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公开(公告)号:CN101025420A
公开(公告)日:2007-08-29
申请号:CN200510019512.3
申请日:2005-09-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种用于快速检测禽流感病毒的乳胶凝集试剂盒。利用水溶性碳化二亚胺将兔抗禽流感病毒核蛋白IgG偶联到羧化聚苯乙烯胶乳颗粒的表面,建立了禽流感病毒乳胶凝集检测方法,再辅以其它配套试剂制备了禽流感病毒乳胶凝集检测试剂盒。禽流感病毒乳胶凝集检测试剂盒由盒体和设在盒体内的乳胶诊断试剂、样本处理液A,样本处理液B,阳性对照样品和阴性对照样品组成。所述的试剂盒能够直接对禽流感病毒进行检测,具有特异性强、灵敏度高、操作简便和诊断快速的显著优点。
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公开(公告)号:CN119192356B
公开(公告)日:2025-05-27
申请号:CN202411368156.5
申请日:2024-09-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/532 , G01N33/577 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种识别犬瘟热病毒H蛋白的单克隆抗体、检测试纸条及应用。所述单克隆抗体包括单克隆抗体5‑8H或单克隆抗体9‑7B,有较高的特异性和灵敏性,两个抗体能够识别不同的抗原表位,能通过双抗夹心法制备检测试纸条。试验证明,本发明提供的单克隆抗体在制备用于检测犬瘟热病毒胶体金检测试纸条中,对犬细小病毒、犬腺病毒、犬冠状病毒、犬副流感病毒均无明显交叉反应,具有良好的特异性和更高的灵敏度。
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公开(公告)号:CN119192356A
公开(公告)日:2024-12-27
申请号:CN202411368156.5
申请日:2024-09-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/532 , G01N33/577 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种识别犬瘟热病毒H蛋白的单克隆抗体、检测试纸条及应用。所述单克隆抗体包括单克隆抗体5‑8H或单克隆抗体9‑7B,有较高的特异性和灵敏性,两个抗体能够识别不同的抗原表位,能通过双抗夹心法制备检测试纸条。试验证明,本发明提供的单克隆抗体在制备用于检测犬瘟热病毒胶体金检测试纸条中,对犬细小病毒、犬腺病毒、犬冠状病毒、犬副流感病毒均无明显交叉反应,具有良好的特异性和更高的灵敏度。
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公开(公告)号:CN114606197B
公开(公告)日:2024-08-06
申请号:CN202210179221.4
申请日:2022-02-25
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/12 , C12N15/861 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种适合腺病毒载体增殖的MDCK‑KOslc35b2细胞系及其应用,所述细胞系的全基因组中,第12号的一个染色体上的slc35b2基因的第二段外显子基因序列上连续缺少七个碱基TCTGACT;第12号的另一个染色体上的slc35b2基因的第二段外显子基因序列上连续缺少十七个碱基GGTCCCTCTGACTTCGC。本发明在犬肾上皮细胞系MDCK中完全缺失SLC35B2的表达,缺失后影响细胞内相关蛋白酪氨酸的硫酸化,扰乱细胞内环境对DNA损伤修复及线粒体内稳态的调节。有利于腺病毒在细胞核内大量增殖,提高病毒的产量,降低临床中腺病毒载体疫苗的生产成本,利于重组腺病毒载体疫苗的研制。
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公开(公告)号:CN118345017A
公开(公告)日:2024-07-16
申请号:CN202410504504.0
申请日:2024-04-25
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种禽多杀性巴氏杆菌透明质酸合成酶敲除的突变菌株及其应用,所述突变菌株是以禽多杀性巴氏杆菌GX‑PM为原始菌种,敲除禽多杀性巴氏杆菌基因组上的hyaD‑X序列,其中,hyaD‑X序列为hyaD基因或hyaD基因上某一段序列。所述菌株mhyaD‑GX‑PM是以禽多杀性巴氏杆菌GX‑PM为原始菌种,将HyaD蛋白氨基酸序列中的第247位和第527位的两个谷氨酸均突变为天冬氨酸。本发明获得的禽多杀性巴氏杆菌弱毒菌株具有良好的体外生长、遗传稳定性和安全性;其中mhyaD‑GX‑PM对禽多杀性巴氏杆菌感染引起的急性死亡有良好的保护作用,可用来制备预防禽多杀性巴氏杆菌弱毒疫苗。
