公开(公告)号：CN111926025B

公开(公告)日：2023-05-05

申请号：CN202010346610.2

申请日：2020-04-27

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 陈瑞爱 ,  王楠楠 ,  刘定祥 ,  黄梅 ,  杜倩茹 ,  叶俊贤 ,  罗琼

IPC: C12N15/45 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N7/00

Abstract: 本发明涉及反向遗传操作技术领域，公开了一株经过密码子替换的基因Ⅶ型新城疫病毒的拯救方法。分别将新城疫病毒的NP、P和L基因以及表达T7 RNA聚合酶的DE3基因克隆进pXJ40载体，获得质粒pXJ40‑NP、pXJ40‑P、pXJ40‑L和pXJ40‑DE3；将新城疫病毒的全基因组cDNA克隆进pBR322质粒中得到pBR322‑DHN3；将NP基因编码区部分密码子统一替换成使用频率最高的密码子，替换到pBR322‑DHN3质粒上，形成新质粒pBR322‑mNPDHN3；采用上述5种质粒共转染BHK‑21细胞，得到拯救病毒rDHN3‑mNP。本发明方法更利于病毒的拯救和病毒致病机制的研究。

公开(公告)号：CN112048484A

公开(公告)日：2020-12-08

申请号：CN202010730869.7

申请日：2020-07-27

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 陈瑞爱 ,  杜倩茹 ,  刘定祥 ,  黄梅 ,  王楠楠 ,  叶俊贤 ,  罗琼 ,  任广彩

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/85 ,  A61K39/295 ,  A61K39/17 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于兽用生物制品技术领域，公开了一株表达传染性法氏囊强毒株VP2蛋白的基因Ⅶ型新城疫重组病毒，所述重组病毒在病毒rDHN3mF的P基因和M基因之间插入VP2蛋白编码基因得到，所述VP2蛋白编码基因如序列表SEQ ID NO：2所述，所述病毒rDHN3‑mF的序列表如SEQ ID NO：1所述。该重组病毒为弱毒型、应用后具有较强烈的保护性免疫反应、是针对流行毒株的NDV/IBDV二联疫苗的具有实用性的潜在毒株，同时本发明还公开了该重组病毒的制备方法和疫苗。

公开(公告)号：CN111926025A

公开(公告)日：2020-11-13

申请号：CN202010346610.2

申请日：2020-04-27

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 陈瑞爱 ,  王楠楠 ,  刘定祥 ,  黄梅 ,  杜倩茹 ,  叶俊贤 ,  罗琼

IPC: C12N15/45 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N7/00

Abstract: 本发明涉及反向遗传操作技术领域，公开了一株经过密码子替换的基因Ⅶ型新城疫病毒的拯救方法。分别将新城疫病毒的NP、P和L基因以及表达T7 RNA聚合酶的DE3基因克隆进pXJ40载体，获得质粒pXJ40-NP、pXJ40-P、pXJ40-L和pXJ40-DE3；将新城疫病毒的全基因组cDNA克隆进pBR322质粒中得到pBR322-DHN3；将NP基因编码区部分密码子统一替换成使用频率最高的密码子，替换到pBR322-DHN3质粒上，形成新质粒pBR322-mNPDHN3；采用上述5种质粒共转染BHK-21细胞，得到拯救病毒rDHN3-mNP。本发明方法更利于病毒的拯救和病毒致病机制的研究。