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公开(公告)号：CN111926025B
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202010346610.2
申请日：2020-04-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及反向遗传操作技术领域，公开了一株经过密码子替换的基因Ⅶ型新城疫病毒的拯救方法。分别将新城疫病毒的NP、P和L基因以及表达T7 RNA聚合酶的DE3基因克隆进pXJ40载体，获得质粒pXJ40‑NP、pXJ40‑P、pXJ40‑L和pXJ40‑DE3；将新城疫病毒的全基因组cDNA克隆进pBR322质粒中得到pBR322‑DHN3；将NP基因编码区部分密码子统一替换成使用频率最高的密码子，替换到pBR322‑DHN3质粒上，形成新质粒pBR322‑mNPDHN3；采用上述5种质粒共转染BHK‑21细胞，得到拯救病毒rDHN3‑mNP。本发明方法更利于病毒的拯救和病毒致病机制的研究。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109207439A
公开(公告)日：2019-01-15
申请号：CN201811172272.4
申请日：2018-10-09
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种鸭瘟病毒的全悬浮培养方法，包括以下步骤：步骤1：鸭胚细胞衍生的传代细胞系的复苏与传代培养。步骤2：采用二阶培养法，向全悬浮培养的鸭胚细胞衍生的传代细胞系接种鸭瘟病毒，实现病毒大规模培养。步骤3：接毒后，每隔12h取样测定病毒的TCID50，在病毒TCID50达到最高时收获病毒并保存，得到培养后的鸭瘟病毒。本发明的全悬浮培养方法提高了病毒培养规模和效率，符合未来疫苗生产的趋势，有广阔的应用前景及蕴含良好的经济效益。
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公开(公告)号：CN111926025A
公开(公告)日：2020-11-13
申请号：CN202010346610.2
申请日：2020-04-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及反向遗传操作技术领域，公开了一株经过密码子替换的基因Ⅶ型新城疫病毒的拯救方法。分别将新城疫病毒的NP、P和L基因以及表达T7 RNA聚合酶的DE3基因克隆进pXJ40载体，获得质粒pXJ40-NP、pXJ40-P、pXJ40-L和pXJ40-DE3；将新城疫病毒的全基因组cDNA克隆进pBR322质粒中得到pBR322-DHN3；将NP基因编码区部分密码子统一替换成使用频率最高的密码子，替换到pBR322-DHN3质粒上，形成新质粒pBR322-mNPDHN3；采用上述5种质粒共转染BHK-21细胞，得到拯救病毒rDHN3-mNP。本发明方法更利于病毒的拯救和病毒致病机制的研究。
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公开(公告)号：CN108635574A
公开(公告)日：2018-10-12
申请号：CN201810461794.X
申请日：2018-05-15
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
IPC: A61K39/145 , A61P31/16 , A61K39/12 , A61P31/14 , C12N7/00
CPC classification number: A61K39/12 , A61K2039/5252 , A61K2039/552 , A61K2039/70 , A61P31/14 , A61P31/16 , C12N7/00 , C12N2760/16134 , C12N2760/16151 , C12N2770/24034 , C12N2770/24051 , A61K2300/00
Abstract: 本发明公开一种生产鸭坦布苏、禽流感二联灭活疫苗的方法及其产品，该方法包括以下步骤：用EB66传代细胞分别接种鸭坦布苏、禽流感病毒株；在病毒ELD50或EID50效价达到最高时分别收获鸭坦布苏、禽流感病毒并保存；分别灭活鸭坦布苏、禽流感病毒；将灭活后的鸭坦布苏和禽流感病毒在吐温-80中完全混合，得到病毒混合液，在病毒混合液中加入已灭菌的油相佐剂，混合乳化，配制成鸭坦布苏、禽流感二联灭活疫苗。本发明通过采用EB66传代细胞系分别进行鸭坦布苏和禽流感病毒的培养，然后制备成的鸭坦布苏、禽流感二联疫苗具有生产工艺稳定、批间差异小、质量可控、产量和质量显著提高等优点。
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公开(公告)号：CN109295008A
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201811172271.X
申请日：2018-10-09
Applicant: 华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司 , 华南农业大学 , 肇庆大华农生物药品有限公司 , 甘肃健顺生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种鸭肝炎病毒的全悬浮培养方法，包括以下步骤：步骤1：鸭胚细胞衍生的传代细胞系的复苏与传代培养。步骤2：采用二阶培养法，向全悬浮培养的鸭胚细胞衍生的传代细胞接种鸭肝炎病毒，实现病毒大规模培养。步骤3：接毒后，每隔12h取样测定病毒的ELD50，在病毒ELD50达到最高时收获病毒并保存，得到培养后的鸭肝炎病毒。本发明的全悬浮培养方法提高了病毒培养规模和效率，符合未来疫苗生产的趋势，有广阔的应用前景及蕴含良好的经济效益。
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公开(公告)号：CN112048484A
公开(公告)日：2020-12-08
申请号：CN202010730869.7
申请日：2020-07-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于兽用生物制品技术领域，公开了一株表达传染性法氏囊强毒株VP2蛋白的基因Ⅶ型新城疫重组病毒，所述重组病毒在病毒rDHN3mF的P基因和M基因之间插入VP2蛋白编码基因得到，所述VP2蛋白编码基因如序列表SEQ ID NO：2所述，所述病毒rDHN3‑mF的序列表如SEQ ID NO：1所述。该重组病毒为弱毒型、应用后具有较强烈的保护性免疫反应、是针对流行毒株的NDV/IBDV二联疫苗的具有实用性的潜在毒株，同时本发明还公开了该重组病毒的制备方法和疫苗。
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