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公开(公告)号：CN109517808A
公开(公告)日：2019-03-26
申请号：CN201811389187.3
申请日：2018-11-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/50 , C12N15/63 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一株M蛋白糖基化位点突变的传染性支气管炎病毒及其制备方法与应用。本发明利用反向遗传学技术，获得IBV全长感染性克隆，再以其为模板，对IBV M蛋白糖基化位点进行N→D的点突变，体外转录电转染细胞后获得IBV M蛋白突变病毒株。该突变株的获得有助于研究IBV M蛋白糖基化位点突变对M蛋白的结构、病毒的增殖能力及其对细胞内质网压力的影响，判断病毒的复制能力和致病力是否发生改变，并且为研制IBV减毒疫苗提供了参考方法。
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公开(公告)号：CN109628487A
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201811571140.9
申请日：2018-12-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/877 , A01K67/027 , C07K14/48
CPC classification number: C12N15/8509 , A01K67/0278 , A01K2207/15 , A01K2217/072 , A01K2227/108 , A01K2267/01 , C07K14/48 , C12N15/8778 , C12N2800/107
Abstract: 本发明通过转基因方法制备能在腮腺中特异表达人源NGF的转基因猪，并采集该转基因猪分泌的唾液，分离纯化人源NGF用于人类疾病的治疗，尤其是人类神经性疾病的治疗，有显著效果。且目前市场上已开发并投入临床使用的NGF药物为鼠源性的NGF，存在小鼠唾液量少且内源NGF分泌量少，分离纯化量少的原因，导致市场价格高昂；同时，鼠源NGF虽然与人源同源性高，但鼠源NGF仍然可能存在免疫原性问题，引起过敏等不良反应。因此本专利发明的方法，得到的转基因猪唾液中高效高产的表达人源NGF蛋白，既解决了鼠源NGF产量低的问题，又解决了同源性问题。
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公开(公告)号：CN107179407A
公开(公告)日：2017-09-19
申请号：CN201710247427.5
申请日：2017-04-14
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/68
CPC classification number: G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种用于提高转基因鼠生产hNGF效率的注射液，其有效成分为肾上腺素、去甲肾上腺素、毛果芸香碱或者异丙肾上腺素其中一种。与现有技术相比，该用于提高转基因鼠生产hNGF效率的注射液具有以下有益效果：(1)能够显著提高转基因公鼠唾液分泌量以及hNGF分泌量；(2)能够显著提高性成熟后的转基因鼠唾液分泌量以及hNGF分泌量；(3)选择性成熟后的转基因公鼠并在注射20min后收集其唾液进行hNGF蛋白纯化可显著提高生产人神经生长因子蛋白的效率。本发明还公开了该注射液的使用方法以及在提高转基因鼠唾液的分泌量、唾液中总蛋白质的浓度、唾液中hNGF浓度以及唾液中hNGF分泌量等方面的应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109517809B
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN201811449640.5
申请日：2018-11-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一株缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明将野生型传染性支气管炎病毒的E蛋白的第26位氨基酸由丙氨酸突变为苯丙氨酸，得到的缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒。本发明通过构建缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒，以及获得了回复突变体，对突变后的病毒进行分离纯化方法及其特性分析，有助于开发特异性的抗病毒药物和预防病毒感染的有效疫苗，对冠状病毒的研究具有重大的公共卫生和经济意义。
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公开(公告)号：CN110592031A
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201910910558.6
申请日：2019-09-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供一株S蛋白融合HiBiT的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明是将野生型传染性支气管炎病毒(IBV)的S蛋白水解切割位点处第539位插入HiBiT的氨基酸，并在HiBiT前后各加上4个连接氨基酸，获得IBV突变型病毒株。该突变株的获得有助于研究IBV HiBiT-S2融合蛋白的结构、病毒的增殖能力、形成空斑的大小，并可判断病毒的复制能力和致病力是否发生改变，并且为定量IBV提供了新方法。
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公开(公告)号：CN109517809A
公开(公告)日：2019-03-26
申请号：CN201811449640.5
申请日：2018-11-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一株缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明将野生型传染性支气管炎病毒的E蛋白的第26位氨基酸由丙氨酸突变为苯丙氨酸，得到的缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒。本发明通过构建缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒，以及获得了回复突变体，对突变后的病毒进行分离纯化方法及其特性分析，有助于开发特异性的抗病毒药物和预防病毒感染的有效疫苗，对冠状病毒的研究具有重大的公共卫生和经济意义。
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公开(公告)号：CN110592031B
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN201910910558.6
申请日：2019-09-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供一株S蛋白融合HiBiT的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明是将野生型传染性支气管炎病毒(IBV)的S蛋白水解切割位点处第539位插入HiBiT的氨基酸，并在HiBiT前后各加上4个连接氨基酸，获得IBV突变型病毒株。该突变株的获得有助于研究IBV HiBiT‑S2融合蛋白的结构、病毒的增殖能力、形成空斑的大小，并可判断病毒的复制能力和致病力是否发生改变，并且为定量IBV提供了新方法。
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公开(公告)号：CN111500641A
公开(公告)日：2020-08-07
申请号：CN202010402846.3
申请日：2020-05-13
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/90 , C12N15/877 , C12N15/85 , A01K67/027 , C07K14/48
Abstract: 本发明公开了一种转人神经生长因子基因猪的制备方法。该方法包括如下步骤：a、构建靶向pNGF基因外显子的CRISPR/Cas9系统表达载体；b、构建提供hNGF基因的同源重组载体；c、将CRISPR/Cas9系统表达载体与hNGF基因的同源重组载体共转染猪耳成纤维细胞；d、转染后的猪耳成纤维细胞经筛选后，获得阳性细胞系，并通过体细胞克隆获得转人神经生长因子的转基因猪。本发明通过定点基因重组的方式，将hNGF基因插入猪pNGF基因位点，从而获得的转人神经生长因子基因猪，可以表达人神经生长因子而不表达猪神经生长因子，避免了在猪唾液中收集人源NGF时，其中还混有猪源NGF的现状，也避免其在用作药物治疗时的免疫原性问题，更加安全和有效。
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