洋海洋生物有限公司
Abstract: 一种深海域养殖网箱自动清洗装置,包括底座、导轮、钢缆和清洗盘;底座放置在网箱基体的上方,底座的下部安装有驱动轮,驱动轮由驱动电机驱动;底座的内侧固定有倒U形导轮支撑架,导轮支撑架的内部安装有一个滑轮,滑轮压在扶手上;两对导轮固定在导轮支撑架的上方拐角处,钢缆通过导轮悬挂连接有清洗盘。本发明装置自动化程度高,成本低,可以在养殖过程中对网箱进行清洗,无需将网箱取出水面后处理,减少作业环节,降低劳动强度。
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公开(公告)号:CN108635574A
公开(公告)日:2018-10-12
申请号:CN201810461794.X
申请日:2018-05-15
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
IPC: A61K39/145 , A61P31/16 , A61K39/12 , A61P31/14 , C12N7/00
CPC classification number: A61K39/12 , A61K2039/5252 , A61K2039/552 , A61K2039/70 , A61P31/14 , A61P31/16 , C12N7/00 , C12N2760/16134 , C12N2760/16151 , C12N2770/24034 , C12N2770/24051 , A61K2300/00
Abstract: 本发明公开一种生产鸭坦布苏、禽流感二联灭活疫苗的方法及其产品,该方法包括以下步骤:用EB66传代细胞分别接种鸭坦布苏、禽流感病毒株;在病毒ELD50或EID50效价达到最高时分别收获鸭坦布苏、禽流感病毒并保存;分别灭活鸭坦布苏、禽流感病毒;将灭活后的鸭坦布苏和禽流感病毒在吐温-80中完全混合,得到病毒混合液,在病毒混合液中加入已灭菌的油相佐剂,混合乳化,配制成鸭坦布苏、禽流感二联灭活疫苗。本发明通过采用EB66传代细胞系分别进行鸭坦布苏和禽流感病毒的培养,然后制备成的鸭坦布苏、禽流感二联疫苗具有生产工艺稳定、批间差异小、质量可控、产量和质量显著提高等优点。
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公开(公告)号:CN104706580B
公开(公告)日:2017-11-10
申请号:CN201510133896.5
申请日:2015-03-25
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 广东温氏大华农生物科技有限公司
IPC: A61K9/08 , A61K31/80 , A61K47/36 , A61K33/04 , A61P31/12 , A61P31/04 , A61P35/00 , A61P33/02 , A61P39/00 , A61P37/02
Abstract: 本发明涉及一种兽用干扰素诱导剂,其由如下组分制成:pH值为7.2的氯化钠‑磷酸盐缓冲液、浓度为10‑80g/L的氯化钙水溶液、浓度为0.1‑5g/L的壳聚糖盐酸盐水溶液、聚肌苷酸、聚胞苷酸。本发明还提供该兽用干扰素诱导剂的制备方法。本发明的兽用干扰素诱导剂副反应少、刺激性低、安全性高,制备方法能够避免氯化钙与其他成分产生沉淀。
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公开(公告)号:CN107058243A
公开(公告)日:2017-08-18
申请号:CN201710179331.X
申请日:2017-03-23
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
CPC classification number: C12N7/00 , C12N2710/16351
Abstract: 本发明公开了一种马立克氏病毒的悬浮培养方法,包括步骤:1)鸡胚源DF‑1细胞系的传代与培养;2)细胞毒种的繁殖:用稀释液将马立克氏病毒种稀释,将病毒和DF‑1细胞一起接入含细胞培养液的培养瓶中培养,收获病毒作为毒种;3)制苗用病毒的吸附培养:将毒种稀释为病毒液,和新的鸡胚源DF‑1细胞一起接入含有微载体和悬浮培养液的培养瓶中,进行悬浮吸附培养;4)病毒的增殖培养及收获:弃去悬浮培养液,加入病毒增殖培养液进行悬浮增殖培养;当接入的细胞病变率达80%以上时,收获病毒液并保存;该方法用微载体结合悬浮的方式对马立克氏病毒进行培养,克服了传统疫苗生产受制于鸡胚的供应的缺点,避免了感染外源病毒的风险。
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公开(公告)号:CN106868216A
公开(公告)日:2017-06-20
申请号:CN201710184042.9
申请日:2017-03-24
Applicant: 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2545/113
Abstract: 本发明公开了一种禽白血病病毒PCR检测引物组及包括该检测引物组的试剂盒,禽白血病病毒PCR检测引物组包括:引物P1、P2、P3和P4;其中P1为上游通用检测引物;P2为检测ALV‑A亚型病毒的下游引物;P3为检测ALV‑B亚型病毒的下游引物;P4为检测ALV‑J亚型病毒的下游引物;该诊断试剂盒,包括:如上所述的禽白血病病毒PCR检测引物组、ALV‑A亚型病毒阳性对照质粒、ALV‑B亚型病毒阳性对照质粒、ALV‑J亚型病毒阳性对照质粒和阴性对照;禽白血病病毒PCR检测引物组能够快速、准确地检测禽类是否患有白血病该亚型病毒。
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公开(公告)号:CN106337774A
公开(公告)日:2017-01-18
申请号:CN201611050236.1
申请日:2016-11-25
Applicant: 华南农业大学 , 广东大麟洋海洋生物有限公司
IPC: F03B13/18
CPC classification number: Y02E10/38 , F03B13/1885 , F05B2220/709
Abstract: 本发明公开了一种多维度能量海浪发电装置,是由多个阻力节点将浮子、发电体、沉子和连接杆连接构成一个发电空间网络结构,其中,阻力节点由3个正交平面组成,阻力节点的3个正交平面在上下前后左右的6个方向各有一个交点,每个交点通过连接杆连接一个发电体,上方的发电体通过连接杆与浮子相连接,下方的发电体通过连接杆与沉子相连接。本发明装置可以吸收海面波动以及海面以下空间海水的多维度局部扰流动能,转化效率高。
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