公开(公告)号：CN101914633A

公开(公告)日：2010-12-15

申请号：CN201010281556.4

申请日：2010-09-15

Applicant: 西南大学

Inventor： 宋震 ,  周常勇 ,  李中安 ,  刘科宏 ,  杨方云 ,  唐科志

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种检测柑桔碎叶病毒的巢式RT-PCR检测方法和试剂盒，属于生物技术领域。本方法通过提取核酸，应用柑桔碎叶病毒特异性上游外部引物、下游外部引物对待测样品进行第一轮RT-PCR扩增，再以柑桔碎叶病毒特异性上游内部引物、下游内部引物进行第二轮PCR扩增，最后电泳判断检测样品中是否存在柑桔碎叶病毒：电泳图谱中如出现256bp特征性条带，表明该样品中存在柑桔碎叶病毒，如果没有出现256bp特征性条带，表明该样品中不存在柑桔碎叶病毒。本发明还相应地建立了检测试剂盒，可特异、灵敏、高效地检测柑桔碎叶病毒，适用于田间样品检测、CTLV流行监控、脱毒苗木鉴定等多种用途。

公开(公告)号：CN101914634A

公开(公告)日：2010-12-15

申请号：CN201010282065.1

申请日：2010-09-15

Applicant: 西南大学

Inventor： 王雪峰 ,  周常勇 ,  王晶 ,  鲁昕 ,  李中安 ,  唐科志 ,  杨方云 ,  周彦

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12Q1/04

Abstract: 本发明公开了一种同时检测木质部难养菌和柑桔麻风病毒病多重RT-PCR检测方法及试剂盒，其关键在于：以木质部难养菌上游引物、木质部难养菌下游引物、柑桔麻风病毒上游引物、柑桔麻风病毒下游引物对待侧样品进行RT-PCR扩增，最后电泳鉴定。同时也提高了一种产品操作简便，适合大规模、高通量的样品分析的检测试剂盒。速度快，从样品制备到获取检测结果仅需6小时，特别适合口岸检疫；重复性好、稳定性高。同一样品的不同检测批次，不同人员操作，其结果一致性100％；试剂盒产品操作简便，适合大规模、高通量的样品分析。

公开(公告)号：CN101956023B

公开(公告)日：2012-10-31

申请号：CN201010282983.4

申请日：2010-09-16

Applicant: 西南大学

Inventor： 周常勇 ,  王雪峰 ,  李中安 ,  杨方云 ,  宋震 ,  周彦 ,  唐科志 ,  刘金香 ,  刘科宏

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种检测十种主要柑桔病害病原的基因芯片，包括固相载体和固定在该固相载体上的特异性寡核苷酸探针，其特征在于：固定在所述固相载体上的特异性寡核苷酸探针具有SEQIDNO：1-SEQIDNO：10所示的寡核苷酸序列或者与SEQIDNO：1-SEQIDNO：10所示的寡核苷酸序列互补的DNA或RNA。本发明方法设计合理，能够提高检测柑桔主要病害病原的敏感性、特异性及准确性；高通量，一次检测即能检出十种柑桔病害，十种病毒基本概括了柑桔主要病害病原；能够发现各种柑桔病原物的混合感染。

公开(公告)号：CN101956023A

公开(公告)日：2011-01-26

申请号：CN201010282983.4

申请日：2010-09-16

Applicant: 西南大学

Inventor： 周常勇 ,  王雪峰 ,  李中安 ,  杨方云 ,  宋震 ,  周彦 ,  唐科志 ,  刘金香 ,  刘科宏

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种检测十种主要柑桔病害病原的基因芯片，包括固相载体和固定在该固相载体上的特异性寡核苷酸探针，其特征在于：固定在所述固相载体上的特异性寡核苷酸探针具有SEQIDNO：1-SEQIDNO：10所示的寡核苷酸序列或者与SEQIDNO：1-SEQIDNO：10所示的寡核苷酸序列互补的DNA或RNA。本发明方法设计合理，能够提高检测柑桔主要病害病原的敏感性、特异性及准确性；高通量，一次检测即能检出十种柑桔病害，十种病毒基本概括了柑桔主要病害病原；能够发现各种柑桔病原物的混合感染。