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公开(公告)号：CN112322602A
公开(公告)日：2021-02-05
申请号：CN202011209142.0
申请日：2020-11-03
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种共表达磷脂酶促进蛋白在枯草芽孢杆菌中胞外表达的方法，属于生物工程、酶工程、微生物工程技术领域。本发明将磷脂酶和目标蛋白在枯草芽孢杆菌中共表达，可实现胞内定位目标蛋白胞外表达，可以使海藻糖合酶的胞外分泌量达到5.8～6.2U/mL，并使分支酶的胞外分泌量达到456～580U/mL，提高生产效率、简化后提取工艺，为规模化生产目的蛋白提供了应用基础，具有较高的学术意义和应用价值。
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公开(公告)号：CN108102995B
公开(公告)日：2020-12-01
申请号：CN201810145983.6
申请日：2018-02-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶生产菌株及其固定化方法，属于生物工程技术领域。本发明构建了产D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶的重组枯草芽孢杆菌pHY300PLK‑DPEase，以该重组菌作为生产菌株，固定化细胞后酶活回收率达64％，固定化细胞的最适温度较全细胞提高了5℃，最适pH无明显变化；以300g/L的果糖为底物连续转化7次，转化率仍可达28％，残留酶活还有81％。该固定化方法简单易行，固定化颗粒性能优异，具有很高的工业化应用价值。
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公开(公告)号：CN109486786B
公开(公告)日：2020-09-04
申请号：CN201811494800.8
申请日：2018-12-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种环糊精葡萄糖基转移酶突变体，属于基因工程和酶工程领域。本发明通过对环糊精葡萄糖基转移酶进行突变，得到了环糊精葡萄糖基转移酶歧化活力更高的突变体。突变体V6D、S90G、T168A、T171A、T383A、G608A和V6D/S90G/T168A/T171A/T383A/G608A的摇瓶发酵酶歧化活力分别为野生酶的1.89倍、1.21倍、1.21倍、1.22倍、1.32倍、2.03倍、3.16倍。本发明对环糊精葡萄糖基转移酶工业化生产具有一定意义，并提高了该酶的在食品、医药、化工行业中的应用潜力。
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公开(公告)号：CN111560361A
公开(公告)日：2020-08-21
申请号：CN202010466158.3
申请日：2020-05-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高AA-2G产量的环糊精葡萄糖基转移酶突变体，属于基因工程和酶工程领域。本发明通过对来源于Bacillus circulans 251的环糊精葡萄糖基转移酶进行改造，得环糊精葡萄糖基转移酶突变体Y195F。以廉价的淀粉或淀粉衍生物为底物，利用突变体Y195F催化生产AA-2G，AA-2G产量可达29g/L，较野生型提高了52.6％。
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公开(公告)号：CN111534498A
公开(公告)日：2020-08-14
申请号：CN202010466165.3
申请日：2020-05-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了歧化比活和AA-2G产量提高的环糊精葡萄糖基转移酶突变体，属于基因工程和酶工程领域。本发明将来源于PaenibacillusmaceransJFB05-01的环糊精葡萄糖基转移酶进行突变，得到的突变体歧化比活性显著提高，其中，突变体Y195F/Y260F生产AA-2G产量为22g/L，较野生酶提高46.7％，提高转化率，降低生产成本，适于工业化生产。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108018268B
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201810033866.0
申请日：2018-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高AA‑2G产量的环糊精葡萄糖基转移酶突变体，属于基因工程和酶工程领域。本发明通过环糊精葡萄糖基转移酶进行突变，得到的突变体生产AA‑2G产量较野生酶有了明显的提高，且本发明得到的环糊精葡萄糖基转移酶突变体产量高，纯化简单，适于工业化生产。
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公开(公告)号：CN107236696B
公开(公告)日：2019-11-26
申请号：CN201710637427.6
申请日：2017-07-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种表达L.mesenteroides来源的蔗糖磷酸化酶重组枯草芽孢杆菌，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过人工合成SPase基因、设计引物、PCR获得Leuconostoc mesenteroides来源蔗糖磷酸化酶目的基因，构建重组质粒pBSMuL3‑SP，并转化至枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis(CCTCC M2016536)，得到重组枯草芽孢杆菌。以此枯草芽孢杆菌为菌种，发酵生产SPase。将重组蔗糖磷酸化酶应用于制备α‑熊果苷具有比较好的效果。本发明以食品安全的枯草芽孢杆菌为表达宿主重组表达蔗糖磷酸化酶，产酶水平高，便于分离纯化，且发酵原料来源广泛，生产成本较低。
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公开(公告)号：CN106480771B
公开(公告)日：2018-12-04
申请号：CN201611203776.9
申请日：2016-12-23
Applicant: 江南大学
IPC: D21F1/66
Abstract: 本发明公开了一种利用角质酶处理造纸白水的方法，属于酶工程技术领域。本发明的方法采用高效稳定的角质酶酶催化分解三油酸甘油酯，聚醋酸乙烯酯等脂类，无需高温加热或剧烈搅拌，反应条件温和，降解率可达83.5％，环境友好。反应所需的角质酶生产简单，提高了生产效率。同时，酶法处理相较其他物理处理，步骤简单，在实际白水处理过程中，当加酶量为0.5～1U/g底物时也具有较好的处理效果，浊度差达95％以上。在角质酶处理过后的白水可以直接回用，部分或全部替代清洗用水，从而实现造纸系统用水的闭路循环，达到真正意义上的零排放。这些优势在环境保护日益受到重视的当今社会，显得尤为重要。
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公开(公告)号：CN108841772A
公开(公告)日：2018-11-20
申请号：CN201810777468.X
申请日：2018-07-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种高效表达α-淀粉酶的枯草芽孢杆菌工程菌，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的枯草芽孢杆菌工程菌以pHY300PLK为表达载体、以来源于嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)的高温α-淀粉酶基因为目的基因、以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WS5为表达宿主，并在目的基因的上游插入了信号肽基因。利用本发明的枯草芽孢杆菌工程菌可高效表达α-淀粉酶，将其作为生产菌株，摇瓶发酵48h，可将发酵液中α-淀粉酶的酶活提高至732.1U/mL。
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公开(公告)号：CN108753747A
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201810568791.6
申请日：2018-06-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性和海藻糖产量提高的MTSase突变体，属于酶工程以及蛋白质工程技术领域。本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体是通过将麦芽寡糖基海藻糖合成酶的一个氨基酸位点进行突变，得到了与亲本麦芽寡糖基海藻糖合成酶相比更高的热稳定性、更低的加酶量以及更高的产海藻糖转化率。本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体在50℃的半衰期比野生型增加12h，是野生型的1.3倍。
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