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公开(公告)号:CN113088539A
公开(公告)日:2021-07-09
申请号:CN202110217088.2
申请日:2021-02-26
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/861 , C12N15/40 , A61K39/12 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,公开了一种表达IBDV VP2蛋白的重组腺病毒及制备与应用。通过PCR扩增IBDV的VP2基因片段与穿梭质粒pAdtrack‑GOI的双酶切产物进行同源重组得到穿梭质粒pAdTrack‑GOI‑VP2,将穿梭质粒线性化后与携带了腺病毒骨架质粒pAdEasy‑1的BJ5183感受态细胞进行菌内同源重组得到重组腺病毒载体pAd‑VP2;最后将pAd‑VP2线性化后转染HEK293A细胞得到重组腺病毒rAd‑VP2。本发明重组腺病毒rAd‑VP2纯化后滴度可达6.72×109GFU/mL,接种动物后能够有效刺激特异性抗体的产生,为IBDV亚单位疫苗的研发奠定一定的基础。