一种蔗糖磷酸化酶的固定化方法

    公开(公告)号:CN109371006A

    公开(公告)日:2019-02-22

    申请号:CN201811517830.6

    申请日:2018-12-12

    Abstract: 本发明公开了一种蔗糖磷酸化酶的固定化方法,属于生物工程技术领域。本发明以重组枯草芽孢杆菌SPase/pBSMuL3作为生产菌株,LX-1000EA固定化蔗糖磷酸化酶的酶活为7.75U/g,酶活回收率达到110.85%;LX-1000EA固定化蔗糖磷酸化酶的酶活为9.54U/g,酶活回收率达到101.82%。在相同的转化时间内,以0.5M蔗糖和0.5M葡萄糖为底物连续操作11次,氨基化树脂LX-1000EA固定化SPase保持39.15%的转化率,94%的残留酶活;氨基化树脂LX-1000HA固定化SPase保持42.5%的转化率,91%的残留酶活。结果表明,该固定化方法操作简单,固定化酶酶活没有损失,且应用效果很好,具有很高的工业化应用潜力。

    一种蔗糖磷酸化酶的固定化方法

    公开(公告)号:CN109371006B

    公开(公告)日:2021-12-14

    申请号:CN201811517830.6

    申请日:2018-12-12

    Abstract: 本发明公开了一种蔗糖磷酸化酶的固定化方法,属于生物工程技术领域。本发明以重组枯草芽孢杆菌SPase/pBSMuL3作为生产菌株,LX‑1000EA固定化蔗糖磷酸化酶的酶活为7.75U/g,酶活回收率达到110.85%;LX‑1000EA固定化蔗糖磷酸化酶的酶活为9.54U/g,酶活回收率达到101.82%。在相同的转化时间内,以0.5M蔗糖和0.5M葡萄糖为底物连续操作11次,氨基化树脂LX‑1000EA固定化SPase保持39.15%的转化率,94%的残留酶活;氨基化树脂LX‑1000HA固定化SPase保持42.5%的转化率,91%的残留酶活。结果表明,该固定化方法操作简单,固定化酶酶活没有损失,且应用效果很好,具有很高的工业化应用潜力。

    一种产蔗糖磷酸化酶的重组枯草芽孢杆菌及其应用

    公开(公告)号:CN107058205A

    公开(公告)日:2017-08-18

    申请号:CN201710414186.9

    申请日:2017-06-05

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种产蔗糖磷酸化酶的重组枯草芽孢杆菌及其应用,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过人工合成SPase基因、设计引物、PCR获得Bifidobacterium adolescentis来源蔗糖磷酸化酶目的基因,构建重组质粒pBSMuL3‑SP,并转化至枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis(CCTCC M2016536),得到重组枯草芽孢杆菌。以此枯草芽孢杆菌为菌种,发酵生产SPase。将重组蔗糖磷酸化酶应用于制备曲二糖具有比较好的效果。本发明以食品安全的枯草芽孢杆菌为表达宿主重组表达蔗糖磷酸化酶,产酶水平高,便于分离纯化,且发酵原料来源广泛,生产成本较低。

    一种产蔗糖磷酸化酶的重组枯草芽孢杆菌及其应用

    公开(公告)号:CN107058205B

    公开(公告)日:2020-05-08

    申请号:CN201710414186.9

    申请日:2017-06-05

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种产蔗糖磷酸化酶的重组枯草芽孢杆菌及其应用,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过人工合成SPase基因、设计引物、PCR获得Bifidobacterium adolescentis来源蔗糖磷酸化酶目的基因,构建重组质粒pBSMuL3‑SP,并转化至枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis(CCTCC M2016536),得到重组枯草芽孢杆菌。以此枯草芽孢杆菌为菌种,发酵生产SPase。将重组蔗糖磷酸化酶应用于制备曲二糖具有比较好的效果。本发明以食品安全的枯草芽孢杆菌为表达宿主重组表达蔗糖磷酸化酶,产酶水平高,便于分离纯化,且发酵原料来源广泛,生产成本较低。

    一种表达L.mesenteroides来源的蔗糖磷酸化酶重组枯草芽孢杆菌

    公开(公告)号:CN107236696B

    公开(公告)日:2019-11-26

    申请号:CN201710637427.6

    申请日:2017-07-31

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种表达L.mesenteroides来源的蔗糖磷酸化酶重组枯草芽孢杆菌,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过人工合成SPase基因、设计引物、PCR获得Leuconostoc mesenteroides来源蔗糖磷酸化酶目的基因,构建重组质粒pBSMuL3‑SP,并转化至枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis(CCTCC M2016536),得到重组枯草芽孢杆菌。以此枯草芽孢杆菌为菌种,发酵生产SPase。将重组蔗糖磷酸化酶应用于制备α‑熊果苷具有比较好的效果。本发明以食品安全的枯草芽孢杆菌为表达宿主重组表达蔗糖磷酸化酶,产酶水平高,便于分离纯化,且发酵原料来源广泛,生产成本较低。

    一种表达L. mesenteroides来源的蔗糖磷酸化酶重组枯草芽孢杆菌

    公开(公告)号:CN107236696A

    公开(公告)日:2017-10-10

    申请号:CN201710637427.6

    申请日:2017-07-31

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种表达L.mesenteroides来源的蔗糖磷酸化酶重组枯草芽孢杆菌,属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过人工合成SPase基因、设计引物、PCR获得Leuconostoc mesenteroides来源蔗糖磷酸化酶目的基因,构建重组质粒pBSMuL3‑SP,并转化至枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis(CCTCC M2016536),得到重组枯草芽孢杆菌。以此枯草芽孢杆菌为菌种,发酵生产SPase。将重组蔗糖磷酸化酶应用于制备α‑熊果苷具有比较好的效果。本发明以食品安全的枯草芽孢杆菌为表达宿主重组表达蔗糖磷酸化酶,产酶水平高,便于分离纯化,且发酵原料来源广泛,生产成本较低。

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