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公开(公告)号:CN114606197A
公开(公告)日:2022-06-10
申请号:CN202210179221.4
申请日:2022-02-25
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/12 , C12N15/861 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种适合腺病毒载体增殖的MDCK‑KOslc35b2细胞系及其应用,所述细胞系的全基因组中,第12号的一个染色体上的slc35b2基因的第二段外显子基因序列上连续缺少七个碱基TCTGACT;第12号的另一个染色体上的slc35b2基因的第二段外显子基因序列上连续缺少十七个碱基GGTCCCTCTGACTTCGC。本发明在犬肾上皮细胞系MDCK中完全缺失SLC35B2的表达,缺失后影响细胞内相关蛋白酪氨酸的硫酸化,扰乱细胞内环境对DNA损伤修复及线粒体内稳态的调节。有利于腺病毒在细胞核内大量增殖,提高病毒的产量,降低临床中腺病毒载体疫苗的生产成本,利于重组腺病毒载体疫苗的研制。
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公开(公告)号:CN109266593B
公开(公告)日:2021-08-24
申请号:CN201810970024.8
申请日:2018-08-24
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于Ngpiwi蛋白介导的禽多杀性巴氏杆菌基因敲除菌株及其构建方法和应用;所述禽多杀性巴氏杆菌基因敲除菌株为在禽多杀性巴氏杆菌基因组上缺失潜在毒力相关基因的ORF序列或部分序列的缺失菌株。该方法首先成功构建带有Ngpiwi和待缺失靶基因序列左右同源臂的重组质粒;其次将重组质粒电转入禽多杀性巴氏杆菌中,在28℃传代诱导双交换重组,PCR筛选出缺失靶基因序列的菌株,之后在42℃诱导质粒丢失,从而获得缺失潜在毒力基因相关序列的菌株。该遗传操作系统质粒较小,操作容易,应用广泛,不存在潜在的脱靶效应,敲除效率较高,无抗性基因筛选标记,为禽多杀性巴氏杆菌基因工程疫苗的研发提供了优良工具。
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公开(公告)号:CN108410784B
公开(公告)日:2021-07-27
申请号:CN201810076108.7
申请日:2018-01-26
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪链球菌△CPS/SsnA‑mSly(P353L)‑SC19工程菌及在疫苗中应用,该菌株以猪链球菌2型强毒分离株SC19为出发菌株,通过同源重组的方式,敲除了毒力基因cps和ssna,并将溶血素基因的353氨基酸由P突变成L,构建成功△CPS/SsnA‑mSly(P353L)‑SC19。菌株△CPS/SsnA‑mSly(P353L)‑SC19的致病力显著降低,作为灭活疫苗和弱毒疫苗菌株时,具有很好的安全性,免疫动物后可提供针对猪链球菌2型、7型等血清型菌株感染的保护效力。而且该疫苗免疫后不会产生针对SsnA的抗体,该菌株可作为区分疫苗免疫动物和野毒感染动物的基因标记疫苗的菌株,从而有利于该病的根除和净化。
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公开(公告)号:CN107164409B
公开(公告)日:2021-01-15
申请号:CN201710248897.3
申请日:2017-04-17
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种犬瘟热病毒敏感细胞系SLAM‑MDCK及其构建方法和应用。本发明通过将犬源信号淋巴激活分子(SLAM)通过逆转录病毒载体构建到MDCK细胞中,构建了稳定表达犬SLAM基因的MDCK细胞SLAM‑MDCK。犬瘟热病毒感染SLAM‑MDCK细胞系后,产生的病变快、增殖滴度高,适合犬瘟热病毒的分离和培养。因此,该细胞系在犬瘟热病毒的分离、感染犬瘟热的确诊、以及犬瘟热病毒疫苗的研制和生产中具有重要意义。
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公开(公告)号:CN110760617A
公开(公告)日:2020-02-07
申请号:CN201911172033.3
申请日:2019-11-26
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及兽医领域中的动物病毒检测技术领域,具体公开了一种检测非洲猪瘟病毒野毒的实时荧光PCR引物探针组合及试剂盒;基于该试剂盒的PCR方法不仅可特异地检测非洲猪瘟病毒野毒。与现有的p72的荧光PCR配合使用时,还可作为区分非洲猪瘟病毒野毒和MGF360-505R缺失弱毒疫苗毒株的方法,从而为检测非洲猪瘟病毒野毒及其感染动物提供重要工具,以利于该病的控制和净化。
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