柑桔黄化脉明病毒长期离体保存方法

    公开(公告)号:CN105176934A

    公开(公告)日:2015-12-23

    申请号:CN201510678752.8

    申请日:2015-10-16

    Abstract: 本发明公开了一种柑桔黄化脉明病毒长期离体保存方法,在有活性的柑桔黄化脉明病毒提取液中加入等体积的保护剂,颠倒混合后迅速置于液氮中2~3min,然后转移至-80℃超低温冰箱保存;所述保护剂为用PBS缓冲液配制的含13~17%葡萄糖,5~7%蛋白胨以及10~30%甘油的溶液;所述的PBS缓冲液为:将NaCl 6.8~8g,Na2HPO4·12H2O 2.2~2.9g,KH2PO40.1~0.2g,KCl 0.15~0.2g,NaN30.2~0.5g,吐温-200.5~1.5mL,1000mL去离子水溶解灭菌备用。本方法离体保存的柑桔黄化脉明病毒在保存2年后仍能保持极高的侵染活性。

    柑桔褪绿矮化相关病毒的LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN104862426A

    公开(公告)日:2015-08-26

    申请号:CN201510330728.5

    申请日:2015-06-15

    CPC classification number: C12Q1/701 C12Q1/6844 C12Q2531/119

    Abstract: 本发明公开了一种柑桔褪绿矮化相关病毒的LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法,属于分子生物学技术领域。本发明提供了柑桔褪绿矮化相关病毒LAMP检测的外引物对F3、B3和内引物对FIP、BIP,以待测样品总DNA为模板,应用上述的内外引物对在63~65℃恒温反应条件下,进行环介导恒温扩增反应60~80min,扩增完成后78~82℃反应5~10min中止反应,然后根据浑浊度或利用荧光染料染色通过颜色变化或电泳条带进行可视化判断,鉴定植株样品是否感染柑桔褪绿矮化相关病毒。本发明操作简便、检测快速、不需要昂贵的核酸扩增仪器,几十分钟就可完成对样品的检测,重复性好、准确性高、灵敏度高。

    柑桔黄脉病毒的RT-LAMP引物组、检测方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN104328220A

    公开(公告)日:2015-02-04

    申请号:CN201410620927.5

    申请日:2014-11-06

    CPC classification number: C12Q1/701 C12Q1/6844 C12Q2531/119 C12Q2561/101

    Abstract: 本发明涉及一种柑桔黄脉病毒的RT-LAMP引物组、检测方法及试剂盒,属于分子生物学技术领域。本发明提供了柑桔黄脉病毒RT-LAMP检测的外引物对F3、B3和内引物对FIP、BIP,以待测样品总RNA为模板,应用上述的内外引物对在60~63℃恒温反应条件下,进行环介导恒温扩增反应70~100min,扩增完成后80℃再反应5~10min,然后利用琼脂糖凝胶电泳或荧光染料染色,鉴定植株样品是否感染柑桔黄脉病毒。本发明操作简便、检测快速、不需要昂贵的核酸扩增仪器,几十分钟就可完成对RNA的检测,重复性好、准确性高、灵敏度高,适合田间样品的大规模测定和茎尖嫁接脱毒苗的快速评价。

    柑桔碎叶病毒巢式RT-PCR检测方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN101914633A

    公开(公告)日:2010-12-15

    申请号:CN201010281556.4

    申请日:2010-09-15

    Applicant: 西南大学

    Abstract: 本发明公开了一种检测柑桔碎叶病毒的巢式RT-PCR检测方法和试剂盒,属于生物技术领域。本方法通过提取核酸,应用柑桔碎叶病毒特异性上游外部引物、下游外部引物对待测样品进行第一轮RT-PCR扩增,再以柑桔碎叶病毒特异性上游内部引物、下游内部引物进行第二轮PCR扩增,最后电泳判断检测样品中是否存在柑桔碎叶病毒:电泳图谱中如出现256bp特征性条带,表明该样品中存在柑桔碎叶病毒,如果没有出现256bp特征性条带,表明该样品中不存在柑桔碎叶病毒。本发明还相应地建立了检测试剂盒,可特异、灵敏、高效地检测柑桔碎叶病毒,适用于田间样品检测、CTLV流行监控、脱毒苗木鉴定等多种用途。

    碳点-抗生素复合物在制备柑橘黄龙病抑制剂中的应用

    公开(公告)号:CN118680179A

    公开(公告)日:2024-09-24

    申请号:CN202410696820.2

    申请日:2024-05-31

    Applicant: 西南大学

    Abstract: 本发明涉及碳点‑抗生素复合物在制备柑橘黄龙病抑制剂中的应用,属于柑橘黄龙病防治领域。所述碳点为柠檬酸尿素碳点,所述抗生素为四环素或土霉素;所述碳点‑抗生素复合物是通过催化反应将抗生素偶联到碳点上获得。本发明发现,对于带有黄龙病菌的柑橘苗,柠檬酸尿素碳点‑抗生素(四环素、土霉素)复合物处理后,死亡率、阳性率以及黄龙病菌含量均显著低于四环素、土霉素及其它杀菌剂,其中碳点‑四环素效果最佳,有望彻底消灭植物体内的黄龙病菌。

    柑橘叶斑驳病毒RT-RPA检测的特异引物、试剂盒和方法

    公开(公告)号:CN111690777A

    公开(公告)日:2020-09-22

    申请号:CN202010680187.X

    申请日:2020-07-15

    Applicant: 西南大学

    Abstract: 本发明公开了一种柑橘叶斑驳病毒RT-RPA检测的特异引物,上游引物:5’-ATGAACACTCACGGCGATGAAATTCCCACA-3’,下游引物:5’-GGATCCCCCATTAAATTCCATAAGCCAGTC-3’。还公开了一种柑橘叶斑驳病毒RT-RPA检测试剂盒,含有前述的特异引物。还公开了一种柑橘叶斑驳病毒RT-RPA检测的方法:1)提取待测样品RNA;2)利用提取的样品RNA进行RT-RPA反应,所用特异引物为前述的特异引物;3)RT-RPA反应完成后对反应产物进行检测,检测到目标扩增对象的即为阳性样品。本发明方法特异性强、灵敏度和RT-PCR相当,操作简单便捷,检测时间很短。

    一种柑橘轮斑病菌分子检测的引物及其检测方法

    公开(公告)号:CN106480193B

    公开(公告)日:2020-02-18

    申请号:CN201610914813.0

    申请日:2016-10-20

    Applicant: 西南大学

    Abstract: 一种柑橘轮斑病菌分子检测的引物及其检测方法,利用RAPD技术筛选出柑橘轮斑病菌中的2条特异性的基因组DNA序列,通过NCBI数据库的Blast比对分析,未获得同源序列信息,表明所获得的基因组DNA序列特异性较高;然后根据序列测定结果进行特异引物设计,并利用SCAR‑PCR技术成功建立了包括2对特异引物Cc‑SP1和Cc‑SP2的分子检测体系。本发明建立了柑橘轮斑病菌的PCR检测体系,该方法快速、准确、灵敏度高,可应用于柑橘轮斑病的鉴定和早期预测预报。

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