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公开(公告)号：CN109517809B
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN201811449640.5
申请日：2018-11-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一株缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明将野生型传染性支气管炎病毒的E蛋白的第26位氨基酸由丙氨酸突变为苯丙氨酸，得到的缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒。本发明通过构建缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒，以及获得了回复突变体，对突变后的病毒进行分离纯化方法及其特性分析，有助于开发特异性的抗病毒药物和预防病毒感染的有效疫苗，对冠状病毒的研究具有重大的公共卫生和经济意义。
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公开(公告)号：CN110592031A
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201910910558.6
申请日：2019-09-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供一株S蛋白融合HiBiT的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明是将野生型传染性支气管炎病毒(IBV)的S蛋白水解切割位点处第539位插入HiBiT的氨基酸，并在HiBiT前后各加上4个连接氨基酸，获得IBV突变型病毒株。该突变株的获得有助于研究IBV HiBiT-S2融合蛋白的结构、病毒的增殖能力、形成空斑的大小，并可判断病毒的复制能力和致病力是否发生改变，并且为定量IBV提供了新方法。
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公开(公告)号：CN108486108B
公开(公告)日：2020-10-09
申请号：CN201810220691.4
申请日：2018-03-16
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/90 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开一种敲除人HMGB1基因的细胞株及其应用，属于分子生物学领域。本发明提供一种靶向敲除人HMGB1基因的gRNA序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。利用CRISPR‑Cas9技术首次在人Huh7细胞基因组上敲除HMGB1基因，使得HMGB1蛋白的表达完全丧失，获得HMGB1敲除的Huh7细胞株，且敲除细胞株形态、生长速度等方面均与对照细胞无明显差异，是较为理想的HMGB1敲除的细胞模型；且操作简便，周期短，成本低，改造后细胞株稳定，可用于研究HMGB1蛋白在自噬、凋亡、细胞炎症、病毒感染等方面的具体作用机制。本发明获得的细胞株能够显著增强乙型脑炎病毒毒株的感染。
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公开(公告)号：CN109517809A
公开(公告)日：2019-03-26
申请号：CN201811449640.5
申请日：2018-11-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一株缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明将野生型传染性支气管炎病毒的E蛋白的第26位氨基酸由丙氨酸突变为苯丙氨酸，得到的缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒。本发明通过构建缺失E蛋白离子通道活性的传染性支气管炎重组病毒，以及获得了回复突变体，对突变后的病毒进行分离纯化方法及其特性分析，有助于开发特异性的抗病毒药物和预防病毒感染的有效疫苗，对冠状病毒的研究具有重大的公共卫生和经济意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111334482B
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202010243659.5
申请日：2020-03-31
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种复制性增强的减毒JEV及其制备方法与应用，属于生物医学技术领域。本发明的减毒JEV是日本乙型脑炎病毒NS5蛋白644位天冬氨酸突变为苏氨酸，和3’非编码区248位碱基T突变为C、254位碱基A突变为G、258位点碱基A突变为G，所得的日本乙型脑炎病毒。本发明方法获得的突变毒株在复制能力上有了明显的提升，同时致病性降低，用于疫苗生产中，可提高产量，降低成本。利用本发明方法获得突变毒株的时间周期短，操作简便，可加快弱毒毒株的培育和病毒致病机制研究的进程。
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公开(公告)号：CN110592031B
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN201910910558.6
申请日：2019-09-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供一株S蛋白融合HiBiT的传染性支气管炎重组病毒及制备方法与应用。本发明是将野生型传染性支气管炎病毒(IBV)的S蛋白水解切割位点处第539位插入HiBiT的氨基酸，并在HiBiT前后各加上4个连接氨基酸，获得IBV突变型病毒株。该突变株的获得有助于研究IBV HiBiT‑S2融合蛋白的结构、病毒的增殖能力、形成空斑的大小，并可判断病毒的复制能力和致病力是否发生改变，并且为定量IBV提供了新方法。
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公开(公告)号：CN108486108A
公开(公告)日：2018-09-04
申请号：CN201810220691.4
申请日：2018-03-16
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/90 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开一种敲除人HMGB1基因的细胞株及其应用，属于分子生物学领域。本发明提供一种靶向敲除人HMGB1基因的gRNA序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。利用CRISPR-Cas9技术首次在人Huh7细胞基因组上敲除HMGB1基因，使得HMGB1蛋白的表达完全丧失，获得HMGB1敲除的Huh7细胞株，且敲除细胞株形态、生长速度等方面均与对照细胞无明显差异，是较为理想的HMGB1敲除的细胞模型；且操作简便，周期短，成本低，改造后细胞株稳定，可用于研究HMGB1蛋白在自噬、凋亡、细胞炎症、病毒感染等方面的具体作用机制。本发明获得的细胞株能够显著增强乙型脑炎病毒毒株的感染。
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公开(公告)号：CN111334482A
公开(公告)日：2020-06-26
申请号：CN202010243659.5
申请日：2020-03-31
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种复制性增强的减毒JEV及其制备方法与应用，属于生物医学技术领域。本发明的减毒JEV是日本乙型脑炎病毒NS5蛋白644位天冬氨酸突变为苏氨酸，和3’非编码区248位碱基T突变为C、254位碱基A突变为G、258位点碱基A突变为G，所得的日本乙型脑炎病毒。本发明方法获得的突变毒株在复制能力上有了明显的提升，同时致病性降低，用于疫苗生产中，可提高产量，降低成本。利用本发明方法获得突变毒株的时间周期短，操作简便，可加快弱毒毒株的培育和病毒致病机制研究的进程。
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公开(公告)号：CN109517808A
公开(公告)日：2019-03-26
申请号：CN201811389187.3
申请日：2018-11-21
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/50 , C12N15/63 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一株M蛋白糖基化位点突变的传染性支气管炎病毒及其制备方法与应用。本发明利用反向遗传学技术，获得IBV全长感染性克隆，再以其为模板，对IBV M蛋白糖基化位点进行N→D的点突变，体外转录电转染细胞后获得IBV M蛋白突变病毒株。该突变株的获得有助于研究IBV M蛋白糖基化位点突变对M蛋白的结构、病毒的增殖能力及其对细胞内质网压力的影响，判断病毒的复制能力和致病力是否发生改变，并且为研制IBV减毒疫苗提供了参考方法。
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